国家自然科学基金(81370826)
- 作品数：12 被引量：120H指数：7
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- 巨噬细胞活化表型与肾脏疾病被引量：3
- 2014年
- 巨噬细胞在肾组织的浸润及活化,在慢性肾脏病发生发展中发挥重要作用。巨噬细胞是一种异质性细胞,不同的活化表型发挥不同的生物学效应。M1型活化具有促炎及促纤维化作用,而M2型活化可能发挥抗纤维化及促进组织修复作用。本文就巨噬细胞的活化状态在肾脏疾病中作用的新进展进行综述,并展望通过调节巨噬细胞功能来治疗肾脏疾病的前景。
- 郭银凤张晓良
- 关键词：肾脏疾病巨噬细胞
- 动静脉内瘘超声参数与内瘘功能不良的相关性研究被引量：4
- 2017年
- 目的:分析维持性血液透析(MHD)患者动静脉内瘘(AVF)的超声参数特征及其与AVF功能不良之间的关系。方法:采集以AVF为透析通路的MHD患者临床信息,于非透析日行超声检查,监测血流动力学参数及评估AVF并发症情况。结果:将患者按内瘘功能分为功能良好组(115例)和功能不良组(29例),两组平均肱动脉流量分别为1 150.62±63.6 ml/min及803.84±108.91 ml/min(P<0.05),桡动脉流量分别为765.82±34.97ml/min及478.57±67.36 ml/min(P<0.01),肱动脉阻力指数(RI)分别为0.48±0.01及0.55±0.03(P<0.01),桡动脉RI分别为0.35±0.01及0.39±0.02(P<0.05),将肱动脉和桡动脉的RI、流量、瘘口直径分别按四分位法进行分组,统计各组内瘘功能不良发生率,发现当肱动脉流量<641.3 ml/min、桡动脉流量<428.3 ml/min、桡动脉RI>0.41、瘘口直径<0.39 cm时,AVF功能不良发生率显著升高。结论:本研究证实AVF超声参数与其功能之间具有良好的相关性,内瘘超声检查可为AVF功能不良早期实施干预措施提供依据和参考。
- 谢筱彤刘宏涂岩高民张留平刘必成张晓良
- 关键词：动静脉内瘘多普勒超声
- 巨噬细胞诱导糖尿病肾病足细胞凋亡及其机制被引量：5
- 2017年
- 目的探讨巨噬细胞在糖尿病肾病（DN）足细胞凋亡中的作用及其机制。方法体外培养小鼠巨噬细胞系（RAW264.7），将其分为3组：正常葡萄糖组（NC）、甘露糖组（Man）、高葡萄糖组（HG），并收集上述NC组巨噬细胞上清液（NC-CM）和HG组巨噬细胞上清液（HG-CM）。采用Western印迹和免疫荧光染色检测M1型巨噬细胞标志物iNOS和M2型巨噬细胞标志物MR表达，ELISA检测巨噬细胞上清液中TNF-α水平。体外培养小鼠永生系足细胞MPC5，将其分为以下几组：正常葡萄糖对照组（NC）、NC-CM组、HG-CM组、HG-CM＋ROS抑制剂组（HG-CM＋Tempo）、HG-CM＋p38MAPK抑制剂组（HG-CM＋SB203580）、HG-CM＋抗TNF-α中和抗体组（HG-CM＋TNF-α neutralizing antibody）、HG-CM＋中和抗体对照剂IgG组（HG-CM＋IgG）、重组小鼠TNF-α组。采用Annexin V-FITC/PI和Hoechst33342染色检测足细胞凋亡率，DCFH-DA染色检测足细胞ROS水平，Western印迹检测足细胞cleaved casepase-3、p38MAPK和p38MAPK磷酸化水平（p-p38MAPK）表达。结果（1）与对照组相比，HG组巨噬细胞iNOS表达明显增加，MR表达降低，呈促炎性M1型活化。（2）正常对照组与NC-CM组组间足细胞凋亡、cleaved casepase-3、ROS及p-p38MAPK表达差异无统计学意义。与对照组和NC-CM组相比，HG-CM组足细胞凋亡、cleaved casepase-3、ROS及p-p38MAPK明显增加。（3）与HG-CM组相比，HG-CM＋Tempo，HG-CM＋SB203580组足细胞凋亡和cleaved casepase-3表达明显降低。（4）巨噬细胞上清液HG-CM中TNF-α水平较NC-CM明显增加，且予以高糖刺激后，巨噬细胞TNF-α表达明显增多。（5）与HG-CM组相比，加入抗TNF-α中和抗体能显著减少足细胞凋亡，抑制cleaved casepase-3、ROS及p-p38MAPK表达。（6）单独TNF-α刺激明显上调足细胞凋亡，增加ROS和p-p38 MAPK表达。结论高糖状态下活化的M1型巨噬细胞释放TNF-α，激活足细胞ROS-p38MAPK信号通路进而诱�
- 郭银凤赵宇姜彧滕朱小东刘必成张晓良
- 关键词：巨噬细胞足细胞细胞凋亡糖尿病肾病
- 活性维生素D_3通过抑制TRPC6表达发挥糖尿病肾病的保护作用被引量：12
- 2014年
- 目的:探讨活性维生素D3对链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病(DN)大鼠的肾保护作用是否与抑制瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)有关。方法:30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NC组)、DN组及DN加活性维生素D3干预组(DN+VD组)3组各10只。造模成功后6、12、18周检测大鼠体重、24 h尿蛋白量;造模成功后18周末处死大鼠,检测血样及肾组织指标变化。结果:DN+VD组与DN组相比蛋白尿显著减少,肾脏病理损伤改善。DN组与NC组比较,Podocin、Nephrin蛋白表达量均明显降低(均P<0.05),Desmin和TRPC6蛋白表达量均显著升高(均P<0.05),活性维生素D3干预后上述改变明显改善,差异有统计学意义。相关性分析显示:TRPC6与Podocin(r=-0.808,P<0.05)、Nephrin(r=-0.791,P<0.05)呈负相关,而与24 h尿蛋白(r=0.886,P<0.05)、Desmin(r=0.929,P<0.05)呈正相关。结论:活性维生素D3显著抑制STZ诱导的糖尿病大鼠肾脏损伤,其作用机制与调节足细胞TRPC6的表达有关。
- 宋志霞郭银凤周敏张晓良
- 关键词：活性维生素D3糖尿病肾病
- 环阻法内瘘缩窄术治疗动静脉内瘘高流量致高输出量心力衰竭一例被引量：7
- 2019年
- 自体动静脉内瘘是维持性血液透析患者使用最多的血管通路方式,内瘘流量增加可增加心输出量,导致心脏结构和功能的改变。由于内瘘高流量导致的高输出量心力衰竭是内瘘术后少见的并发症之一。我们报告一例因高流量内瘘致高输出量心力衰竭,并分析其发生机制,寻求最佳治疗方案。环阻法缩窄内瘘是治疗高流量内瘘的可行性方案之一。
- 潘明明高民俞济荣谢筱彤张留平刘必成张晓良
- 关键词：心力衰竭肾透析动静脉瘘
- 活性维生素D对糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的抑制作用及其机制研究被引量：11
- 2014年
- 目的 探讨活性维生素D对糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的抑制作用及其可能机制.方法 将SD雄性大鼠随机分为四组：对照组（NC组）、活性维生素D组（VD组,骨化三醇0.1 μg· kg-1·d-1灌胃）、糖尿病肾病组（DN组,腹腔注射STZ 58 mg/kg）、糖尿病肾病＋活性维生素D组（DN＋VD组）.定期检测血糖、体质量,收集尿标本,18周末处死动物,检测Scr、BUN和尿蛋白变化.PAS及MASSON染色观察肾脏病理改变.电镜观察足细胞超微结构变化.免疫组化法检测肾组织Nephrin、Podocin、Desmin及VDR的表达.Western印迹检测Podocin、Nephrin、Desmin、VDR、PI3K-p85、Akt及p-Akt表达.结果 与DN组比,DN＋VD组蛋白尿减低达36％,肾脏病理损伤减轻,足细胞损伤减轻,血糖、体质量以及血尿素氮无差异（均P＞ 0.05）.血肌酐、钙、磷在四组之间未见差异（均P＞ 0.05）.与NC组比较,DN组Podocin、Nephrin,VDR,PI3K-p85和p-Akt表达量均明显减低（均P＜0.05）,足细胞损伤标志Desmin蛋白表达量显著增加（均P＜ 0.05）.与DN组比,DN＋VD组Podocin、Nephrin,VDR,PI3K-p85和p-Akt表达量明显增加（均P＜ 0.05）,Desmin蛋白表达量明显减低（P＜0.05）.相关性分析显示,Nephrin与VDR呈正相关（r=0.776,P＜0.05）,与PI3K-p85及p-Akt也呈明显的正相关（r=0.736,r=0.855,均P＜0.05）.结论 活性维生素D能够显著抑制STZ诱导的糖尿病肾病大鼠足细胞损伤,其分子机制可能与PI3K/p-Akt信号通路有关.
- 宋志霞郭银凤周敏张晓良
- 关键词：骨化三醇糖尿病肾病足细胞
- 活性维生素D通过调节糖尿病肾病大鼠巨噬细胞M1及M2表型活化防治足细胞损伤被引量：43
- 2014年
- 目的探讨活性维生素D（VD）能否通过调节肾组织巨噬细胞M1及M2表型活化从而防治糖尿病。肾病（DN）大鼠足细胞损伤。方法利用腹腔注射链脲菌素（STZ）建立糖尿病大鼠模型。将SD雄性大鼠按随机数字表法分为4组：对照组1（NC-1组，n=8）、对照组2（NC-2组，n=8，对照＋骨化三醇0．1μg·kg^-1·d^-1灌胃）、DN组（n=24）、DN＋VD干预组（VD组，n=24，DN＋骨化三醇0．1μg·kg^-1·d^-1灌胃），定期检测血糖、体质量，收集尿标本，分别于干预后8周、14周、18周末处死动物，检测Scr、BUN和尿蛋白变化；PAS染色观察肾脏病理改变；免疫组化法检测肾组织CD68^＋巨噬细胞浸润数量；Western印迹法检测nephrin、podocin、CD68以及M1巨噬细胞特异性标志物诱导型氮氧化物合酶（iNOS）、肿瘤坏死因子α（TNF—α）和M2巨噬细胞特异性标志物CD163、精氨酸酶1（Arg-1）、甘露糖受体（MR）表达。结果（1）与两对照组相比，DN组Scr、BUN、24h尿蛋白量及肾小球系膜基质增生程度显著增加（P〈0．05），podocin、nephrin蛋白表达下降（P〈0．05）。VD干预后能明显改善上述病理现象（均P〈0．05）。（2）与两对照组相比，DN组肾组织CD68^＋巨噬细胞浸润数量明显增加，呈时间依赖性。VD干预后能显著减少CD68^＋巨噬细胞浸润数量（P〈0．05）。（3）进一步确定肾组织巨噬细胞M1、M2活化表型发现，8周、14周、18周末DN组iNOS、TNF-α蛋白表达较对照组显著升高（均P〈0．05），VD干预后能明显抑制同期DN肾组织iNOS、TNF-α表达（均P〈0．05）；8周、14周末VD组CD163、Arg-1、MR蛋白表达与DN组相比差异无统计学意义（均P〉0．05），而18周末VD组CD163、Arg-1、MR蛋白表达较DN组显著升高（均P〈0．05），CD163／CD68蛋白表达比例亦显著增加（P〈0．05）。（4）相关分析显示，M1标志物iNOS与nephrin、podocin蛋白表达均呈�
- 郭银凤宋志霞周敏张晓良
- 关键词：糖尿病肾病巨噬细胞足细胞表型
- 活性维生素D_3通过免疫调节防治糖尿病肾病研究进展被引量：17
- 2015年
- 糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)发病受多方面因素的影响。越来越多证据表明,肾组织中炎症细胞浸润和促炎因子过表达所引起的机体免疫调节异常在DN的发生发展中起着关键作用。活性维生素D3作为一种新型免疫调节剂,不仅可以抑制炎性因子,还能够调节免疫反应。作者从免疫细胞、细胞因子及肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensinsystem,RAS)3方面分别综述了与DN有关的活性维生素D3作用机制,着重讨论了巨噬细胞、T淋巴细胞、树突状细胞、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、RAS等的肾损伤机制与活性维生素D3的免疫调节作用。
- 赵宇张晓良
- 关键词：糖尿病肾病活性维生素D3免疫调节免疫细胞肾素-血管紧张素系统
- 1,25（OH）2D3通过VDR-PPARγ通路促使高糖诱导的M1型巨噬细胞向M2型转换被引量：8
- 2015年
- 目的 探讨1,25（OH）2D3对高糖环境下巨噬细胞活化状态的调节作用及其信号转导机制.方法 体外培养小鼠巨噬细胞系（RAW264.7）,检测细胞内诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活力.10-8 mol/L 1,25 （OH）2D3干预高糖预处理的巨噬细胞,分别检测巨噬细胞亚型M1标志物iNOS、肿瘤坏死因子（TNF）α、白细胞介素（IL）12和M2标志物甘露糖受体（MR）、精氨酸酶1（Arg-1）、IL-10的表达以及维生素D受体（VDR）和过氧化物酶体激活物增殖受体γ（PPARγ）的水平.然后用VDR siRNA和PPARγ拮抗剂分别沉默和阻断相应受体后,再次观察活性维生素D对上述M1和M2各标志物的影响.结果 细胞内iNOS活力呈葡萄糖浓度和时间依赖性表达增加,并且在25 mmol/L葡萄糖刺激细胞24h后iNOS活力达到最大.与对照组相比,25 mmol/L葡萄糖干预RAW 264.7细胞24 h后,不仅上清液中炎性细胞因子TNF-α、IL-12表达增多,实时荧光定量PCR和Western印迹结果显示M1标志物iNOS也表达上调（P＜0.05）,而M2标志物MR和Arg-1的表达则显著下降（P＜0.05）.1,25（OH）2D3干预后,上述趋势被逆转：M1标志物包括TNF-α、IL-12和iNOS的表达明显减少（P＜0.05）,而M2标志物IL-10、Arg-1和MR则表达增加（P＜0.05）,并且核受体VDR和PPARγ也显著增多（P＜0.05）.进一步研究发现,用VDR siRNA和PPARγ拮抗剂阻断相应受体后,活性维生素D的上述作用均被阻断,而沉默VDR后PPARγ表达也相应减少（P＜0.05）.结论 1,25（OH）2D3能促使高糖诱导的经典活化巨噬细胞（M1）向替代活化巨噬细胞（M2）转变,这一作用是通过VDR-PPARγ信号通路实现的.
- 周敏郭银凤宋志霞张晓良
- 关键词：骨化三醇PPARΓ表型转换高糖
- 活性维生素D通过髓样细胞触发受体1降低糖尿病肾病大鼠肾组织巨噬细胞浸润被引量：5
- 2017年
- 目的探讨活性维生素D（vD）对糖尿病肾病（DN）大鼠肾组织中髓样细胞触发受体1（TREM-1）表达的影响及TREM-1对巨噬细胞迁移和黏附功能的作用。方法建立DN大鼠模型，随机分为正常对照（NC）组、VD组（骨化三醇0．1μg·kg-1·d-1灌胃）、DN组、DN＋VD组（DN大鼠以0．1μg·kg-1·d-1骨化三醇进行灌胃），分别于8周末、12周末处死，PAS和MASSON染色观察肾脏病理改变，Western印迹检测。肾组织CD68及TREM-1表达。体外培养RAW264．7细胞，分为NC组、高糖组、高糖＋VD组、VD组、乙醇组、甘露醇组。高糖＋VD组以10μmol／L1，25（OH）2D3干预高糖培养的巨噬细胞。免疫荧光和Western印迹检测TREM-1蛋白的表达，Transwell细胞迁移实验和黏附实验评估巨噬细胞的迁移和黏附能力。转染TREM-1 siRNA干扰及TREM-1质粒过表达，观察巨噬细胞黏附和迁移情况及1,25（OH）2D3对高糖诱导的巨噬细胞黏附和迁移的影响。结果（1）与对照组比较，DN组大鼠组肾组织CD68及TREM-1表达均增加（均P〈0．05），而DN＋VD组CD68及TREM-1表达均低于DN组（均P〈0．05）。（2）与正常对照组比较，高糖组巨噬细胞黏附、迁移数量和TREM．1的表达均增加（均P〈0．05），高糖＋VD组巨噬细胞黏附、迁移数量和TREM-1的表达均低于高糖组（均P〈0．05）。（3）TREM-1 siRNA干预下，巨噬细胞黏附和迁移数量均低于阴性对照组（均P〈0．05），VD能降低高糖诱导的巨噬细胞黏附和迁移（均P〈0．05）。（4）在TREM—1过表达巨噬细胞中，细胞黏附和迁移数量与阴性对照组比较均升高（均P〈0．05），VD对高糖诱导巨噬细胞黏附和迁移的抑制作用消失。结论活性维生素D通过降低TREM-1的表达抑制高糖诱导的巨噬细胞的黏附和迁移，从而降低巨噬细胞在糖尿病肾组织的浸润。
- 赵宇郭银凤姜彧滕刘必成张晓良
- 关键词：糖尿病肾病骨化三醇巨噬细胞细胞黏附细胞运动
