江苏省高校自然科学研究项目(10KJD180002)
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
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- 穹窿海马伞切割后大鼠海马伞内神经干细胞的观察研究
- 2013年
- 目的观察穹窿海马伞切割侧和非切割侧大鼠海马伞内神经干细胞的表达情况。方法切割SD大鼠右侧穹窿海马伞,于术后2d经腹腔注射BrdU,连续5d,术后7d取脑冰冻切片,进行BrdU/Nestin免疫荧光双标检测。结果穹窿海马伞切割侧海马伞内的BrdU阳性细胞数和Nestin阳性细胞数均明显多于非切割侧,且出现较多的BrdU/Nestin双标的阳性细胞,而非切割侧未见BrdU/Nestin双标的阳性细胞。结论穹窿海马伞切割后,切割侧海马伞内出现较多增殖的神经干细胞,我们推测海马伞的损伤,导致海马伞内局部微环境发生变化,产生某些信号物质,刺激脑内其他部位的神经干细胞增殖并迁移到海马伞内。
- 邹琳清金国华张新化秦建兵田美玲
- 关键词：海马伞神经干细胞增殖
- 海马放射状胶质细胞体外诱导激活后PEBP蛋白的表达变化
- 2010年
- 目的:探讨切割穹窿海马伞的侧海马提取液对放射状胶质细胞中磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)表达的影响。方法:将培养的海马放射状胶质细胞接种于培养板中,分成对照组和诱导组,对照组中加入含5%正常海马提取液的DMEM/F12细胞培养液,诱导组中加入含5%切割穹窿海马伞侧海马提取液的DMEM/F12培养液。培养7 d后,通过免疫荧光标记法观察PEBP在放射状胶质细胞中的表达,并提取总蛋白,采用Western blot的方法观察对照组及诱导组中PEBP蛋白的表达变化。结果:PEBP蛋白在放射状胶质细胞中能够表达,诱导组的表达比对照组明显增加(P<0.05)。结论:PEBP的表达增加可能与切割侧海马提取液"激活"的放射状胶质细胞向神经元分化有关。
- 秦建兵李浩明金国华赵荷艳杨伟伟田美玲朱蕙霞邹琳清
- 关键词：磷脂酰乙醇胺结合蛋白免疫印迹免疫荧光
- 激活的星形胶质细胞分泌聚集素蛋白及其对海马神经干细胞向神经元分化的促进作用被引量：3
- 2013年
- 目的探讨切割穹隆海马伞的侧海马提取液"激活"的星形胶质细胞分泌聚集素蛋白(CLU)及体外CLU诱导海马神经干细胞分化为神经元的情况。方法分别用切割穹隆海马伞的海马提取液、正常海马提取液、DMEM/F12培养基培养星形胶质细胞,制备切割12h、24h、48h组,正常组和对照组条件培养基;ELISA检测比较不同条件培养基中CLU蛋白的浓度;体外细胞培养采用CLU诱导海马神经干细胞分化,设诱导组和空白对照组,7d后通过微管相关蛋白2(MAP-2)免疫荧光及Hoechst标记观察海马神经干细胞向神经元的分化情况。结果正常组和对照组条件培养基中CLU浓度较低,约为(0.1037±0.0119)ng/L和(0.1170±0.0078)ng/L;切割组12h、24h、48h条件培养基中其浓度明显增高,分别为(0.1940±0.0364)ng/L、(0.4250±0.0724)ng/L和(0.2903±0.0472)ng/L,以24h组最高,约为正常组和对照组的4倍。CLU诱导组中MAP-2阳性细胞数明显高于空白对照组(P<0.05),其占总细胞数的百分比分别为(11.67±2.57)%和(4.52±1.54)%,且诱导组中MAP-2阳性细胞突起更长、更丰富。结论切割穹隆海马伞侧海马提取液"激活"的星形胶质细胞可分泌更多的CLU,体外细胞培养中CLU可促进海马神经干细胞向成熟的神经元分化。
- 邹琳清金国华李浩明秦建兵田美玲朱培培王海琴
- 关键词：星形胶质细胞海马神经干细胞神经元免疫荧光
- 穹隆海马伞切割后大鼠海马内RUNX1T1 mRNA和蛋白的表达变化被引量：1
- 2013年
- 目的观察穹隆海马伞切割后不同时间点海马内RUNX1T1 mRNA和蛋白的表达变化及定位。方法行穹隆海马伞切割术,制备模型大鼠。实验分为正常组、切割3d组、切割7d组、切割14d组、切割21d组、切割28d组。1.提取海马组织总mRNA,用Real-time PCR检测大鼠海马组织中RUNX1T1mRNA的表达;2.提取海马组织总蛋白,用Western blotting检测海马内RUNX1T1蛋白的表达;3.行脑冷冻切片,行RUNX1T1免疫荧光检测和Hoechst标记,观察海马齿状回中RUNX1T1/Hoechst双标阳性细胞。结果 Real-time PCR检测显示,切割3d组海马组织中RUNX1T1 mRNA的表达明显上调,其余各组差异不明显;Western blotting检测结果显示,正常组海马中有微量RUNX1T1蛋白表达,而切割3d组海马组织中RUNX1T1蛋白表达量明显上升,并达到高峰,7d时仍有较多的表达,此后,14d、21d、28d组中RUNX1T1蛋白表达很快又恢复到正常水平;免疫荧光检测结果表明,正常组海马齿状回中有少量的RUNX1T1/Hoechst阳性细胞,切割3d组海马齿状回中RUNX1T1/Hoechst阳性细胞数量最多,切割7d组逐渐减少,切割14d组、21d组和28d组与正常组差别不明显。结论穹隆海马伞切割后海马内RUNX1T1mRNA和蛋白表达在早期呈短暂性上调,并定位于海马齿状回颗粒下层,推测可能与海马神经再生过程中神经干细胞向神经元分化有关。
- 邹琳清金国华王海琴李浩明朱培培秦建兵
- 关键词：海马神经再生免疫荧光
