国家自然科学基金(81070374)
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
- 相关作者：龚建平魏思东朱荣涛高劲谋李培志更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第二医院重庆市急救医疗中心重庆医科大学附属永川医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市卫生局科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小鼠Kupffer细胞分离及细胞培养被引量：4
- 2011年
- 目的 采用在体胶原酶灌注、不连续密度梯度离心、选择性贴壁3步法分离Kupffer细胞（Kupffer cells,KCs）,探讨其在分离小鼠KCs的应用及其对KCs生物活性的影响.方法 根据原位灌注和梯度离心方法不同随机分为4组：无胶原酶原位灌注＋3层梯度离心组（A）、无胶原酶原位灌注＋双层梯度离心组（B）、胶原酶原位灌注＋3层梯度离心组（C）和胶原酶原位灌注＋双层梯度离心组（D）.采用F4/80（BM8）免疫染色及吞墨实验判断细胞纯度和功能、台盼蓝拒染实验判断细胞的活力,探讨不同方法KCs分离的效果及细胞活性.结果 刚分离的KCs细胞近似圆形,接种l h后收获细胞纯度较高,但细胞得率相对较低.培养4 h后KCs得率相对较高,培养28 d仍能存活.免疫荧光可显示分离的为KCs,台盼蓝染色显示各组细胞的活力均在90 %左右,在体胶原酶灌注和双层梯度离心可以增加KCs的得率,双层梯度离心法可以增加分离KCs的纯度.结论 在体胶原酶灌注对提高KCs得率较为重要,在体胶原酶灌注、不连续密度梯度离心、选择性贴壁3步法分离小鼠KCs的的方法简便、高效、稳定,培养的KCs具有良好的细胞生物学性状.
- 朱荣涛魏思东李培志龚建平
- 关键词：KUPFFER细胞细胞分离梯度离心法细胞原代培养
- 大鼠肝移植急性排斥反应中肿瘤坏死因子受体配体的表达及其意义被引量：1
- 2011年
- 目的观察肝移植排斥反应中移植肝脏内糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体配体（GITRL）的表达。方法采用Kamada’s二袖套法建立从Lewis到Brown Norway（BN）大鼠的肝移植排斥模型为排斥组（n=5），从BN到BN的肝移植模型为耐受组（n=5）。术后24h，抽取血液，取肝脏及分离库普弗（Kupffer）细胞，检测肝脏上GITRL及肿瘤坏死因子（TNF）-α的表达，Kupffer细胞上GITRL的表达，检测血清及细胞上清液中TNF-仪的表达。免疫组织化学染色强度采用Image-Pro Plus6．0图像分析软件分析。结果免疫耐受组和排斥组肝脏内的GITRL的平均染色强度分别为0．113±0．007和0．270±0．018（P〈0．05），TNF-α平均染色强度分别为0．114±0．004和0．141±0．005（P〈0．05），耐受组和排斥组的Kupffer细胞GITRL平均染色强度分别为0．206±0．017和0．337±0．018（P〈0．05），Kupffer细胞的培养上清液中，耐受组和排斥组TNF-α的值分别为（68．66-α21．12）、（178．33±29．39）ng／L（P〈0．05）。结论在排斥的早期阶段肝脏及Kupffer细胞的GITRL表达增高，监测和干扰GITRL可能有益于肝移植急性排斥反应的早期诊断和处理。
- 黄中荣魏思东李金政刘作金龚建平余正
- 关键词：肝移植急性排斥反应KUPFFER细胞
- 83例严重肝脏创伤综合诊治分析被引量：4
- 2016年
- 目的 探讨严重肝伤的综合诊治策略。方法 回顾分析重庆市第十三人民医院普通外科2005年9月到2015年9月83例严重肝脏创伤临床资料。按AAST-OIS分级,其中Ⅲ级39例（47.0%）,Ⅳ级34例（41.0%）,Ⅴ级10例（12.0%）。ISS评分：8~16分34例,17~52分46例。根据患者肝伤分级选用不同治疗方法,其中手术79例,非手术选用肝动脉栓塞4例,肝切除手术的膈下感染发生率低于修补和填塞（P〈0.05）。结果 治愈77例（92.8%）,死亡6例（7.2%）。术后并发症：术后出血4例,膈下感染9例,胆漏4例。结论 正确的诊治策略可以降低病死率和并发症发生率,肝切除术是治疗Ⅳ、Ⅴ级肝伤的重要手段,肝动脉断血术是治疗动脉性出血肝伤的有益补充。
- 罗成高劲谋梁绍勇
- 关键词：肝脏
- Th17分化调节机制及其在器官移植中的研究进展
- 2011年
- Th17细胞是新近发现的第三类CD4+ T辅助细胞亚群,其所分泌的IL-17、IL-22等细胞因子在中性粒细胞趋化、组织重塑与修复及介导抗体蛋白的产生等具有重要作用。但Th17分化调节受外界环境影响较大,如转录因子、细胞因子、Th1、Th2和调节T细胞(Tregs)等,这些均具有决定初始CD4+ T细胞向Th17细胞的分化方向和免疫反应方向的调控作用。目前Th17在器官移植物免疫耐受中的作用越来越受到重视,明确Th17分化调节的各种影响因素,将为器官移植免疫耐受研究提供新思路。
- 何勇龚建平梁绍勇
- 关键词：TH17细胞分化调节器官移植
