国家自然科学基金(30371297)
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 相关作者：陆前进肖嵘李亚萍文海泉丁艳更多>>
- 相关机构：中南大学湘雅二医院南华大学密歇根大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- SLE患者T淋巴细胞穿孔素mRNA及其蛋白的表达被引量：1
- 2007年
- 为了解系统性红斑狼疮（SEE）患者穿孔素mRNA及其蛋白表达水平。检测了活动期SLE患者的CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞穿孔素mRNA及其蛋白表达水平。
一、研究对象 活动期SLE患者组9例。均来自2004年10月至2005年6月在我院门诊和住院的患者。均为初诊而未治疗或因停药（2个月以上）等原因病情活动但尚未再治疗的活动期SLE患者。其中男2例，女7例，年龄17～43岁，平均年龄（27．4±8．3）岁。
- 李勇坚肖嵘李亚萍张桂英丁艳杨心洁张静苏玉文陆前进文海泉
- 关键词：淋巴细胞穿孔素蛋白表达水平SLE患者CD8^+T平均年龄CD4^+
- T细胞DNA低甲基化在SLE的研究进展被引量：5
- 2005年
- 系统性红斑狼疮是一种自身免疫性疾病,越来越多的研究认为DNA甲基化异常在其发病中起重要作用。为此,总结了系统性红斑狼疮的甲基化特征、T细胞发生DNA低甲基化的机制、DNA低甲基化引起SLE的相关基因变化、基因活性的变化引发系统性红斑狼疮的主要途径,其中重点综述了淋巴细胞功能相关抗原1、穿孔素、CD70分子过度表达而引发系统性红斑狼疮的3种途径的新进展。
- 丁艳肖嵘李亚萍文海泉陆前进
- 关键词：低甲基化SLE自身免疫性疾病系统性红斑狼疮
- SLE患者T淋巴细胞穿孔素基因启动子区域甲某化状态的探索被引量：4
- 2007年
- 目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)T淋巴细胞穿孔素基因启动子区域DNA甲基化状态及其在发病机制中的作用。方法分离9例活动期SLE患者和7例正常人对照外周血CD4^+与CD8^+T细胞,并分别提取DNA。采用亚硫酸氢钠-测序法对CD4^+与CD8^+T细胞穿孔素基因启动子区域DNA甲基化水平进行检测。结果在穿孔素基因启动子区域,正常对照组CD4^+T细胞平均甲基化水平显著高于CD8^+T细胞(P<0.05)。活动期SLE患者CD4^+T细胞平均甲基化水平显著低于正常对照组(P<0.05),而CD8^+T细胞与正常对照组的差异则无统计学意义(P>0.05)。结论活动期SLE患者的CD4^+T淋巴细胞的穿孔素基因启动子区域处于低甲基化状态。
- 肖嵘李勇坚陆前进李亚萍丁艳杨心洁周英张静李干群梁云生文海泉
- 关键词：DNA甲基化穿孔素
- 穿孔素基因启动子的克隆及体外区域性高甲基化
- 2009年
- 目的克隆穿孔素基因启动子区域（PRF1），并对PRF1进行体外区域性高甲基化，为探讨穿孔素基因调控序列高甲基化能否引起穿孔素表达下调奠定基础。方法PCR扩增穿孔素基因启动子区域（PRFI）后，先将PRFI克隆到T载体，再定向亚克隆至报告基因载体；然后对PRF1片段进行体外区域性高甲基化。结果（1）克隆PRF1到报告基因载体pGL3-Basic后双酶切及测序鉴定结果正确。（2）对PRF1片段进行体外区域性高甲基化后鉴定显示PRF1片段区域性高甲基化完全。结论成功克隆PRF1至报告基因载体pGL3-Basic并对PRF1片段进行体外区域性高甲基化，为今后研究奠定了基础。
- 袁娟肖嵘陆前进李亚萍杨心洁汪峰湛意张桂英张静周英
- 关键词：DNA甲基化
- 5-杂氮胞苷对成人T淋巴细胞穿孔素基因启动子区域甲基化水平的影响被引量：2
- 2006年
- 目的:研究DNA低甲基化对穿孔素基因mRNA和蛋白表达的影响。方法:密度梯度离心分离正常成人的外周血淋巴细胞,磁珠分离CD4和CD8细胞后进行细胞培养,DNA甲基化抑制剂5-杂氮胞苷(5-azaC)处理。分别提取DNA、RNA和蛋白质。亚硫酸氢钠处理DNA,巢式PCR进行扩增、转化入大肠杆菌,挑取克隆测序。实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测穿孔素mRNA的表达,Western印迹检测穿孔素蛋白量的变化。结果:5-azaC处理后的CD4细胞和CD8细胞穿孔素mRNA和蛋白表达显著高于未处理的CD4和CD8细胞组(P<0.05)。测序结果显示5-azaC处理后的CD4细胞和CD8细胞DNA穿孔素启动子区域的甲基化水平降低,与未处理的CD4和CD8细胞组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:5-azaC处理后CD4和CD8细胞穿孔素mRNA的表达和蛋白的表达都有显著的增高,这种增高与CD4和CD8细胞穿孔素基因启动子区域出现的低甲基化有关。
- 肖嵘丁艳陆前进李亚萍李勇坚杨心洁苏玉文梁云生张桂英文海泉
- 关键词：穿孔素甲基化
