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抗鹿源牛病毒性腹泻-粘膜病病毒特异性单克隆抗体的制备与鉴定被引量：4: 2010年; 为建立鹿源牛病毒性腹泻-粘膜病病毒(BVDV)检测方法,本研究制备了抗鹿源BVDV特异性单克隆抗体(MAb)。用纯化的BVDV免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经3次有限稀释法克隆和间接ELISA法筛选,获得2株稳定分泌MAb的杂交瘤细胞株2A3和4B12。通过间接ELISA检测,MAb效价为:上清液及腹水分别为1∶512、1∶640和1∶12800、1∶16000;MAb的亚类鉴定结果表明,2株杂交瘤细胞分泌的抗体亚类均为IgGl亚类;经ELISA测定,2A3和4B12与BVDVC24V株、HCV、BDV、PRV均不发生交叉反应,但与BVDVCCSYD株发生交叉反应;IFA试验结果显示,4B12和2A3与接种BVDVN71株病毒液的细胞反应产生较强的特异荧光;抗原识别位点分析结果表明,2A3和4B12两株MAb所识别的抗原位点相同。这两株MAb的获得为鹿BVDV的检测方法的建立奠定良好的基础。; 杜锐尹茉莉时坤郑鑫兰海楠; 关键词：牛病毒性腹泻-粘膜病病毒单克隆抗体间接ELISA

卡介苗预防动物结核病的研究进展被引量：2: 2011年; 全球结核病疫情呈上升趋势,卡介苗是预防该病的有效制剂,对卡介苗进行更加深入的研究显得尤为重要。本文从BCG免疫时间的选择、剂量、接种方式、免疫次数及佐剂等方面介绍了目前BCG的研究进展。; 张梦时坤刘晓陈丽娟于淼刘东旭杜锐; 关键词：卡介苗结核病

鹿结核病的诊断方法研究进展被引量：3: 2009年; 鹿结核病是由结核分枝杆菌引起的鹿的一种慢性、消耗性传染病,广泛流行于世界各地,几乎每个国家的鹿场都曾发生过结核病或曾经检出过结核病菌。鹿结核病目前尚无规定性的诊断方法,本文对鹿结核病的诊断方法研究进展作综述,作为进一步研究发展鹿结核病的诊断方法的借鉴。; 李健明于本峰姚波时坤刁燕杜锐; 关键词：鹿结核病结核分枝杆菌结核菌素试验

牛病毒性腹泻-黏膜病病毒Changchun184株E_2基因在卡介苗中的表达被引量：7: 2009年; 在成功克隆牛病毒性腹泻-黏膜病病毒Changchun184株E2基因的基础上,将E2基因与表达载体pMV261连接,构建了重组穿梭质粒pMV261-E2,后电转化到卡介苗中,获得了具有卡那霉素抗性的重组卡介苗,并对重组卡介苗进行菌落PCR鉴定。在45℃下热诱导E2基因在重组卡介苗中的表达,并对表达产物进行SDS-PAGE电泳和Wesern blotting分析。结果证明,牛病毒性腹泻-黏膜病病毒Changchun184株E2基因在卡介苗中成功的表达。; 杜锐刁燕韩俊友张西臣时坤; 关键词：牛病毒性腹泻-黏膜病 E2基因重组卡介苗

牛病毒性腹泻疫苗的研究进展被引量：6: 2010年; 综述了牛病毒性腹泻病毒(BVDV)常规疫苗的应用情况以及国内外新型疫苗的研究进展,为国内疫苗研制及应用提供借鉴。; 王慧慧时坤于本峰刁燕杜锐; 关键词：牛病毒性腹泻常规疫苗新型疫苗

鹿源牛病毒性腹泻—黏膜病病毒E_2基因的克隆与序列分析被引量：1: 2009年; 对已发表的牛病毒性腹泻—黏膜病毒E2基因的核苷酸序列进行比较分析并设计引物,应用套式RT-PCR获得鹿源BVDV E2基因。测序分析结果表明:鹿源BVDV E2基因由1 122个核苷酸组成,编码374个氨基酸。与Oregon CV24、NADL、ZM-95、SD1、Osloss、S10、SH9、Changchun184、Shitara、Deer-GB1核苷酸和推导氨基酸同源性分析表明:鹿源DVBV分离株与Changchun 184株及Osloss株的同源性较高,分别为99.2%和92.8%;与日本Shitara株的同源性为71.2%;与国际标准毒株CV24的同源性为74.6%。; 杜锐刘苓钰徐兴然时坤; 关键词：E2基因克隆

细胞活力及细胞免疫力检测方法的研究进展被引量：3: 2013年; 随着人们生活水平的不断提高,肿瘤、癌症、药物敏感、免疫缺陷和病毒性感染病等恶性疾病也相继大量出现,而用于检测细胞活性及其免疫力的相关试验都将要求趋于快速、简捷和准确的特点。通过近年来国内外检测细胞活力及其免疫力的试验,作者对推知待测样品水平的方法,包括淋巴细胞转化试验、酶联免疫吸附试验、细胞毒性T细胞检测、白细胞介素12检测及流式细胞术等的研究概况进行综述。; 杨宇航王文玉刘红娜刘东旭时坤李健明杜锐; 关键词：酶联免疫吸附试验细胞毒性T细胞白细胞介素12 流式细胞术

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国家自然科学基金(30671572)