国家自然科学基金(81070404)
- 作品数：6 被引量：14H指数：2
- 相关作者：许小平马燕王倩陈波斌林果为更多>>
- 相关机构：复旦大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 耐高三尖杉酯碱人SKM-1细胞系的建立及其生物学特性观察
- 2012年
- 目的建立耐高三尖杉酯碱人SKM-1细胞系，初步探讨该细胞系的生物学特性及多药耐药机制。方法通过较大剂量间断冲击逐渐增加药物浓度的方法培养人骨髓增生异常综合征转急性髓系白血病细胞系SKM-1细胞，建立耐高三尖杉酯碱的SKM-1细胞系，命名为SKM-1／HHT。光学显微镜下观察耐药细胞系和亲本细胞系的一般形态学变化，MTT法测定倍增时间和耐药指数，绘制生长曲线；利用流式细胞术检测细胞周期分布及细胞内柔红霉素含量；应用常规遗传学方法进行核型分析；采用荧光相对实时定量PCR方法检测多药耐药相关基因（mdrl及MRP）及topo-IIa的表达。结果历经7个月建立了耐药细胞系SKM一1／HHT。耐药细胞与亲本细胞的形态及免疫表型接近；耐药细胞核型与SKM-1细胞基本相同，但更为复杂，存在20、x、4、5、9、11号染色体差异；耐药细胞G，期细胞增多（64．04％对41．91％），S期细胞减少（34．92％对53．53％），G：期细胞减少（1．04％对4．56％）；耐药细胞对高三尖杉酯碱、长春新碱、柔红霉素、依托泊苷耐药性明显增加，耐药指数分别为17．94、8．75、5．99和13．76；耐药细胞内DNR荧光量明显低于亲本细胞（698±36对858±54）；耐药细胞mdr1表达水平明显增高，其2^△Ct值为亲本细胞的20．1倍[（3．42±0．46）×10^12对（0．17±0．01）×10^-2，P〈0．05]；MRP表达亦明显升高，2^△Ct值为亲本细胞的3．56倍[（4．77±0．87）×10^-3对（1．34±0．56）×10^-3，P〈0．05]；topo—IIa基因表达在耐药细胞有所下降，耐药细胞与亲本细胞的2^△Ct值之比为0．619：1[（1．91±0．30）×10^-4对（3．08±0．21）×10^-4，P〈0．05]。结论建立了对高三尖杉酯碱耐药的SKM-1／HHT细胞系，其耐药机制主要涉及mdr1的过度表达而导致的细胞外排增强，MRP及topo-IIa表达水平的改变可能也部分参与了这�
- 周峰谭微马燕陈波斌朱萍许小平林果为
- 关键词：骨髓增生异常综合征细胞系SKM-1高三尖杉酯碱多药
- β微管蛋白基因在骨髓增生异常综合征向白血病转化中的意义被引量：2
- 2016年
- 目的 探讨β微管蛋白（IUBB）基因在骨髓增生异常综合征（MDS）向白血病转化（简称转白）中的作用.方法 基于复旦大学附属华山医院已建立的MDS患者巢式病例对照研究队列,从中选取符合转白危险因素配对条件的各11例患者建立病例组（发生转白的MDS）和对照组（未发生转白的MDS）.采用实时定量PCR检测两组患者骨髓单个核细胞中TUBB mRNA表达水平,并采用生长曲线测定（CCK-8法）、软琼脂克隆形成实验和透射电镜,在MDS转白细胞株（SKM-1细胞株）中观察TUBB基因沉默前后SKM-1细胞株的生物学特性的变化.结果 （1）实时定量PCR结果显示,病例组的TUBB mRNA相对表达水平显著高于对照组（2.91±0.41比0.90±0.23,P＜0.01）.（2）TUBB基因特异性小干扰RNA（TUBB-siRNA）转染组的SKM-1细胞在转染后24、48和72 h的吸光度值（A450/630nm）分别为0.299±0.045、0.526±0.034和0.652±0.035,均低于相同时点的阴性siRNA转染组（0.438±0.074、0.858±0.064和0.974±0.044,P值均＜0.05）,TUBB-siRNA转染组SKM-1细胞的增殖活性受到明显抑制作用.（3）软琼脂克隆形成实验显示,TUBB-siRNA转染组的细胞克隆形成率为（7.0±0.2）％,显著小于阴性siRNA转染组的（25.0±0.2）％（P＜0.01）.（4）透射电镜显示,转染TUBB-siRNA后,SKM-1细胞出现细胞质空泡、核碎裂等细胞凋亡征象.结论 TUBB基因可能通过影响MDS恶性克隆的增殖途径在MDS转白过程中起一定作用.
- 马燕陈波斌许小平林果为
- 关键词：骨髓增生异常综合征白血病巢式病例对照研究
- 骨髓增生异常综合征去甲基化药物治疗的研究进展被引量：8
- 2012年
- 骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)的发病机制涉及多阶段、多因素,基因改变与表观遗传修饰可能共同参与了这一过程。DNA甲基化是表观遗传学中一种最为重要的修饰,MDS患者常表现为总体DNA高甲基化。使用DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMT)抑制剂降低总体甲基化水平,在MDS患者中取得了富有成效的临床反应及血液学改善。DNMT抑制剂可分为两类:5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-Aza-CdR)、地西他滨(5-Aza-2-deoxycytidine,decitabine)等核苷和核苷衍生物类抑制剂,它们可提高MDS患者的临床完全反应率、部分反应率及血液学改善,但缓解率、疗效尚不够令人满意;肼苯哒嗪等非核苷类抑制剂。非核苷类抑制剂与丙戊酸镁联合应用治疗MDS获得成功,为MDS去甲基化治疗药物的研究开启了一种新思路。
- 王琳许小平
- 关键词：骨髓增生异常综合征5-AZA-CDRDECITABINE肼苯哒嗪
- 人急性淋巴细胞白血病细胞系的研究进展被引量：2
- 2016年
- 急性淋巴细胞白血病（ALL）是一组来自B系或T系淋巴前体细胞的恶性克隆性疾病.ALL不仅在儿童急性白血病中最为常见,亦占成年人急性白血病的20％,其恶性程度高,治疗效果差,缓解率低.有关生物学特性及药理学的研究对改善ALL患者生存率及提高生命质量具有重要作用.来源于ALL患者的人ALL细胞系为探索ALL的发生、演变机制和相关药物研发提供了不可替代的细胞模型.目前已建立的人ALL细胞系几乎涵盖大部分ALL的免疫分型及特异性染色体异常,对推动ALL遗传学诊断及靶向治疗进展起到重要作用.文章对人ALL细胞系的建系进展,尤其是携带费城染色体及MLL基因重排的人ALL细胞系进行综述.
- 王倩许小平
- 关键词：白血病淋巴细胞急性细胞系费城染色体MLL
- 骨髓增生异常综合征细胞系的研究进展被引量：2
- 2015年
- 骨髓增生异常综合征（MDS）是一组多步骤累及多基因异常变化而导致的具有高度异质性的造血系统恶性克隆性疾病。主要表现为骨髓髓系细胞一系或多系发育异常，无效造血导致难治性贫血或全血细胞减少及演变为急性髓系白血病风险增高[1]。2008年WHO血液肿瘤分类系统将MDS列为五类主要髓系肿瘤之一。
- 王倩许小平
- 关键词：骨髓增生异常综合征细胞系恶性克隆性疾病全血细胞减少难治性贫血基因异常
- 骨髓增生异常综合征向急性白血病转化相关微小RNA的研究进展
- 2014年
- 微小RNA（miRNA）是一种长度为18～25个核苷酸的内源性非编码小RNA分子,发挥着广泛而重要的调控功能.miRNA的异常表达可以导致许多血液系统疾病.骨髓增生异常综合征（MDS）是一组以无效造血、病态造血及高风险向急性髓系白血病（AML）转化为特点的高度异质性疾病,20％～30％的MDS患者可能向AML进展.miRNA在MDS的发生、发展及疾病转归中起了重要作用.文章就近年MDS向AML转化相关miRNA的研究进展作一综述.
- 庄琳马燕许小平
- 关键词：微小RNA骨髓增生异常综合征急性白血病
