国家自然科学基金(30671542)
- 作品数：16 被引量：47H指数：5
- 相关作者：陈武姜代勋穆祥陈益山路苹更多>>
- 相关机构：北京农学院防化研究院中国农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学化学工程医药卫生更多>>
- 白芍注射液抗炎效果观察被引量：4
- 2009年
- 姜代勋巩忠福陈益山陈武穆祥
- 关键词：抗炎效果白芍注射液毛茛科植物药效成分干燥根
- 犬瘟热患犬中性粒细胞cAMP-PDE活性变化及中药作用研究被引量：7
- 2008年
- 研究犬瘟热患犬中性粒细胞(PMN)中环磷酸腺苷-磷酸二酯酶(cAMP-PDE)的活性变化及中药对其活性的体外调节作用,为抗炎药研究和病毒性炎症的中药治疗积累资料。提取犬瘟热患犬(n=9)和正常犬(n=6)的中性粒细胞制备cAMP-PDE样品,通过高效液相色谱(HPLC)法测定其活性及中药对其活性的影响。结果显示,犬瘟热患犬组中性粒细胞cAMP-PDE活性(18.55%±2.66%)显著(P<0.05)高于正常组(11.54%±5.16%)。解表药等5类114味中药中芦根(77.27%)、胡黄连(70.41%)、女贞子(65.50%)、香薷(65.16%)、贝母(61.43%)、黄芩(60.67%)、淫羊藿(60.34%)、黄芪(59.13%)、青蒿(56.93%)、秦皮(55.55%)、辛夷(55.03%)、甘草(54.67%)、牛蒡子(53.40%)、麻黄(53.32%)14味对cAMP-PDE活性具有明显抑制作用。结果表明,中性粒细胞cAMP-PDE活性在犬瘟热患犬炎症过程中具有重要作用,对cAMP-PDE活性有明显抑制作用的中药对其炎症可能具有疗效,同时,中药抑制中性粒细胞中cAMP-PDE活性可能是其抗炎作用机理之一。
- 朱莉娜陈武侯显涛姜代勋陈益山李佳于同泉路苹王惠芳穆祥
- 关键词：犬瘟热中性粒细胞磷酸二酯酶中药
- 犬中性粒细胞磷酸二酯酶活性及清热药对其影响的观察被引量：3
- 2009年
- 张冰姜代勋陈武谷金妮刘婕于同泉路苹王惠芳穆祥
- 关键词：中性粒细胞磷酸二酯酶酯酶活性清热药CGMPCAMP
- 猪中性粒细胞磷酸二酯酶基因表达及活性研究被引量：9
- 2007年
- 【目的】通过对猪中性粒细胞磷酸二酯酶(PDE)基因表达、活性及特异性抑制剂实验检测,研究其存在的主要PDE亚型及在体外的活性,为探讨PDE在中性粒细胞的分布、活性变化及对cAMP、cGMP调节与中性粒细胞功能关系提供依据。【方法】采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测PDE基因在猪中性粒细胞的表达,以高效液相色谱(HPLC)检测环核苷酸在PDE反应前后的含量变化,计算PDE活性。【结果】在检测的18个PDE亚型中,PDE1B、2A、3A、3B、4A、4B、4C、4D、5A、7A、7B、8A、8B、9A、11A共15个PDEmRNA在猪中性粒细胞表达,特异性抑制剂实验表明PDE4、PDE5分别为水解cAMP、cGMP的主要PDE亚型;cAMP/cGMP-PDE在10～40μl范围内,与其活性存在良好的线性关系(r=0.9929/0.9992)。【结论】猪中性粒细胞至少存在15个PDE亚型,其中PDE4、PDE5为主要存在的2个亚型,PDE样品量在一定范围内与其活性存在良好的线性关系,可作为筛选PDE型中性粒细胞功能调节剂的方法。
- 姜代勋陈武谷金妮许剑琴于同泉路苹穆祥
- 关键词：中性粒细胞磷酸二酯酶高效液相色谱
- 抗炎中药作用机制新靶点研究——对cAMP-磷酸二酯酶活性的影响被引量：9
- 2009年
- 姜代勋陈武陈益山李佳于同泉路苹穆祥
- 关键词：非甾体类抗炎药传统中药酯酶活性靶点肾上腺皮质
- 双黄连注射液对中性粒细胞磷酸二酯酶4B基因表达的影响
- 2007年
- 本试验以主要在中性粒细胞中表达的磷酸二酯酶4B基因为靶基因,研究双黄连注射液的抗炎机制。采用半定量RT-PCR法检测双黄连注射液在不同时间对磷酸二酯酶4B基因表达的影响。结果发现双黄连注射液与中性粒细胞共孵育1 h时对磷酸二酯酶4B基因表达无明显的影响,当孵育到3 h时即可极显著抑制磷酸二酯酶4B基因的表达(P<0.01)。本试验结果表明,双黄连注射液能在基因转录水平上抑制中性粒细胞内磷酸二酯酶4B基因的表达,提示其能使cAMP含量升高而抑制中性粒细胞等炎症细胞的活化,从而发挥抗炎作用。
- 姜代勋陈武谷金妮于同泉路苹穆祥
- 关键词：磷酸二酯酶中性粒细胞双黄连注射液
- 大鼠肺微血管内皮细胞磷酸二酯酶mRNA表达与活性检测
- 2009年
- 目的检测大鼠肺微血管内皮细胞（PMVECs）内磷酸二酯酶（PDE）同功酶mRNA表达及基础酶活性,明确PMVECs存在的PDE亚型及体外活性。方法采用植块法分离培养PMVECs,RT-PCR法测定PDE mRNA表达,以高效液相色谱（PHLC）检测环核苷酸在酶反应前后的含量变化,计算PDE活性。结果检测结果显示,PMVECs中含有PDE1A、1C、2A、3A、3B、4A、4B、4C、4D、5A、7A、7B、8A、8B、9A、10A、11A共17种PDE mRNA,而PDE1BmRNA未见表达,酶量在5~20μl范围内与PDE活性存在良好的线性关系。结论PMVECs中存在17种PDE基因表达,并有较高的基础酶活性。
- 侯显涛陈武张涛朱丽娜姜代勋陈益山李佳穆祥
- 关键词：肺微血管内皮细胞磷酸二酯酶反转录-聚合酶链反应
- 猪磷酸二酯酶4B2的原核表达和活性鉴定
- 2010年
- 使用RT-PCR方法扩增猪磷酸二酯酶4B2基因,将其克隆到表达载体,经PCR和测序鉴定的阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导重组蛋白表达。结果显示,目的基因片段大小为1718 bp,与GenBank公布的猪PDE4B2基因序列同源性为99.7%。表达的重组蛋白以包涵体和可溶性蛋白两种形式存在。Western blotting检测结果表明,蛋白质大小约为66 ku,通过液相检测重组蛋白的cAMP-PDE活性为51.46%。制备的多克隆抗体有良好的特异性,为进一步检测天然蛋白PDE4B2和筛选PDE4B2的特异性抑制剂奠定了基础。
- 陈丽姜代勋任超陈益山李佳陈武
- 关键词：原核表达WESTERNBLOTTING多克隆抗体
- Vero及Vero-dst细胞对犬瘟热病毒敏感性比较被引量：7
- 2011年
- 目的为了更好地分离犬瘟热病毒(CDV)并确诊犬瘟热,本实验比较了Vero及Vero-dst细胞对此病毒的敏感性。方法将CDV标准毒株Snyder Hill株及临床犬瘟热阳性犬组织匀浆分别接种Vero及Vero-dst两种细胞,通过观察细胞病变、检测病毒滴度(TCID50),并通过RT-PCR法进行比较,分析两种细胞对CDV的敏感性。结果接种病毒后Vero细胞盲传5代始终未见细胞病变,而Vero-dst细胞12 h出现了明显的合胞样细胞病变,且RT-PCR扩增出了CDV基因特异性片段。结论 Vero-dst细胞对CDV表现了良好的敏感性,是体外分离培养CDV的一个有效细胞系。而所本实验中使用的Vero细胞并不适于CDV的分离与培养。另外,本实验利用Vero-dst细胞从临床犬瘟热阳性病例中成功分离到了野毒株,并确定其毒力较标准毒株毒力强,可用于进一步的研究。
- 任超霍桂桃陈益山陈丽张兰兰李佳陈武赵德明
- 关键词：犬瘟热病毒VERO细胞
- 牛蒡子与牛蒡子苷对小鼠骨骼肌cAMP及其磷酸二酯酶活性和生长性能的影响被引量：4
- 2009年
- 【目的】观察中药牛蒡子及其主要成分牛蒡子苷对小鼠骨骼肌cAMP磷酸二酯酶(cAMPPDE)活性和cAMP含量、血浆cAMP含量与生长性能的影响,探讨促进动物生长的作用及机理。【方法】断奶ICR小鼠分别灌服不同剂量的牛蒡子煎剂:1.00、0.50、0.25g/只,牛蒡子苷溶液:1.50、0.75、0.38mg/只和阳性对照茶碱溶液:0.75、0.38、0.19mg/只。记录体重和采食量,采用HPLC和ELISA法分别测定骨骼肌组织cAMPPDE活性和血浆cAMP含量。【结果】1.00g和0.50g的牛蒡子煎剂和3个剂量的牛蒡子苷显著或极显著降低采食量;除0.38mg的牛蒡子苷外,各剂量给药组都显著或极显著促进增重;各剂量的牛蒡子、牛蒡子苷和茶碱都极显著提高饲料转化率(P<0.05,P<0.01,或P<0.001)。各剂量的牛蒡子、牛蒡子苷和茶碱都显著或极显著抑制cAMPPDE活性;除1.5mg的牛蒡子苷外,都显著或极显著提高骨骼肌组织cAMP含量,除0.75mg茶碱外,都显著或极显著提高血浆cAMP含量(P<0.05,P<0.01,或P<0.001)。骨骼肌cAMP含量与cAMPPDE活性呈极显著负相关,r=-0.402(P<0.001),血浆cAMP含量与骨骼肌cAMP含量呈极显著正相关性,r=0.553(P<0.001),与cAMPPDE活性呈负相关,r=-0.436(P>0.05)。【结论】牛蒡子和牛蒡子苷通过抑制骨骼肌cAMPPDE活性,提高骨骼肌和血浆cAMP水平,提高动物生长性能。
- 谷金妮陈武姜代勋张冰刘婕于同泉路苹穆祥
- 关键词：牛蒡子牛蒡子苷骨骼肌
