国家杰出青年科学基金(81325023)
- 作品数：52 被引量：1,038H指数：16
- 相关作者：黄璐琦袁媛高伟郭兰萍查良平更多>>
- 相关机构：中国中医科学院安徽中医药大学首都医科大学更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 红腺忍冬绿原酸生物合成新基因克隆及其生物信息学分析被引量：3
- 2015年
- 为挖掘红腺忍冬绿原酸生物合成的关键酶基因,应用生物信息学方法从红腺忍冬基因组数据库中筛选出4个新基因LHPAL4,LHHCT1,LHHCT2,LHHCT3,并预测其编码蛋白的结构和功能。序列分析结果表明,红腺忍冬LHPAL4与LHPAL1关系密切;LHHCT1,LHHCT3,LHHQT2关系密切,LHHCT2单独聚为一类。通过Real-time PCR检测4个新基因在红腺忍冬不同组织中的转录情况,发现LHPAL4,LHHCT1,LHHCT3在败花中表达量最高,LHHCT2在叶中的表达量最高,为揭示不同部位活性成分含量差异机制提供依据,也为活性成分的合成生物学提供元件。
- 余淑琳黄璐琦袁媛齐琳洁刘大会
- 关键词：红腺忍冬基因家族
- 有关《本草纲目》中北艾产地修订被引量：6
- 2014年
- 《本草纲目》载北艾产地为汤阴"复道"。查汤阴仅有"伏道"一地,是否"复道"即为"伏道"?作者通过梳理艾叶道地沿革,考证"伏道"地名,同时结合全国中药资源普查实地所得资料,得出"复道"一词首次出现于宋代苏颂《本草图经》,历代沿用,但所指均不甚清楚,至《本草纲目》始出现"汤阴"与"复道"并提。伏道为扁鹊墓地之一,商周时即存在,沿袭至今,未曾变化,汤阴艾因伏道扁鹊墓而得名,可推测李时珍认为"复道"即是"伏道",北艾产地应为"汤阴伏道"。
- 黄璐琦邱玏
- 关键词：本草纲目
- 展望CRISPR/Cas9基因编辑技术在药用植物研究中的应用被引量：12
- 2016年
- CRISPR/Cas9基因编辑技术是近几年新发现的一种基因组定点编辑技术,该技术已经广泛应用在基因治疗、基因功能研究、动物模型制造、农作物品种改良等领域的研究中。该文简要介绍了CRISPR/Cas9基因编辑技术,并提出了这项技术在药用植物功能基因组学研究、活性成分次生代谢及合成生物学研究、药用植物分子育种研究等方面的应用前景,为开辟药用植物新领域的研究提供了参考。
- 胡添源高伟黄璐琦
- 关键词：药用植物
- 基于稳定同位素的铁皮石斛产地识别研究被引量：15
- 2018年
- 该研究采用热电离质谱和稳定同位素质谱分别测定铁皮石斛中锶元素以及轻元素碳、氢、氧和氮的同位素比率，对结果进行方差分析和相关性分析，并采用主成分分析构建模型进行产地区分。结果表明，锶同位素比值可有效的区分浙江与其他产区的铁皮石斛样品；其他稳定同位素比值亦表现出产地差异，δD和δ18O受微环境因素影响较大，且二者呈显著的正相关关系。基于稳定同位素比技术的PCA分析能够区分不同产地的铁皮石斛样品，在中药材产地鉴别中具有巨大的应用潜力和前景，可望为中药材产地溯源技术的研究提供新的研究方法。
- 杨健吴浩吕朝耕王升张小波杨光郭兰萍黄璐琦
- 关键词：铁皮石斛稳定同位素锶同位素
- 丹参类贝壳杉烯氧化酶(SmKOL)基因全长克隆及其生物信息学分析被引量：1
- 2014年
- 根据丹参转录组数据提供的基因片段设计特异引物,采用RACE方法克隆类贝壳杉烯氧化酶(Sm KOL)全长c DNA,并进行生物信息学分析;采用实时定量PCR检测茉莉酸甲酯(Me JA)诱导丹参毛状根不同时期的Sm KOL表达水平。克隆得到的Sm KOL全长c DNA由1 884个核苷酸组成,具有完整编码框,编码519个氨基酸,蛋白相对分子质量约为58.88 k Da,等电点p I 7.62;实时定量PCR结果表明该基因受Me JA诱导后,表达水平在36 h时达到最大值。从丹参毛状根中克隆得到1条Sm KOL全长c DNA,为进一步研究该基因的功能和丹参次生代谢调控机制提供了靶基因。
- 胡雅婷高伟刘雨佳程琪庆苏平刘玉忠陈敏
- 关键词：丹参CDNA末端快速扩增生物信息学分析
- 多重位点特异性PCR鉴别霍山石斛、铁皮石斛与齿瓣石斛药材被引量：17
- 2017年
- 为建立同时鉴别霍山石斛、铁皮石斛及齿瓣石斛的多重位点特异性PCR法,解决上述石斛属药材真伪掺杂的难题。通过比对石斛药材ITS及trn L-trn F序列,设计引物,建立多重PCR鉴别法,并对不同来源的霍山石斛、铁皮石斛及齿瓣石斛样品进行特异性扩增,根据特异性条带大小进行鉴别。结果在退火温度为61℃、循环数为35时,齿瓣石斛、铁皮石斛和霍山石斛分别可扩出584、397和211 bp的特异性条带。本文所建立的方法对齿瓣石斛和霍山石斛的最低检测限为1.2 ng,铁皮石斛低于0.24 ng,其对铁皮石斛、齿瓣石斛和霍山石斛的混伪检出限分别为1%、1%和5%。表明多重位点特异性PCR法能特异性鉴别霍山石斛、铁皮石斛及齿瓣石斛。
- 罗宇琴蒋超袁媛肖苏萍赵润怀李戈赵玉洋
- 关键词：霍山石斛铁皮石斛齿瓣石斛掺伪鉴别
- 《中国药典》收载中药海马的基原与性状探讨被引量：13
- 2017年
- 海马为重要动物药材,用药历史悠久,市场混伪品众多。为正本清源,对历代海马本草文字记载、图片和照片进行考证,结合标本馆馆藏动物标本和药源调查,认为我国海马的基原应该是海龙科动物克氏海马Hippocampus kelloggi,1901、棘海马H.spinosissimus,1913、管海马H.kuda,1852、三斑海马H.trimaculatus,1814或日本海马H.mohnikei,1853的干燥体。《中国药典》收载的刺海马H.histrix,1856实为棘海马。并建议对海马性状进行修订,增加鉴别方法,以建立完善的海马质量控制标准。
- 蒋超单锋袁媛刘富艳詹志来金艳赵玉洋黄璐琦
- 关键词：海马基原性状鉴别中国药典
- 雷公藤悬浮细胞原生质体的制备及瞬时转化体系的建立被引量：7
- 2017年
- 为探索药用植物雷公藤(Tripterygium wilfordii)悬浮细胞原生质体提取的最优条件,并建立雷公藤原生质体瞬时转化体系,以雷公藤悬浮细胞为材料,对酶解液配比、酶解时间、甘露醇浓度及处理转速进行考察。用PEG介导的瞬时转化法将外源基因转化到雷公藤原生质体中。结果表明,以雷公藤悬浮细胞为材料提取原生质体的最佳条件是酶液配比为2.0%纤维素酶+0.5%果胶酶+0.5%离析酶,甘露醇浓度为0.6 mol·L–1,酶解10小时,处理转速为67×g;用PEG介导法将含有编码GFP的植物表达载体转化雷公藤悬浮细胞原生质体,激光共聚焦扫描显微镜下细胞显示绿色荧光。通过实验筛选得到雷公藤悬浮细胞原生质体的最佳提取条件,建立了雷公藤悬浮细胞原生质体的瞬时转化体系,为进一步开展雷公藤功能基因及合成生物学研究奠定了基础。
- 胡添源王睿陈上马宝伟高伟黄璐琦
- 关键词：原生质体悬浮细胞雷公藤
- 灵芝DNA甲基转移酶(GlMET1)基因克隆及原核表达诱导分析被引量：2
- 2016年
- DNA甲基转移酶是DNA甲基化过程中最关键的酶,对生物体内的基因表达调节起着重要作用。研究根据灵芝转录组数据,通过全基因合成首次克隆得到灵芝DNA甲基转移酶Gl MET1,Genbank注册号为KU239998,并对其基因特性和空间结构进行全面的生物信息学分析。原核表达诱导分析表明p ET28a(+)-Gl MET1重组质粒在BL21(DE3)中能成功表达出目的蛋白,对其诱导条件进行优化,得出蛋白最合适的表达条件为:诱导温度为16℃,重组菌生长2.5 h(A600为0.8),IPTG浓度为0.2 mmol·L^(-1),诱导时间为12 h。实时荧光定量PCR结果表明不同品种灵芝Gl MET1的基因表达水平均有明显差异,且Gl MET1在成熟期的表达水平均低于幼年期,说明Gl MET1表达量随着灵芝的生长发育呈下降趋势。该研究结果为深入研究DNA甲基转移酶蛋白的作用机制奠定了基础。
- 查良平王亚君刘爽赵玉洋袁媛黄璐琦
- 关键词：灵芝甲基化甲基转移酶原核表达
- 丹参酮合成生物学研究进展被引量：14
- 2015年
- 通过阐明并模拟中药活性成分生物合成的基本规律,人工设计并构建新的、具有特定生理功能的生物系统(药用植物或微生物系统),这种中药合成生物学研究策略,将是一种极具潜力的中药活性成分资源获取方法。丹参酮是丹参中一类具有显著药理活性的二萜,该文系统介绍了丹参酮合成生物学研究进展,旨在为其他中药萜类活性成分研究提供借鉴,为中药资源可持续利用研究提供新的研究策略。
- 高伟胡添源郭娟吕冬梅戴住波周雍进黄璐琦
- 关键词：丹参酮生物合成途径合成生物学
