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靶向mecA基因纳米胶体金探针快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的建立被引量：1: 2009年; 目的用以纳米胶体金颗粒为载体的DNA探针杂交技术，建立快速、简便和特异的检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的方法。方法以直径60nm的胶体金纳米颗粒与巯基修饰的2条mecA基因特异性寡核苷酸探针共价结合，制备成纳米胶体金探针。直接提取金黄色葡萄球菌的基因组DNA，经超声破碎后与纳米胶体金探针进行液相杂交。杂交产物经高速离心后再用反向色谱反应盘检测有无胶体金颗粒沉淀产生。用该法和PCR扩增试验同时检测临床分离株的mecA基因，以PCR法为金标准，评价纳米胶体金探针液相杂交法的准确性。结果在95株临床试验菌株中PCR法共检出71株MRSA，24株MSSA。在71株MRSA中，纳米胶体金探针杂交试验有69株为阳性，敏感度为97．2％，最低检测限为4．72fmol／L。而在24株甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌（MSSA）中，纳米胶体金探针杂交试验无一株阳性，特异度为100％。95株临床试验菌株中纳米胶体金探针杂交试验正确检出93株，准确度97．9％。结论纳米胶体金探针杂交试验与PCR检测MRSA具有很好的一致性。应用胶体金探针杂交技术检测MRSA具有快速、简便、准确的特点，有望成为MRSA的快速诊断的新方法。; 夏云何云燕黎颖张莉萍; 关键词：甲氧西林抗药性葡萄球菌 DNA探针胶体金

固化DNA纳米胶体金探针杂交目视化比色检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecA基因的实验研究被引量：2: 2010年; 目的建立以纳米金颗粒为载体的DNA探针杂交方法,快速、特异地检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)特异性mecA基因。方法采用直径为60nm的胶体金纳米颗粒与巯基修饰的2条mecA基因寡核苷酸探针共价结合,制备成固化的DNA金纳米探针。将金纳米探针与其互补的mecA基因靶序列在液相中杂交,通过调节2条探针的比例和不同的检测方法对杂交反应条件和产物检测进行优化。结果金纳米探针呈稳定的酒红色,与互补的靶序列DNA进行液相杂交后颜色呈现明显的蓝色变化。当2条探针不对称加入时颜色变化更明显。采用反向色谱反应盘检测反应产物也可获得满意的效果。产物离心后检测灵敏度可达2.36 fmol/L。结论固化纳米胶体金探针杂交技术具有快速简便的特点,有望为MRSA的快速检测提供一种新的方法。; 何云燕黎颖夏云; 关键词：金纳米颗粒 DNA探针耐甲氧西林金黄色葡萄球菌比色法

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重庆市卫生局科研项目(07-02-231)

文献类型

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