国家自然科学基金(30040001)
- 作品数：6 被引量：27H指数：4
- 相关作者：徐运王岚黄嵘管得宁王中原更多>>
- 相关机构：南京大学医学院附属鼓楼医院约翰·霍普金斯大学中山大学附属第一医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 植物雌激素与脑保护作用被引量：6
- 2004年
- 植物雌激素是一类具有类似动物雌激素生物活性的植物成分 ,它们对激素相关疾病有广泛作用 ,尤其对生殖系统癌症 ,心血管病和骨质疏松有一定的预防作用 ,机制也相对明确。近来对中枢神经系统方面的研究越来越受到重视 ,尤其是对中枢神经系统的保护作用。
- 俞娟徐运倪秀石
- 关键词：植物雌激素脑血管疾病痴呆激素
- 体外诱导胚胎干细胞分化为毛细胞的实验研究被引量：10
- 2004年
- 目的 体外定向诱导小鼠胚胎干细胞分化为内耳毛细胞。方法 用不同的培养液和多种细胞因子在体外进行胚胎干细胞向内耳毛细胞诱导分化的实验研究 ,并用WesternBlot和细胞免疫组化对分化不同阶段的特异性分子指标进行了鉴定。结果 从形态学上 ,团状或簇状小的圆型干细胞诱导分化成类神经样细胞 ;Westernblot和免疫组化提示不同时期表达不同的特异性蛋白 ,如胚胎干细胞未分化期表达SSEA -1,增殖期为phalloidi、nestin、CD3 4、BrdU ,毛细胞形成期为Math1、Brn3C和Calretinin。结论 体外已成功将胚胎干细胞诱导分化为具有分子特征的内耳毛细胞。
- 徐运胡娅莉刘卫彬王岚管得宁黄嵘王中原
- 关键词：毛细胞小鼠
- 血小板活化因子介导神经元损伤与天门冬氨酸信号通路的研究被引量：4
- 2004年
- 目的 探讨血小板活化因子 (PAF)诱导的神经元凋亡是否涉及N 甲基 D 天门冬氨酸 (NMDA)信号传导通路。方法 用原代小鼠大脑皮质神经元培养系统 ,不同剂量PAF处理神经元 2 4h或PAF受体拮抗剂 (BN 5 2 0 2 1)、NMDA受体拮抗剂 (MK 80 1)和一氧化氮合酶抑制剂 (L NAME)预处理 30min ;碘化物 (PI ) /calcein(钙黄绿素 )染色 ,荧光显微镜摄像 ,计算细胞死亡率。同时免疫印迹蛋白测定神经型一氧化氮合成酶(nNOS)表达水平及用3 H标记放免法检测nNOS的活性。结果 (1)不同剂量 (0 0 1、0 1、0 3、0 6 μmol/L)的PAF处理神经元 2 4h ,均可致神经元死亡 ,0 3和 0 6 μmol/L组与对照组相比 ,差异均有显著性 (均 P <0 0 1)。(2 )PAF神经毒性作用不仅被BN 5 2 0 2 1所拮抗 ,MK 80 1、L NAME也可减轻其作用。 (3)PAF增加神经元的nNOS蛋白的表达 ,同时也增加其活性。结论 PAF对神经元的损伤作用与NMDA信号通路激活有关。
- 徐运王岚管得宁王翀黄嵘朱琳陶元祥
- 关键词：血小板活化因子神经元培养神经毒性
- 大鼠脑缺血再灌注后血小板活化因子及其受体的病理作用被引量：5
- 2006年
- 目的探讨血小板活化因子(PAF)及其受体(PAFR)在大鼠缺血再灌注后的病理性神经毒性作用及其可能的干预方法。方法选用SD大鼠建立一侧大脑中动脉缺血再灌注模型,于缺血再灌注后3h、6h、12h用高效薄层层析法测定大脑皮质缺血侧和缺血对侧PAF含量、RT-PCR检测PAFR基因表达。使用原代野生型小鼠皮质神经元细胞培养系统,将体外培养的神经元分为空白对照组、PAF组和PAF+拮抗剂组,应用碘化物/钙黄绿素染色分别检测各组细胞凋亡情况。结果缺血侧的大鼠皮质在缺血再灌注后3h、6h、12h PAF含量(单位为ng/g)分别为13·71±1·23、17·90±1·14和17·89±1·54;PAFR基因表达(单位为密度)分别为0·5892±0·1222、2·0512±0·1519、2·0168±0·1653,缺血再灌注6h、12h组缺血侧皮质PAF含量及PAFR基因表达与缺血对侧、再灌注3h比较差异有极显著性(均P<0·01);在进一步的体外小鼠皮质神经元细胞培养中,PAF组、PAF+受体拮抗剂组细胞凋亡率分别为(41·92±1·39)%和(18·94±1·18)%,与空白对照组[(10·23±0·59)%]比较差异有极显著性(均P<0·01),PAF+受体拮抗剂组细胞凋亡率与PAF组比较明显降低(P<0·01)。结论缺血性神经损伤作用是由PAF及其受体介导,用PAFR拮抗剂进行干预,对缺血缺氧性神经元损伤具有保护作用。
- 王岚张颖冬徐运王翀黄嵘王晓云朱文斌
- 关键词：脑缺血血小板活化因子受体拮抗剂
- 血小板活化因子通过N-甲基-D-天(门)冬氨酸/突触后密度蛋白93途径致神经元损伤被引量：3
- 2005年
- 目的 探讨血小板活化因子(PAF)所致的神经元损伤是否涉及N 甲基 D 天(门)冬氨酸/突触 后密度蛋白93(NMDA/PSD93)信号通路。方法 细胞培养系统培养原代野生型和PSD93基因敲除型小鼠皮 质神经元;0.3μmol/LPAF处理神经元24h或5μmol/LPAF受体拮抗剂(BN52021),10μmol/L非竟争性 NMDA受体拮抗剂(MK 801)和60μmol/L神经性一氧化氮合成酶(nNOS)抑制剂(L NAMA)预处理,碘化 物/钙黄绿素染色检测细胞凋亡;免疫印迹检测野生型和基因敲除型小鼠皮质神经元中的多种蛋白表达;细 胞免疫组化和共聚焦显微镜观察在同一神经轴突上共同表达多种蛋白;放免法测定神经元细胞蛋白中环鸟 苷磷酸(cGMP)活性。结果 (1)PSD93基因敲除型神经元不表达PSD93外,与野生型一样表达PSD95、N 甲基 D 天(门)冬氨酸受体(NR2A)和nNOS。(2)神经轴突共同表达PSD93、NR2A和nNOS。(3)PSD93基因敲除型 小鼠皮质神经元减少PAF对神经的毒性作用,并降低其cGMP活性。结论 PAF通过NMDA/PSD93途径致神 经细胞损伤。
- 徐运王岚黄嵘王翀管得宁王中原朱琳陶元祥
- 关键词：血小板活化因子皮质神经元
- 突触后密度蛋白93基因敲除抑制血小板活化因子性神经元损害被引量：1
- 2004年
- 目的 探讨血小板活化因子 (PAF)所致的神经元毒性损伤是否受突触后密度蛋白 93(PSD93 )基因调控。方法 用PAF处理培养的野生型和PSD93 基因敲除型的小鼠皮质神经元 ;经碘化物 (PI) /钙黄绿素(Calcein)染色 ,荧光显微镜观察并计算细胞死亡率 (% ) ;细胞生存能力检测 (MTT)神经元生存能力 ;免疫印迹法测定PSD93 和PSD95蛋白的表达。结果 野生型神经元表达PSD93 和PSD95蛋白 ,PSD93 基因敲除型只表达PSD95,不表达PSD93 ;基因敲除型的小鼠皮质神经元凋亡明显低于野生型 (P <0 0 5 ) ,生存能力高于野生型(P <0 0 1)。结论 PSD93
- 徐运黄嵘管得宁王岚王中原王晓云陶元祥
- 关键词：血小板活化因子神经元细胞凋亡
