湛江市科技攻关计划项目([2011]97)
- 作品数:2 被引量:8H指数:1
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- BMP-2和p38MAPK在小鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化中的作用被引量:8
- 2012年
- 目的观察骨成型蛋白(BMP)-2和p38丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)在小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)向成骨细胞分化中的作用。方法体外分离和扩增小鼠BMSC,分为对照组、BMP-2组及阻断剂组,其中BMP-2组加入BMP-2,阻断剂组加入SB203580(p38MAPK通路阻断剂)和BMP-2。测定碱性磷酸酶(ALP)活性、钙沉积量、p38MAPK表达。结果与对照组相比,BMP-2组BMSC中ALP活性和钙沉积量增加(P<0.01),p38MAPK表达较早出现。阻断剂组p38MAPK表达明显延迟,与对照组相似。结论 BMP-2可通过p38MAPK通路促进BMSC向成骨细胞分化。
- 孙欣曾荣郭伟韬肖启贤王斌黄云林颢
- 关键词:P38MAPK骨髓间充质干细胞成骨细胞
- 大鼠pEGFP-C3/BMP-2真核表达载体的构建
- 2012年
- 目的通过克隆大鼠的BMP2基因,构建EGFP-C3/BMP2基因的真核细胞表达载体。方法把大鼠的基因组DNA通过PCR获得BMP2,克隆构建载体pEGFP/C3-BMP2,并将其转化到大肠杆菌里面,最后进行重组真核表达载体pEGFP-C3-BMP2的构建和鉴定,并可观察其在真核细胞中的表达。结果以大鼠总DNA为模板扩增出1200 bp左右的特异性条带,测序结果与Gene-Bank测序结果相比,翻译成的氨基酸序列相同并完全一致,并可在真核细胞中表达。对重组质粒pEGFP-C3/BMP2进行双酶切鉴定并测序,结果也完全一致。结论为进一步研究利用BMP2基因修饰骨组织工程骨,促进骨折愈合再生提供实验基础。
- 孙欣曾荣郭伟韬肖启贤王斌黄云林颢
- 关键词:PCR真核表达载体构建