国家自然科学基金(810300453087300630901771)
- 作品数：1 被引量：7H指数：1
- 相关作者：彭亮蒲长宇闵婕张瑞周后龙更多>>
- 相关机构：第四军医大学第四军医大学唐都医院更多>>
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- 不同结构形式的HBX蛋白对其在肝细胞癌HepG2中分布的影响被引量：7
- 2011年
- 目的:本研究选用不同的真核表达载体,分别克隆并构建了包含HBX基因或其与GFP以不同方式融合表达的重组质粒,探究不同结构的HBX蛋白对其在细胞内定位的影响。方法:以本实验室构建好的pcDNA3.0-HBX质粒为摸板,采用PCR方法扩增Flag-HBX,克隆至pMD-18T载体中,测序正确后,分别亚克隆至不同载体,构建重组质粒pFlag-HBX-IRES2-EGFP,pEGFP-C3-Flag-HBX,pFlag-HBX-EGFP-N3,鉴定正确后瞬时转染肝癌HepG2细胞,通过间接免疫荧光染色显示HBX蛋白的细胞内定位和分布。结果:成功构建出三种Flag-HBX的真核重组质粒;不同重组质粒转染HepG2细胞后,间接免疫荧光显示与GFP不同融合形式的HBX蛋白在细胞内存在不同的分布特征。结论:为研究HBX在肝癌发生发展中的作用提供了有意义的实验依据,尤其是对体外细胞转染结果的解释提供了借鉴。
- 彭亮张瑞赵晶闵婕蒲长宇周后龙杨安钢冯英明
- 关键词：HBX肝癌HEPG2细胞间接免疫荧光
