黑龙江省研究生创新科研项目(YJSCX2011-260HLJ)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 相关作者：王丹枫于长青更多>>
- 相关机构：黑龙江八一农垦大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省研究生创新科研项目国家自然科学基金黑龙江省青年科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 深黄被孢霉高产诱变菌株抑制消减杂交文库的构建被引量：3
- 2012年
- 目的构建深黄被孢霉高产诱变菌株抑制消减杂交文库。方法采用抑制消减杂交(Suppression subtractivehybridization,SSH)技术,以深黄被孢霉高产诱变菌株(高产菌株)和原始菌株为材料,构建消减cDNA文库。以高产菌株cDNA为试验组,原始菌株cDNA为对照组,进行两次消减杂交和两次抑制性PCR,将第2次PCR产物与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌TG1,通过蓝白斑筛选阳性克隆,并进行PCR鉴定。结果文库的插入片段集中在250～750 bp之间,所长出的菌落中91%为白色克隆,挑取96个克隆进行PCR筛选,获得78个阳性克隆,其中单一扩增条带的克隆约占82%。结论利用SSH技术成功构建了深黄被孢霉高产诱变菌株差异表达基因消减cDNA文库,为进一步筛选和鉴定深黄被孢霉高产诱变菌株特异表达基因奠定了基础。
- 王丹枫于长青
- 关键词：深黄被孢霉抑制消减杂交基因文库
