广西研究生教育创新计划(YCBZ2012015)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：叶洁梅刘云李偲俊黄金山吴原更多>>
- 相关机构：广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西研究生教育创新计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 整合素β1 shRNA重组慢病毒载体的构建及其对Sombati癫痫细胞模型整合素β1基因表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的 构建大鼠整合素β1（integrin β1）基因RNA干扰慢病毒载体,为研究Sombati癫痫细胞模型integrin β1的作用机制提供载体.方法 构建integrin β1基因的4个shRNA慢病毒干扰载体,利用HEK 293T细胞进行慢病毒包装,感染靶细胞PC12,采用Western印迹验证干扰效果,筛选出沉默效果最好的慢病毒shRNA,感染新生大鼠海马神经元细胞和Sombati癫痫细胞,通过Western印迹检测其对海马神经元和Sombati癫痫细胞integrin β1的基因沉默效果.结果 经测序证实RNAi慢病毒载体构建成功,病毒达到有效滴度,PC12细胞病毒转染率达95％以上；Western印迹证实,重组慢病毒integrin β1 shRNA感染海马神经元细胞和Sombati癫痫细胞后integrin β1蛋白表达下降,integrinβ1 shRNA2重组慢病毒载体对海马神经元和Sombati癫痫细胞的沉默效率分别为70％和90％.结论 成功构建integrin β1 RNA干扰慢病毒载体,并在新生大鼠海马神经元和Sombati癫痫细胞中实现有效的基因沉默效应.
- 叶洁梅吴原黄金山李偲俊刘云
- 关键词：RNA干扰整合素Β1海马神经元癫痫
- 难治性癫痫细胞模型中N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Vb和肌营养不良蛋白聚糖基因的表达变化及意义
- 2014年
- 目的探讨难治性癫痫细胞模型(Sombati癫痫细胞模型)中N-乙酰氨基葡萄糖转移酶Vb(GnT-Vb)和肌营养不良蛋白聚糖(dystroglycan)基因的表达变化及意义。方法取新生24 h内SD乳鼠,分离其双侧海马进行原代海马神经元培养。将培养至第14天的海马神经元分为对照组和模型组,模型组利用低镁细胞外液培养3 h制备Sombati癫痫细胞模型。通过实时定量聚合酶链式反应(real-time qPCR)方法测定对照组和模型组造模后第1天和第4天GnT-Vb和dystroglycan的基因表达水平。结果造模后第1天,模型组GnT-Vb基因表达水平低于对照组(P<0.05);而两组dystroglycan基因表达水平间无差异(P>0.05)。造模后第4天,模型组GnT-Vb、dystroglycan基因表达水平均高于对照组(P<0.05)。结论 GnT-Vb和dystroglycan基因在Sombati癫痫细胞模型中表达呈增高趋势,并呈现一定时间的动态变化;GnT-Vb和dystroglycan基因可能同时参与了难治性癫痫的形成过程。
- 叶洁梅吴原黄金山李偲俊韦兴刘云
- 关键词：癫痫
