国家自然科学基金(30671438)
- 作品数：6 被引量：98H指数：5
- 相关作者：章镇佟兆国渠慎春张开春周宇更多>>
- 相关机构：南京农业大学湖北省农业科学院北京市农林科学院林业果树研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校高新技术产业发展项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 几种果实不同组织总RNA提取及质量分析被引量：21
- 2008年
- 以菊水梨为试验材料,通过2种改良CTAB法对果实不同成熟阶段提取的总RNA质量和产量的变化的影响,研究果实不同成熟阶段果皮和果肉总RNA提取的质量和产量,并针对梨果实不同成熟阶段采用不同的改良CTAB法,以较低的成本从果实中提取完整性好、质量高的总RNA。同时提取近成熟的红富士葡萄、富士苹果和丰香草莓3种果实总RNA。总RNA的质量和产量分析结果表明,方法Ⅰ和Ⅱ分别适用于成熟度较低和较高梨果实总RNA的提取,方法Ⅰ也适用于其它3种近成熟果实总RNA提取。并通过RT-PCR验证,所提取的总RNA可以满足基因克隆和表达等分子生物学实验的要求。
- 李志强李莹陶建敏乔玉山渠慎春章镇
- 关键词：果实总RNA改良CTAB法
- 梅PGIP基因的启动子克隆及生物信息学分析被引量：5
- 2010年
- 根据梅PGIP基因（GenBank登录号：DQ364056.1）5′端序列设计特异反向引物,利用染色体步行法获得了该基因上游1 037 bp的启动子序列.启动子结构分析表明,梅PGIP基因启动子序列与中国李PGIP基因启动子显著相似,相似度达89%~96%,较中国李PGIP基因启动子多一个100 bp的区段,与水稻和豆的启动子序列均无Blast比对结果.转录调控元件预测结果表明,克隆序列与豆相应序列的保守区存在着能调控抗病基因转录的GT1结合位点.
- 李广平张长青章镇
- 关键词：PGIP基因启动子调控元件
- 富士苹果Ca2+/H+反向转运体基因克隆、序列分析及其亚细胞定位(摘要)
- Ca/H反向转运体是一类跨膜转运蛋白,在转运细胞质Ca到胞外和胞内"钙库"的过程中,调节胞内Ca平衡,对维持生物体正常生理代谢起着十分重要的作用。本文以拟南芥AtCAX1基因的序列为源序列在NCBI数据库中的苹果EST中...
- 许宽勇王三红王庆菊章镇
- 关键词：基因克隆亚细胞定位
- 文献传递
- 苹果IRAP技术体系的建立及优化被引量：7
- 2009年
- 通过苹果逆转座子长末端重复序列(LTR)保守区域设计引物,对影响苹果IRAP反应的重要因素进行了研究,建立并优化了苹果IRAP分子标记技术体系。优化的苹果IRAP分子标记体系为:25μL反应体系中,模板DNA50ng、Mg2+2.5mmol·L-1、dNTPs0.2mmol·L-1、10×buffer2.5mmol·L-1、TaqDNA聚合酶1.0U、引物0.4μmol·L-1。该体系在所试苹果品种中均获得了较理想的扩增效果,并能鉴定部分芽变品种。
- 贾怀志刘艳红渠慎春高志红王昆章镇
- 关键词：苹果逆转座子IRAP
- 一种从果树成熟叶片提取DNA的方法被引量：54
- 2008年
- 针对果树成熟叶片富含多糖、多酚及其它次生代谢物质的特点,以8个果树树种的秋季成熟叶片为材料,采用改进的CTAB法对其基因组总DNA进行了提取,并对得到的DNA进行了电泳检测、含量测定和AFLP分析。结果表明,该方法从8种果树的成熟叶片中均能提取出基因组总DNA,且DNA的纯度和完整性都较好,D260nm/D280nm的比值均在1.8～2.0之间,无降解现象,RNA去除干净,能被限制性内切酶完全消化;其AFLP分析(引物组合为EcoRI-TA/MseI-CTT,EcoRI-TT/MseI-CTT)条带清晰,多态性好,说明此方法提取的果树成熟叶片基因组总DNA完全适于AFLP分析。
- 佟兆国王富荣章镇赵剑波张开春闫国华周宇姜立杰
- 关键词：果树DNA提取
- 果树中基因枪法遗传转化的研究进展被引量：4
- 2008年
- 目前,应用于果树遗传转化的方法主要有农杆菌介导法和DNA直接导入法。介绍了DNA直接导入法中基因枪转化技术的原理、类型和基因枪的轰击参数、受体材料、基因型、轰击前后的培养条件等对其遗传转化频率的影响,并系统地概述了基因枪法在选择标记基因、报告基因、改良果树性状相关基因、启动子及多基因遗传转化中的应用研究进展,同时对果树基因枪转化研究中存在的问题及应用前景进行了讨论。
- 佟兆国蔡斌华章镇王富荣张开春闫国华周宇
- 关键词：果树基因枪
- 苹果FT同源基因MdFT的表达特性被引量：8
- 2011年
- FT及其同源基因在植物成花、发育阶段转变等过程中发挥重要作用。为探明苹果FT同源基因的功能和表达规律,从富士苹果中分离了长为598 bp的FT同源基因(MdFT)cDNA序列。序列分析结果表明,该cDNA序列具有完整的开放阅读框(ORF),推测编码174个氨基酸,与GenBank登录的苹果MdFT2(FJ555224)、苹果Md-FTL(AB161112)、桃PpFT(EU939302)、杨树PdFTL(AY515152)和葡萄VvFT(EF157728)基因编码的氨基酸序列的同源性分别为99.4%、93.7%、96.6%、87.4%和89.1%。采用半定量RT-PCR分析苹果MdFT基因在种子、幼果、不同时期的叶片以及花的不同时期、不同部位中的表达水平,结果表明:MdFT基因在种子、幼果、叶以及花中均有表达。在叶片中,MdFT基因的表达量随叶片发育进程呈下降趋势,以3月中旬叶芽中的表达量最高。在种子中MdFT基因表达量较低。在花中,MdFT基因的整体表达量随花的发育进程呈下降趋势,以小蕾期的表达量最高。在花的不同部位中,花药和子房中的表达量高于花瓣、花萼和花丝。由此推测MdFT基因不仅在苹果成花中起作用,还有可能参与花的发育过程。
- 郑小一王三红张计育佟兆国渠慎春章镇
- 关键词：苹果克隆
