江西省卫生厅基金(200204)
- 作品数:1 被引量:0H指数:0
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- 相关机构:江西省医学科学研究所南昌大学更多>>
- 发文基金:江西省自然科学基金江西省卫生厅基金更多>>
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- 人可溶性粘附素5截短体的克隆、表达及生物活性测定
- 2008年
- 目的:克隆和转染人可溶性粘附素5截短体(sCadherin5△),并检测其生物活性。方法:RT-PCR扩增Cadher-in5△cDNA,并克隆入pMSCV逆转录病毒载体,构建pMSCV/sCadherin5△,转化感受态大肠杆菌XL-blue菌株,提取、纯化和酶切质粒,测序分析sCadherin5△,转染NIH3T3细胞,mRNA和蛋白质水平检测NIH3T3细胞表达和分泌sCadherin5△,MTT方法检测sCadherin5△生物活性。结果:PCR产物约为1128bp,构建了pMSCV/sCadherin5△质粒载体,序列测定的结果与GeneBank中Cadherin5胞膜外区121bp至1248bp之间的序列一致。pMSCV/sCadherin5△转染的NIH3T3细胞表达和分泌sCadherin5△,sCadherin5△抑制HUVEC细胞体外增殖。结论:克隆、表达和分泌了具有生物活性的人sCadherin5△。
- 李文林石小玉熊丽霞王志刚周莹李红
- 关键词:克隆逆转录病毒载体NIH3T3细胞