国家自然科学基金(81070392)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：杨晓明李长燕詹轶群郑巍薇于淼更多>>
- 相关机构：解放军第307医院中国医学科学院放射医学研究所天津大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 敲低EDAG加强NPM1蛋白的降解并增加AML病人对药物的敏感性(英文)被引量：2
- 2013年
- Nucleophosmin(NPM1或B23.1)是在细胞核内广泛表达的蛋白磷酸酶,在多方面发挥重要作用,如核糖体合成、中心体复制、细胞周期控制、细胞增殖及转化.NPM1是急性粒细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)中最常见的突变基因之一.红系分化相关基因(erythroid differentiation associated gene,EDAG)是在造血组织特异表达的基因,在造血细胞的增殖与谱系分化调节方面发挥重要作用.在AML病人中,高表达的EDAG与较差的预后相关联.我们前期研究结果显示,EDAG与NPM1相结合并调节NPM1稳定性,但在AML病人体内EDAG与NPM1的关系,及EDAG与NPM突变体(NPMc+)的关系尚未明确.在本文中发现:在AML病人骨髓CD34+细胞中,敲低EDAG表达导致NPM1蛋白稳定性降低并提高了对柔红霉素的敏感性;EDAG虽不与突变体NPMc+相互作用,但在蛋白出核抑制剂(leptomycin B,LMB)作用下,过表达EDAG提高NPMc+蛋白稳定性;表达突变NPMc+的AML病人与表达NPM1蛋白的病人相比,其骨髓CD34+细胞对柔红霉素具有更高的敏感性,且敲低EDAG能微弱提高其敏感性.上述结果表明,EDAG在AML病人药物治疗中发挥的可能作用以及NPMc+"逃脱",使EDAG无法保护其稳定性,这提示了在AML病人药物治疗过程中EDAG的潜在作用,同时也提示,携带NPMc+蛋白的AML患者具有较好预后,可能与NPMc+蛋白"逃脱"出EDAG对其稳定性的保护有关.
- 郑巍薇杨扬张美江董小明唐刘军王晓辉詹轶群于淼葛常辉宁红梅李长燕杨晓明
- 关键词：柔红霉素AML
- GATA2分子RNAi慢病毒颗粒的包装制备及表达研究
- 2011年
- 目的制备GATA2分子慢病毒干涉颗粒,建立GA-TA2表达下调的K562稳定细胞系。方法采用第3代慢病毒包装系统,将携带特异性干涉GATA2的DNA序列克隆入穿梭质粒PsicoR中,转染K562细胞,Western blot法检测对内源性GATA2干涉效果。在脂质体介导下,siGATA2质粒同包装质粒plP1、plP2、pl/VSVG共同转染HEK 293T细胞,获得慢病毒干涉颗粒,感染K562细胞,检测干涉效果。结果构建的重组质粒经酶切,测序鉴定结果正确,并有干涉效果。该重组质粒与包装质粒共同转染HEK293T细胞,获得干涉慢病毒并利用该病毒建立稳定表达的siGATA2-K562细胞系,经Western blot鉴定,稳定细胞系的内源性GATA2表达下调。结论成功制备siGATA2干涉病毒颗粒并构建si-GATA2-K562稳定细胞系,为后续实验奠定基础。
- 蒋易楠李长燕詹轶群杨晓明汪思应
- 关键词：RNA干扰慢病毒属
