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布拉酵母菌的生物学作用及防治疾病应用研究进展被引量：52: 2006年; 根据近些年的文献,文章对布拉酵母菌(Saccharomyces boulardii)的生物学特性、防治疾病的作用机制及应用研究进展进行综述。; 楚杰王凤山张大伟; 关键词：布拉酵母菌生物学特性

两步柱色谱法分离纯化重组肿瘤血管生长抑制因子Kringle 5被引量：6: 2007年; 建立了一种用Ni2+螯合的Chelating Sepharose Fast Flow亲和柱色谱和Sephadex G-75凝胶排阻柱色谱分离纯化重组肿瘤血管生长抑制因子Kringle5的方法。采用该工艺得到的重组Kringle5经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明其纯度约为98%,且具有抑制鸡胚绒毛尿囊膜新生血管生成的生物活性。; 贾信贵边六交; 关键词：纯化

原核表达融合型血管生成抑制剂Kringle 5发酵条件的优化和初步纯化被引量：7: 2006年; 在构建融合型Kringle5原核表达重组菌BL21(DE3)pET32a/K5的基础上,通过改变培养基的成分,确定了适宜于重组菌生长和融合Kringle5蛋白表达的培养基。采用正交实验方法,对融合型血管生成抑制剂Kringle5原核表达重组菌的发酵条件进行了优化,通过发酵罐中重组菌的分批培养,确定了培养液中的最佳溶氧量。采用优化后的发酵工艺,在20L发酵罐中融合Kringle5的表达量可达0.59g.L·1。最后在Cu2+螯合的SepharoseFastFlow层析介质上对融合Kringle5进行了初步纯化,其纯度约为80%。; 边六交党红艳杨晓燕; 关键词：分批发酵发酵条件优化

抗菌肽Cecropin B—肿瘤血管生长抑制因子Kringle5融合蛋白表达载体的构建及其表达被引量：4: 2005年; 通过重叠区扩增法人工合成抗菌肽Cecropin B(CB)基因,从ThioA/L15-7上卸下肿瘤血管生长抑制因子Kringle5(K5)基因,将两者按正确的阅读框架融合并定向克隆至大肠杆菌高效表达载体pET32a上,构建成pET32a/CB-K5重组载体。重组载体转化BL21(DE3)细胞后,提取质粒进行PCR鉴定和序列分析,证明重组质粒pET32a/CB-K5阅读框架和融合基因序列均与预期相符。实验结果显示,成功地构建了抗菌肽CecropinB(CB)和肿瘤血管生长抑制因子Kringle5(K5)融合蛋白的表达载体pET32a/CB-K5。转化E.coliBL21(DE3),SDS-PAGE分析显示,在IPTG诱导下,融合蛋白以包涵体的形式在重组转化菌株中获得高效表达,表达量达到菌体总蛋白的50%。; 樊钰虎冯瑄杨晓燕边六交; 关键词：抗菌肽CECROPIN 融合表达载体

血管生长抑制因子Kringle5的发酵条件研究: 2005年; 确定了适合重组工程菌生长和血管生长抑制因子Kringle5表达的培养基,并采用正交试验优化了重组工程菌的发酵条件。20L发酵罐中Kringle5蛋白的最终表达量为0.59g/L。; 党红艳边六交; 关键词：血管生长抑制因子发酵基因表达正交试验

抗菌肽Cecropin B-人溶菌酶重组蛋白的表达及纯化被引量：2: 2007年; 对抗菌肽Cecropin B-人溶菌酶(CB-hLy)的重组大肠杆菌进行了诱导表达,并对影响该重组蛋白表达的培养条件进行了优化,最后对表达出的重组蛋白进行了分离纯化。由上述方法得到的重组CB-hLy蛋白经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺电泳(SDS-PAGE)分析表明,其纯度可达90%,且具有良好的抑制真菌生长的生物活性。; 翁婷贾信贵顾章鸿沈晓东边六交; 关键词：抗菌肽人溶菌酶重组蛋白纯化

重组鼠源角质细胞生长因子的发酵表达优化及纯化被引量：1: 2006年; 通过正交实验优化了融合型小鼠角质细胞生长因子(rm-KGF)重组大肠杆菌的发酵和诱导表达条件。优化后的发酵培养基为:葡萄糖6g/L,酵母提取物10g/L,NH4Cl1.3g/L,磷酸盐1mol/L,MgSO4·7H2O0.6g/L。诱导表达条件为:以1mmol/LIPTG于菌体密度(A600)为1时诱导5h。在此条件下,分别经CM-SephadexG-50和HeparinSepharoseCL-6B两步纯化,所得融合rm-KGF经HPLC检测纯度约96%,每升发酵液可得约82mg纯化产品。; 边六交杨晓燕樊钰虎陈爱美; 关键词：角质细胞生长因子发酵纯化正交试验

一种新型抗菌肽Cecropin B真核表达载体的构建被引量：2: 2005年; 通过重叠区扩增法人工设计和合成一种新型抗菌肽CecropinB基因,按正确的阅读框架定向克隆至巴斯德毕赤酵母的高效表达载体pPIC9K上。经PCR鉴定及序列分析,所转化的大肠杆菌DH5α菌落中含有插入CecropinB基因的重组质粒pPIC9K-CB,表明成功构建了新型抗菌肽CecropinB表达载体pPIC9K-CB。; 胡仲秋樊钰虎冯瑄杨晓燕边六交; 关键词：CECROPIN 巴斯德毕赤酵母高效表达载体 PCR鉴定定向克隆 B基因

抗菌肽Cecropin B-人溶菌酶融合蛋白表达载体的构建被引量：9: 2004年; 目的是构建抗菌肽B (CecropinB)和人溶菌酶 (hLyso)的融合蛋白表达载体。从pUC118-hLyso上卸下人溶菌酶基因后 ,通过重叠区扩增法人工合成抗菌肽B基因 ,并将其融合到人溶菌酶基因的 5’端。将抗菌肽B基因和人溶菌酶基因按正确的阅读框架定向克隆至大肠杆菌高效表达载体pET32a,终止子位于人溶菌酶基因的 3’端。PCR鉴定及序列分析表明 ,所转化的BL2 1(DE3)菌落中含有插入CecropinB -hLyso基因的重组质粒pET32a -CB -hLyso。; 冯瑄杨晓燕边六交; 关键词：人溶菌酶融合蛋白融合表达载体

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陕西省科技攻关计划(2003K10-G58)