目的:制备抗干扰素诱导的跨膜蛋白-1(interferon-induced transmembrane protein 1,IFITM1)的单克隆抗体,为检测IFITM1及进一步研究其在结肠肿瘤发生过程中的作用提供实验基础。方法:以结肠癌患者的癌组织为材料,提取总RNA,以RT-PCR扩增得到IFITM1 cDNA序列,经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切后,克隆入pGEX-4T-3进行原核表达并纯化得IFITM1-GST;以该融合蛋白免疫BALB/c小鼠,淋巴细胞杂交瘤法制备单克隆抗体;采用ELISA、Western-blot及免疫组织化学法以制备的抗体检测结肠癌患者结肠癌组织中的IFITM1。结果:成功构建了IFITM1原核表达载体,获得了IFITM1-GST重组蛋白;制备得到了1株抗IFITM1单克隆抗体,腹水ELISA效价为1:30000,抗体亚类为IgG1,可用于ELISA、Western-blot及免疫组织化学法检测结肠癌患者结肠癌组织中的IFITM1。结论:获得了1株可用于ELISA、Western-blot及免疫组织化学法的抗IFITM1单克隆抗体2F-1,为进一步研究IFITM1在结肠肿瘤发生过程中的作用提供了实验基础。
目的明确肝癌细胞系HepG2中前S2区突变乙型肝炎表面抗原大蛋白（hepatitis Bvirus large surface protein，LHBs）与C53蛋白相互作用对细胞生物学功能的影响。方法分别构建pc—MV-5a·pres2LHBs和pCDNA-4-C53质粒，共同转染肝癌细胞系HepG2后，分别检测其相互作用对Chkl活性的影响；BrdU法细胞增殖检测明确其对细胞有丝分裂及增殖的影响。结果成功构建pc—MV-5a—pres2LHBs和pCDNA-4-C53质粒；其在细胞内的相互作用增加细胞Cdkl活性并促进细胞的增殖和有丝分裂过程。结论肝癌细胞系HepG2内pres2LHBs及C53的相互作用对细胞生物学功能存在影响，提示可能与HBV后肝癌的发病机制相关。
