国家自然科学基金(30471504) 作品数:10 被引量:30 H指数:3 相关作者: 郑学礼 陈晓光 胡佳林 王炜 王春梅 更多>> 相关机构: 南方医科大学 中国科学院上海生命科学研究院 吉林大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省科技攻关计划 教育部留学回国人员科研启动基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
蚊虫的杀虫剂抗药性分子基础 由于化学杀虫剂广泛应用和剂量增加,必然导致昆虫抗药性上升,增加对环境的破坏和人类健康威胁,它是控制医学和农业重要节肢动物的主要障碍之一。由此也引起国内外学者对媒介昆虫抗药性的关注和研究,蚊虫的杀虫剂抗性分子基础研究,已取... 郑学礼 胡佳林文献传递 转基因蚊研究进展 被引量:2 2005年 郑学礼 陈晓光 王春梅关键词:基因鉴定 应用伴侣分子在大肠杆菌表达系统高效表达家蝇天蚕素的研究 目的应用伴侣分子在大肠杆菌表达系统中高效表达家蝇天蚕素,研究伴侣分子对家蝇天蚕素基因在大肠杆菌中表达的影响。方法 RT-PCR克隆家蝇的天蚕素成熟肽(Mature Cecropin,MC)与泛素(Ubiquitin)基因... 王炜 郑学礼关键词:家蝇 CECROPIN 文献传递 中华按蚊抗菌肽defensinA编码基因cDNA克隆与序列分析 2005年 目的克隆中华按蚊defensin编码基因,并对其序列进行分析。方法提取中华按蚊总RNA。据文献报道合成1对引物def1、def2,RT-PCR扩增中华按蚊defensin编码基因,克隆于T-载体,序列测定与分析。结果RT-PCR扩增中华按蚊cDNA获大约308 bp片段,测定目的片段序列,结果显示,克隆基因cDNA序列长度为308 bp,推导编码64个氨基酸,序列分析显示中华按蚊defensin编码基因与冈比亚按蚊defensin编码基因有高度同源性(95%)。分析结果显示,中华按蚊defensin编码基因为新基因,定名为中华按蚊defensinA。结论克隆出中华按蚊defensinA编码基因,为进一步研究该基因打下了基础。 郑学礼 陈晓光 王春梅关键词:中华按蚊 抗菌肽 CDNA克隆 应用伴侣分子在大肠杆菌表达系统高效表达家蝇天蚕素 被引量:4 2009年 目的应用伴侣分子在大肠杆菌表达系统中高效表达家蝇天蚕素,研究伴侣分子对家蝇天蚕素基因在大肠杆菌中表达的影响。方法RT-PCR克隆家蝇的天蚕素成熟肽(mature cecropin,MC)与泛素(ubiquitin,UBI)基因,利用生物信息学方法分析硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)-MC和MC分子结构及Trx-MC分子和Trx-UBI-MC两种融合蛋白mRNA5'端的二级结构的异同。分别构建pET32a-MC和pET32a-UBI-MC两种重组质粒,转化入大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)中。检测Trx-MC融合蛋白的表达和pET32a-MC和pET32a-UBI-MC在相同诱导时间及诱导剂浓度的条件下,融合蛋白表达量的差异。结果生物信息学分析结果显示MC分子被Trx分子包裹在其内部,MC分子的细胞毒性被去除,使其可以在大肠杆菌中正常表达。分子生物学实验结果进一步验证了生物信息学分析结果的正确性。同时,也显示UBI分子的加入,未影响融合蛋白质Trx-UBI-MC与Trx-MC的mRNA5'端二级结构。并且Trx-UBI-MC融合蛋白在全菌蛋白中的含量明显高于Trx-MC。结论Trx作为伴侣分子包裹了MC的天然结构,使其对宿主菌无毒性。UBI作为伴侣分子,在相同转录水平、翻译水平条件下,明显提高了蛋白的表达量。 王炜 郑学礼 陈晓光关键词:家蝇 天蚕素 生物信息学 蚊虫的杀虫剂代谢抗性分子基础 被引量:3 2006年 郑学礼 胡佳林关键词:化学杀虫剂 分子基础 蚊虫 乙酰胆碱酯酶 靶位点 应用伴侣分子在大肠杆菌表达系统高效表达家蝇天蚕素的研究 目的应用伴侣分子在大肠杆菌表达系统中高效表达家蝇天蚕素,研究伴侣分子对家蝇天蚕素基因在大肠杆菌中表达的影响。方法 RT-PCR克隆家蝇的天蚕素成熟肽(MatureCecropin,MC)与泛素(Ubiquitin)基因,... 王炜 郑学礼关键词:家蝇 CECROPIN 文献传递 中国7市家蝇rDNA-ITS2基因分析 被引量:3 2008年 目的:分析我国7市家蝇的rDNA-ITS2基因.方法:采集北京、吉林、长春、成都、南京、湖北荆州和养殖7市8个家蝇样本,形态鉴定.依据Drosophila melanogaster的nrRNA序列,设计扩增不同地区家蝇rDNA-ITS2基因的引物,PCR扩增不同地区家蝇基因组,获特定基因片段,SSCP分析.将PCR扩增不同地区家蝇rDNA-ITS2片段克隆于pMD-18T载体,序列测定,采用ClustalW软件在线分析不同地区家蝇rDNA-ITS2序列,用MegAlign(4.0)软件的UPMGA方法构建系统发育树.结果:我国7市8个家蝇样品的rDNA-ITS2基因均获约360bp阳性扩增区带.SSCP分析8个家蝇样品的rDNA-ITS2的SSCP电泳DNA迁移率均有一定差异.ClustalW比对分析不同地区的8个家蝇rDNA-ITS2基因序列间存在一定差异.同源性为75%,而其中部分地区家蝇样品rDNA-ITS2序列同源性高,家蝇(长春、吉林、养殖),三者之间的同源性为98.0%~99.1%;家蝇(成都、南京、广州、荆州)之间的同源性为99.1%~99.7%.系统聚类分析显示,发育树共分成2支,1支是家蝇(北京与养殖)关系密切,先聚为一类,然后与家蝇(长春)再聚类;另1支是家蝇(成都与荆州)关系密切,最先聚类,然后与家蝇(南京)聚类,再与家蝇(广州)聚类,最后与家蝇(吉林)聚类.结论:应用PCR-SSCP和rDNA-ITS2基因序列分析揭示我国不同地区家蝇基因组序列存在一定差异. 胡佳林 郑学礼 陈晓光关键词:家蝇 SSCP RDNA-ITS2 Study of high-level expression of Musca domestica cecropin with partner molecular in Escherichia coli <正>Objective To utilize partner molecular for effective expressing Musca domestica cecropin,research that part... Wang wei,Zheng Xueli*(Department of Pathogenic Biology,School of Public Health and Tropical Medicine,Southern Medical University,Guangzhou 510515,China)关键词:CECROPIN UBIQUITIN 文献传递 转基因蚊研究进展 目前,蚊媒性疾病,疟疾、登革热、黄热病、丝虫病和尼罗河病毒病等,仍是全球严重的公共卫生问题。20世纪70年代以来,由于蚊虫对杀虫剂及其所携带病原体对治疗药物抗性的产生,使蚊媒性疾病广泛存在,某些疾病则呈上升趋势。而目前对... 郑学礼 陈晓光文献传递