江苏省卫生厅科研基金(H201019)
- 作品数：13 被引量：33H指数：4
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- 相关机构：徐州医学院附属医院华中科技大学更多>>
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- 转录因子YY1对垂体瘤侵袭性的影响被引量：4
- 2014年
- 目的观察转录因子YY1(Yin-Yang 1)在垂体腺瘤中的表达情况,并进一步分析沉默YY1对大鼠垂体瘤GH3细胞侵袭性的影响。方法运用免疫组化技术观察YY1在不同类型垂体腺瘤组织中的表达情况。Western blot实验检测siRNA沉默大鼠垂体瘤GH3细胞中的基因YY1后,YY1蛋白及基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9的表达水平。采用Transwell chamber细胞侵袭实验观察沉默YY1对GH3细胞侵袭的影响。结果 YY1在侵袭性垂体腺瘤中表达升高;沉默YY1后,GH3细胞侵袭能力下降35.7%(P<0.05),MMP-2、MMP-9蛋白表达量下降(P<0.05)。结论转录因子YY1在侵袭性垂体腺瘤中的表达升高,并通过上调MMP-2、MMP-9的表达来促进GH3细胞侵袭性。
- 段海锋范月超
- 关键词：YY1垂体腺瘤迁移YY1
- 应用组织芯片技术研究Cullin1在胶质瘤组织中的表达及意义被引量：1
- 2015年
- 目的探讨胶质瘤组织中Cullin1的表达及其与临床病理资料之间的关系。方法采用免疫组化法检测胶质瘤组织芯片（正常脑组织8例、癌旁组织8例、胶质瘤组织191例）中Cullin1的表达量及其与临床病理资料之间的关系。结果Cullin1在胶质瘤中的表达量明显高于正常脑组织和癌旁组织（P〈0．05），但是在Cullin1表达量和相应临床病理资料之间未发现有任何联系。结论Cullin1在胶质瘤中的表达量明显升高，促进了肿瘤的发生和发展。
- 朱一硕张芸许宁陈洪福张慧梅鹏金范月超
- 关键词：胶质瘤组织芯片免疫组化
- 低表达泛素连接酶CHIP对脑胶质瘤细胞U87迁移、侵袭及增殖的影响
- 2013年
- 目的探讨低表达泛素连接酶CHIP对脑胶质瘤细胞U87迁移、侵袭和增殖的影响。方法运用ControlsiRNA、CHIP siRNA分别转染脑胶质瘤细胞U87,Western blot检测CHIP蛋白表达情况,CCK-8细胞增殖实验检测CHIP siRNA对U87细胞增殖的影响,Transwell chamber细胞迁移、侵袭实验检测CHIP siRNA对U87细胞迁移、侵袭的影响。结果与Control siRNA组相比,CHIP siRNA组U87细胞CHIP蛋白表达量降低,CHIP siRNA组U87细胞增殖和迁移、侵袭数增加(P均<0.05)。结论 CHIP siRNA靶向干扰了泛素连接酶CHIP的表达,CHIP作为肿瘤抑癌因子抑制脑胶质瘤细胞U87的迁移、侵袭及增殖。
- 范月超陈洪福张慧梅鹏金纪建永颜丙超
- 关键词：CHIP肿瘤浸润增殖
- 端粒结合因子－1在脑膜瘤中的表达及临床意义被引量：1
- 2013年
- 目的探讨端粒结合因子－1（TRF1）在脑膜瘤及正常脑组织中的表达及其临床意义。方法选取26例脑膜瘤（其中良性脑膜瘤18例，恶性脑膜瘤8例）和10例正常脑组织（脑外伤患者内减压切除的脑组织）石蜡切片标本作为研究对象，应用免疫组化技术检测各组TRF1的表达水平，应用半定量法计算不同标本肿瘤细胞免疫标记的频率和强度积分。结果所有肿瘤组织及正常脑组织中均检测到TRF1表达，其中正常脑组织中TRF1表达高积分构成比为90．00％，良性脑膜瘤的TRF1高积分构成比为66．67％，恶性（间变性）脑膜瘤组为12．50％。经统计分析发现，TRF1在脑膜瘤中的表达与其恶性程度成负相关（L=－0．586，P=0．002）。结论TRF1在人脑膜瘤组织及正常脑组织中均有广泛表达，其在脑膜瘤中的表达水平与其恶性程度呈负相关，TRF1可作为脑膜瘤病理分级及恶性程度判断的参考指标。
- 苗发安陈晨张慧梅鹏金范月超
- 关键词：脑膜瘤免疫组织化学
- 靶向Dicer酶的小干扰RNA对人脑胶质瘤细胞生物学行为的影响被引量：6
- 2013年
- 目的观察敲低Dicer酶的表达对人脑胶质瘤细胞U87、U251的生物学行为的影响。方法采用小干扰RNA（siRNA）技术敲低Dicer酶的表达，Westernblot检测U87、U251细胞转染小干扰RNA24h后Dicer酶表达；应用细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测、Tranwell试验及明胶酶谱实验检测细胞增殖、侵袭及基质金属蛋白激酶[基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9]的活性。结果转染siRNA靶向Dicer酶后，Dicer酶较对照组降低68．0％（U87）和60．3％（U251）（P〈0．05）。两组细胞的增殖率分别明显高于相对应的对照组，且随时间的延长差距也随之增大（P〈0．05）。siRNA组细胞侵袭数（77．9±8．3）个（U87）和（81．0±7．9）个（U251）较阴性对照组（40．6±7．0）个（U87）和（35．8±6．5）个（U251）明显增多（P〈0．05）。siRNA组MMP-2较对照组活性增加（1．35±0．17）倍（U87）、（1．19±0．06）倍（U251）（P〈0．05）；MMP-9较对照组活性增加（1．72±0．37）倍（U87）、（1．66±0．33）倍（U251）（P〈0．05）。结论敲低Dicer酶表达后，人胶质瘤细胞增殖能力增加，MMP-2、MMP-9活性增强，侵袭性增强。
- 范月超张慧郑骏年梅鹏金陈晨苗发安雷霆
- 关键词：小干扰RNADICER酶胶质瘤
- 小干扰垂体特异性转录因子-1对大鼠垂体生长激素肿瘤细胞侵袭行为的影响
- 2011年
- 目的:研究垂体特异性转录因子-1(pituitary-specific transcription factor-1,pit-1)siRNA转染大鼠GH3型垂体瘤细胞后对其生物学特性的影响。方法:设计合成pit-1 siRNA,经脂质体(lipofectin)转染大鼠垂体瘤细胞后,通过RT-PCR检测瘤细胞内pit-1 mRNA表达的变化;制备Boyden小室测定pit-1 siRNA对肿瘤细胞侵袭力和趋化作用的影响。结果:pit-1 siRNA转染大鼠GH3细胞24 h后,pit-1 mRNA和pit-1蛋白的表达明显低于阴性对照组(P<0.05)。透过基质凝胶多孔滤膜的大鼠GH3细胞瘤细胞的数量都显著低于阴性对照组(P<0.05)。结论:pit-1对大鼠垂体瘤细胞的侵袭性呈正相关,在生长激素腺瘤的发病机制中起重要作用。
- 范月超张慧李锦晓李中林纵振坤陈晨冯力苗发安谢满意
- 关键词：RT-PCRBOYDEN小室细胞侵袭力
- 热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白小干扰RNA对人脑胶质瘤细胞周期及增殖的影响被引量：1
- 2013年
- 目的 观察热休克蛋白70羧基末端相互作用蛋白（CHIP）小干扰RNA（siRNA）对人脑胶质瘤细胞周期及增殖的影响.方法 运用Control siRNA、CHIP siRNA分别转染原代培养人脑胶质瘤细胞,Western blot检测CHIP蛋白表达,流式细胞仪检测CHIP siRNA对原代培养人脑胶质瘤细胞周期的影响,细胞计数试剂盒（CCK-8）细胞增殖实验检测CHIP siRNA对原代培养人脑胶质瘤细胞增殖的影响.结果 与Control siRNA组比较CHIP siRNA组原代培养人脑胶质瘤细胞CHIP蛋白表达量降低53.3％,CHIP siRNA组原代培养人脑胶质瘤细胞增殖细胞数增加,并且G1期细胞数所占比例减少14.1％,S期细胞数所占比例增加13.7％ （P ＜0.05）.结论 CHIP siRNA靶向干扰了CHIP的表达,CHIP作为肿瘤抑癌因子抑制脑胶质瘤细胞的增殖,并能使细胞阻滞在G1期.
- 范月超陈洪福郑骏年张慧梅鹏金纪建永颜丙超雷霆
- 关键词：增殖细胞周期
- 过表达HMGA2对人垂体生长激素腺瘤细胞增殖及周期的影响
- 2013年
- 目的探讨过表达高迁移率族蛋白A2(HMGA2)对人垂体生长激素腺瘤细胞增殖及周期的影响。方法 HMGA2过表达质粒转染原代培养人垂体生长激素腺瘤细胞(转染组)。蛋白免疫印迹法(Western blot)、细胞增殖实验(cell counting kit-8,CCK-8)、流式细胞仪术分别检测HMGA2过表达质粒转染垂体生长激素腺瘤细胞后对HMGA2蛋白表达、细胞增殖、细胞周期的影响。结果 24h后转染组垂体生长激素腺瘤细胞HMGA2蛋白表达水平高于空载体组(转染空质粒的细胞)(P<0.05);较空载体组在24、48、72、96h4个时间点OD值较大,差异均有统计学意义(P<0.05);转染组细胞增殖数量增加,与空载体组相比转染组细胞G1期所占比例减少,S期所占比例增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论过表达HMGA2促进垂体腺瘤细胞增殖,促进细胞G1期进展。
- 范月超颜丙超陈洪福纪建永张慧梅鹏金
- 关键词：垂体肿瘤增殖细胞周期
- 靶向垂体特异转录因子-1的小干扰RNA对大鼠生长激素垂体腺瘤GH3细胞生物学行为的影响
- 2013年
- 目的观察小干扰RNA（siRNA）抑制大鼠垂体生长激素腺瘤细胞（GH3）中垂体特异转录因子．1（Pit-1）的基因表达对其生物学行为的影响。方法设计合成针对Pit-1基因的siRNA，经脂质体包裹转染GH3细胞。采用Westernblot、逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法测定经siRNA转染24h后；Pit．1蛋白和Pit-1mRNA表达；用细胞计数试剂盒（CCK-8）细胞增殖-毒性检测法检测细胞生长增殖的变化；用流式细胞仪检测细胞凋亡的改变；制备Transwell小室测定GH3细胞体外侵袭能力的变化。结果siRNA显著地抑制Pit-1蛋白和Pit-1mRNA的表达水平，分别降低58．18％和75．82％；CCK．8法结果显示siRNA组细胞增长率明显低于与阴性对照组；流式细胞仪分析显示，siRNA组细胞凋亡率[（9．25000±0．99695）％]较阴性对照组[（2．89330±0．66516）％]增加；，siRNA组穿过Matrigel胶及滤膜的细胞数[（92．91±53．25）个]，与阴性对照组[（7．50±7．95）个]比较侵袭力明显减弱，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Pit-1siRNA能够有效地抑制GH3细胞的生长、促进其凋亡，降低侵袭力。
- 范月超张慧李锦晓梅鹏金郑骏年雷霆
- 关键词：垂体腺瘤小干扰RNA生物学行为
- 短发夹RNA抑制高迁移率蛋白A2基因表达后对垂体生长激素腺瘤细胞生物学行为的影响被引量：6
- 2013年
- 目的观察RNA干涉后高迁移率蛋白A2（HMGA2）在垂体生长激素（GH）腺瘤细胞中表达的变化，探讨HMGA2基因表达的抑制对GH腺瘤细胞增殖、凋亡和侵袭性的影响。方法构建针对人HMGA2基因的短发夹RNA（shRNA）真核表达载体，瞬时转染GH腺瘤细胞。用Western blot法观察转染24h后HMGA2蛋白表达水平，经细胞增殖-毒性检测试剂盒（CCK-8）测定、流式细胞仪（FCM）检测及Transwell小室检测转染后GH腺瘤细胞增殖、凋亡及侵袭。结果HMGA2-shRNA组HMGA2蛋白表达水平与空白对照组比较下降45．58％，与scrambled组比较下降40．98％，差异有统计学意义（P〈0．05）。细胞增殖反应结果显示实验组细胞增殖率显著低于对照组（P〈0．05）。细胞凋亡率的结果显示与空白对照组、scrambled组比较，HMGA2-shRNA组的细胞凋亡率明显增加[（18．32±1．73）％比（7．32±1．06）％、（9．21±1．12）％，P〈0．05]。体外侵袭实验显示GH腺瘤细胞侵袭力受到明显抑制（P〈0．05）。结论靶向HMGA，基因的shRNA可以有效抑制垂体GH腺瘤细胞的增殖和侵袭力，并促进细胞的凋亡。
- 范月超张慧梅鹏金李中林陈晨苗发安雷霆
- 关键词：短发夹RNA脱噬作用
