河北省卫生厅医学科学研究重点课题(20100039)
- 作品数：6 被引量：9H指数：2
- 相关作者：张焕铃宋蕾侯洁刘树锋连伟光更多>>
- 相关机构：河北医科大学河北医科大学第四医院更多>>
- 发文基金：河北省卫生厅医学科学研究重点课题河北省自然科学基金河北省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 近交系HFJ大鼠的抗肿瘤细胞Walker-256特性
- 2012年
- 目的检测近交系HFJ大鼠的肿瘤学特性。方法采用大鼠肿瘤细胞Walker-256分别接种HFJ大鼠和Wistar大鼠制作腹水瘤、实体瘤模型,观察两种动物对同一种肿瘤细胞的敏感性及免疫反应差异。结果对于腹水瘤Walker-256接种7d,Wistar大鼠有6只腹水产生为阴性,HFJ大鼠腹水产生均为阳性。继续观察至20d,可见到Wistar大鼠有3只腹水阴性(阳性率9/12,死亡2只,染色体用1只),而HFJ大鼠腹水全部为阴性(阳性率0/12,死亡2只,染色体用1只)。腹水中Walker-256细胞染色体分析,Wistar大鼠和HFJ大鼠众数变化范围均为50～62条,无显著差异。实体瘤接种7d,Wistar大鼠和HFJ大鼠均可触摸到右侧腋下有肿块产生。20d后Wistar大鼠除2只肿块消失外其他均有肿块存在并随时间延长而增大(阳性率13/15);所有HFJ大鼠腋下肿块均变软并逐渐消失(阳性率0/15)。检测各组大鼠的细胞免疫、体液免疫功能,发现正常HFJ大鼠IgM、IgA显著低于Wistar大鼠(P<0.01),IgG差异不显著。荷瘤组HFJ大鼠和Wistar大鼠IgG均高于各自正常对照组,差异极显著(P<0.01)。Wist-ar大鼠腹水瘤阳性组IgG显著低于阴性组和HFJ腹水阳性组(P<0.05),Wistar大鼠实体瘤阳性组也显著低于HFJ实体阳性组(P<0.01)。Wistar大鼠腹水瘤阳性组IgM显著低于阴性组(P<0.05),Wistar大鼠腹水瘤阴性组和HFJ大鼠腹水瘤、实体瘤阳性组IgM均高于各自对照组,且差异显著(P<0.05)。细胞免疫结果显示各组CD4+数量差异不显著;正常HFJ大鼠CD8+显著少于Wistar大鼠(P<0.05),Wistar大鼠腹水瘤和实体瘤阳性组CD8+数量较阴性组和正常对照组均显著减少(P<0.05)。各荷瘤阴性组大鼠CD8+数量均较正常值增加,除Wistar大鼠腹水瘤和HFJ实体瘤阴性组大鼠差异显著(P<0.05)外,其他均不显著;CD4+/CD8+结果与CD8+相反。结论 HFJ大鼠具有抗大鼠肿瘤细胞Walker-256的特性,腹水瘤及实体瘤均不易生长。
- 张焕铃张建刚刘军须郑龙连伟光尤红煜刘健敏刘福英
- 关键词：近交系抗肿瘤免疫
- Wistar大鼠高转移率肝癌模型
- 2015年
- 目的制备转移率较高的诱发性肝癌大鼠模型。方法取40只130~150 g雄性Wistar大鼠,按100 mg/kg腹腔注射二乙基亚硝胺（diethylnitrosamine,DEN）,100 ppm N-亚硝基吗啉（N-nitrosomorpholine,NMOR）饮水,给大鼠用药。于给药2、4、10、12、14、20周后各取4只大鼠,对其肝脏、肺脏运用苏木精-伊红染色法（hematoxylineosin staining,HE）染色,同时对肝脏进行甲胎蛋白AFP免疫组化分析。结果模型大鼠从第2周起肝脏变黄,10周开始肝脏出现散在小结节,20周多个肝叶出现较大结节,且60%出现肺转移。结论此建模过程成功模拟了人类肝癌发展的三步曲：肝纤维化-肝硬化-肝癌,可作为人类肝癌良好的动物模型。
- 宋蕾王昭赵丽侯洁刘军须张焕铃刘树锋
- 关键词：肝癌模型WISTAR大鼠
- 大鼠肝包膜下移植Walker-256制备肝癌模型被引量：2
- 2014年
- 目的通过原位移植的方法制备大鼠肝癌动物模型。方法取大鼠肿瘤细胞Walker-256制备为浓度1×108个/ml,分别于Wistar大鼠肝包膜下接种0.04 ml。观察大鼠肝脏实体瘤的生长情况及肺转移的发生率。结果肝包膜下接种细胞悬液7 d可见较小肿瘤块生长;14 d开始出现肺转移,并伴有肠系膜、生殖系统的转移;21 d肺转移率达100%。肝肿瘤组织HE染色结果可见肿瘤组织呈条索及团块状排列,排列紊乱,癌细胞索之间由血窦相连,癌肿边缘的肝组织受压萎缩。肺组织切面有多个散在的圆形或卵圆形实化灶。HE染色结果可见腺体样或乳头状结构,核染色深,核仁、核膜比较清楚。
- 张焕铃巨英超张建刚宋蕾侯洁徐增年范晓飞段肖翠刘树锋
- 关键词：大鼠肝癌模型
- AFP表达调控载体对肝癌模型的靶向治疗作用被引量：1
- 2013年
- 目的观察甲胎蛋白(AFP)表达调控载体pAFP-P53-EGFP对AFP表达阳性肝癌模型靶向治疗作用。方法以人肝癌HepG2(AFP阳性)、人肝癌SMMC7721(AFP阴性)细胞于BALB/c-nu裸小鼠右腋皮下荷瘤,14d成瘤,免疫组化检测AFP。将构建好的pAFP-EGFP和pAFP-P53-EGFP重组质粒于肿瘤内注射,观察肿瘤体积变化,通过免疫组化观察p53在HepG2肿瘤中的特异性表达及对肿瘤细胞的杀伤作用。结果荷HepG2、SMMC7721细胞株裸鼠14d皮下肿瘤生长良好,且肿瘤体积均为500mm3左右,经HE染色证实造模成功。同时,AFP免疫组化结果显示接种HepG2细胞的肿瘤组织AFP表达阳性,SMMC7721细胞的肿瘤组织AFP表达为阴性。经pAFP-EGFP和pAFP-P53-EGFP重组质粒治疗后,p53的免疫组化分析结果显示接种HepG2细胞的裸鼠pAFP-P53-EGFP治疗组p53表达量显著高于其他各组,可见明显细胞凋亡现象,且肿瘤体积较对照组减小。结论含AFP基因调控序列的pAFP-P53-EGFP载体可专一性地作用于AFP阳性肝癌细胞,引起肝癌细胞周期阻滞和凋亡。
- 张焕铃侯洁王俊霞尤红煜郑龙连伟光刘树锋
- 关键词：AFP启动子P53细胞周期阻滞
- microRNA在肝癌诊断、治疗和预后中的作用研究进展被引量：6
- 2015年
- 肝癌是人类常见的恶性肿瘤之一,目前缺乏有效的诊断和治疗技术,死亡率居高不下。microRNA(miRNA)是一类内源性非编码的小RNA,研究显示,多种miRNA在正常组织和肝癌组织间存在表达差异,与肿瘤的发生发展密切相关。miR-21、miR-106a、miR-34等与肝癌的发生有关;miR-92、miR-20等与肝癌的分化有关;而miR-30d、miR-21与肝癌的增生、迁移和侵袭有关。肝癌进程中关键的miRNA及其作用靶点是近年来的研究热点,有望为肝癌诊断、治疗和预后提供新的途径。研究发现miR-375、miR-199a、miR-122等可作为潜在的肝癌诊断标志物应用于肝癌诊断;miR-195、miR-26a、miR-127等可应用于肝癌治疗;miR-221、miR-99b、miR-let-7g等被认为与肝癌术后的预后有关,还有一些其他分子可作为肝癌细胞侵袭、转移的调节分子并用于判断预后。本文就miRNA在肝癌的诊断、治疗、预后方面的研究作一综述。
- 宋蕾王昭张焕铃
- 关键词：肝癌MICRORNA基因蛋白
- pAFP-P53-EGFP靶向诱导AFP阳性肝癌细胞凋亡
- 2011年
- 目的研究pAFP-P53-EGFP对AFP阳性肝癌细胞的靶向促凋亡作用。方法将SD大鼠AFP启动子、沉默子和远端增强子Ⅲ组合为1.2kb的AFP基因调控序列,导入pEGFP-N1质粒的启动子处,构建pAFP-EGFP同时引入P53基因片段,构建pAFP-P53-EGFP重组质粒。转染HepG2、SMMC7721、HeLa细胞,流式细胞术分析各细胞凋亡情况。分别将质粒pAFP-EGFP和pAFP-P53-EGFP转染HepG2细胞进行DNA ladder分析及电镜观察细胞超微结构。结果 pAFP-P53-EGFP重组质粒转染HepG2、SMMC7721、HeLa细胞,各组细胞凋亡率分别为:HepG2组%gate=2.65±0.08;HeLa组%gate=0.42±0.025;SMMC7721组%gate=0.39±0.018。AFP阳性的HepG2细胞凋亡率明显高于SMMC7721、HeLa细胞(P<0.05)。且转染pAFP-P53-EGFP质粒的HepG2细胞出现明显的DNA ladder,细胞超微结构亦显示出现凋亡。结论 pAFP-P53-EGFP可以在AFP阳性细胞中相对专一表达,且pAFP-P53-EGFP可通过诱导细胞凋亡从而达到抑制肿瘤作用。
- 张焕铃刘福英王俊霞连伟光尤红煜郑龙刘健敏
- 关键词：AFP启动子P53细胞凋亡
- AFP表达调控载体对肝癌模型的靶向治疗作用
- 目的 观察AFP表达调控载体对AFP表达阳性肝癌模型靶向治疗作用.方法：以人肝癌HepG2(AFP 阳性)、人肝癌SMMC7721(AFP阴性)细胞于BALB/c-nu裸小鼠右腋皮下荷瘤,14d成瘤.将构建好的pAFP-...
- 张焕铃王俊霞尤红煜郑龙连伟光刘树锋
- 关键词：AFP启动子P53细胞周期阻滞
