陕西省科技攻关计划(2003K10-G10)
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
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- 相关机构：西安交通大学医学院第二附属医院西安交通大学西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：陕西省科技攻关计划更多>>
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- 反义寡核苷酸转染A375细胞实验条件的优化被引量：1
- 2007年
- 目的研究不同的转染条件下,Survivin反义寡核苷酸(ASODN)对体外培养的人恶性黑色素瘤细胞A375生长的影响。方法通过对ASODN进行硫代修饰、脂质体运转及培养条件的改变,用倒置显微镜、台盼蓝计数观察Survivin ASODN对A375细胞增殖的抑制作用。结果硫代修饰ASODN经脂质体包裹对细胞生长抑制作用明显强于未经脂质体包裹组(P<0.01);②细胞培养6 h贴壁后进行转染对细胞的生长抑制率明显高于24 h后进行转染(P<0.05);③转染期间(4 h)无血清存在组与相应对照组比较差异有显著性意义(P<0.01);④ASODN转染后12-72 h,对细胞的抑制效应逐渐升高,72 h达顶峰,之后开始回落;⑤与混杂组(SODN)及错配组(MODN)相比,反义组在各个浓度对细胞生长抑制作用最明显,各浓度组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论许多因素影响ASODN的转运,不同的实验应选择不同的实验优化条件。
- 王梅王冰谭升顺
- 关键词：SURVIVIN恶性黑色素瘤反义寡核苷酸脂质体
- 脂质体携带反义寡核苷酸对A375细胞Survivin表达的影响被引量：1
- 2007年
- 目的研究脂质体携带反义寡核苷酸转染对A375细胞Survivin mRNA及蛋白表达的影响。方法通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western免疫印迹法对反义寡核苷酸转染后A375细胞Survivin mRNA和蛋白表达变化进行定性和半定量分析。结果RT-PCR结果经光密度扫描半定量分析:对照组为0.9994,反义寡核苷酸处理组为0.4761,较对照组降低了52.36%。Western免疫印迹法证实在A375细胞中存在分子量16.5KD的特异性条带,与Survivin分子量相符,反义寡核苷酸处理组细胞在NC膜上特异性条带明显弱于对照组细胞。结论证实反义寡核苷酸通过降解mRNA,阻断基因翻译成蛋白质的特异性反义活动机制。
- 王梅谭升顺王冰
- 关键词：SURVIVIN恶性黑色素瘤反义寡核苷酸
- Survivin反义寡核苷酸增加A375细胞对顺铂的敏感性
- 2007年
- 目的研究Survivin反义寡核苷酸对人恶性黑色素瘤A375细胞顺铂治疗敏感性的影响。方法台盼蓝计数观察Survivin反义寡核苷酸和顺铂对A375细胞增殖的抑制作用。结果5μmol/L反义寡核苷酸与0.5 mg/L顺铂共同作用于A375细胞72 h,细胞生长抑制率为61.3%,高于单因素作用组,组间比较差异具有统计学意义(P<0.001)。用反义寡核苷酸预处理细胞24 h后加入顺铂对A375细胞的生长抑制率为68.0%,高于同时用药组,但组间差异无统计学意义。结论反义寡核苷酸和顺铂联合用药对A375细胞生存具有协同抑制效应,即Survivin反义寡核苷酸可增强A375细胞对顺铂治疗的敏感性。
- 王梅王晓丽王冰谭升顺
- 关键词：SURVIVIN顺铂恶性黑色素瘤
- 生存素反义寡核苷酸对人恶性黑素瘤A375细胞生物学行为的影响被引量：3
- 2008年
- 目的研究生存素反义寡核苷酸(AS-ODN)经脂质体介导转染对A375细胞增殖、凋亡的影响。方法合成生存素硫代反义寡核苷酸(AS-ODN),脂质体携带转染人恶性黑素瘤A375细胞。采用台盼蓝计数、软琼脂克隆形成试验、电镜、流式细胞仪检测AS-ODN对A375细胞增殖及凋亡的影响。通过裸鼠致瘤实验观察AS-ODN对A375细胞动物体内增殖的抑制作用。结果生存素反义寡核苷酸能降低G2/M期细胞百分比,诱导细胞凋亡发生,明显抑制A375细胞的生长和克隆形成,裸鼠体内A375细胞恶性增殖潜力下降。结论脂质体介导生存素AS-ODN能有效抑制A375细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡。
- 王梅王永贤王冰谭升顺王晓丽
- 关键词：生存素反义寡核苷酸恶性黑素瘤
