湖北省教育厅重点项目(D20081703)
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 相关作者：陈洪高曾庆福饶维桥黄鹏张华更多>>
- 相关机构：武汉纺织大学武汉科技学院更多>>
- 发文基金：湖北省教育厅重点项目“十一五”国家科技支撑计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- DNA提取方法对苎麻脱胶菌群PCR-DGGE结果偏移的影响被引量：3
- 2010年
- 为筛选和优化出较适宜的苎麻脱胶菌群DNA提取方法,本文分别以来自苎麻沤麻环境的6种纯培养菌等丰度混合物和苎麻自然沤麻菌群为材料,研究"溶菌酶-SDS"法、"超声波-溶菌酶-SDS"法、"蛋白酶K-SDS"法以及"冻融-蛋白酶K-SDS"法4种DNA提取方法对菌群16Sr DNA基因PCR-DGGE偏移结果的影响。结果表明,4种方法均能从2类材料中提取出了超过1600ng/μL的DNA,不同方法之间DNA产率略有差异,经过超声波处理或反复冻融处理的DNA有明显的降解,但4种方法提供的DNA模板均扩增出了450bp的16Sr DNA基因片段。4种DNA提取方法对DGGE结果有明显影响,且只有"冻融-蛋白酶K-SDS"法检测到了纯培养菌混合物中的全部6种细菌,4种方法获得的自然沤麻菌群的DGGE指纹图谱也明显不同,最多产生17条带("冻融-蛋白酶K-SDS"法),最少只有9条带("溶菌酶-SDS"法),增加超声波或冻融等物理处理可以使部分弱带变强。因此,组合应用物理、生物和化学等细胞裂解方法可以提供更有代表性的DNA,可减少PCR-DGGE结果的偏移。
- 黄鹏陈洪高饶维桥曾庆福
- 关键词：DNA提取方法
- 苎麻生物脱胶助剂研究被引量：2
- 2010年
- 通过添加N/P营养、酶激活剂、表面活性剂和螯合剂等来研究化学助剂对菌群RAMCD407脱除苎麻韧皮胶质的影响,结果表明:单独添加0.2%的MgSO_4(酶激活剂)、1%的EDTA(螯合剂)及0.1%的油酸钠(表面活性剂)可使脱胶时间分别缩短2 h、6 h和3 h,但是添加NH_4HCO_3和K_2HPO_4形式的N/P营养对脱胶效果没有明显影响,而"0.1%MgSO_4-0.7%EDTA二钠-0.05%油酸钠"组合助剂可将脱胶时间由18 h缩短到7 h。
- 李广美陈洪高曾庆福张华徐敏华
- 关键词：苎麻生物脱胶助剂
