浙江省自然科学基金(Y2110862)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
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- PGE_2对气道平滑肌细胞分泌和凋亡影响的研究
- 2012年
- 目的前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)通过调控气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)的迁移、分泌、增殖功能,对哮喘气道重塑有关键性影响。研究PGE2对ASMCs凋亡及其分泌白介素4(interleukin 4,IL-4)、白介素10(interleukin 10,IL-10)和γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)的影响,对阐明PGE2通过调控ASMCs分泌Th1/Th2细胞因子对气道炎症发挥作用机制有重要意义。方法用大鼠气道平滑肌细胞株与终浓度为10-9～10-6的PGE2共培养24h,分6组,共4个浓度梯度。用AnnexinV-EGFP/PI双染细胞凋亡检测试剂盒在流式细胞仪测定凋亡率,同时用IL-4、IL-10和IFN-γELISA试剂盒在酶标仪检测其浓度。每4个复孔为1组,实验重复2次,数据为8孔的平均值。结果应用不同浓度的PGE2后ASMCs各组细胞凋亡率与对照组相比无明显变化。但IL分泌与PGE2有显著的量效关系,IL-4和IL-10随PGE2浓度下降而分泌量显著下降,但IFN-γ随PGE2浓度下降而分泌量呈升高趋势,两者呈分离现象(空白对照、阴性对照、10-9PGE2、10-8PGE2、10-7PGE2、10-6PGE2组,IL-4分别为6.77±1.58、9.24±2.45、38.17±11.33、29.27±11.12、26.05±9.49、21.11±7.21;IL-10为4.8±1.06、6.35±2.11、71.89±12.03、43.68±11.25、28.89±8.75、24.31±6.67;IFN-γ为2.17±1.97、3.25±1.48、10.63±4.75、13.4±5.57、15.47±6.16、19.54±6.35)。结论 PGE2能调控ASMCs分泌细胞因子,随着浓度梯度增加能促进Th1型细胞因子IFN-γ分泌,同时抑制Th2型细胞因子IL-4、IL-10分泌,但对ASMCs凋亡无显著影响。认为在正常状态下PGE2的分泌与维持气道内Th1/Th2的平衡有关。
- 应延风陈浩浩金耀建屠平光胡野
- 关键词：气道平滑肌细胞前列腺素E2Γ-干扰素凋亡
- PGE2对气道平滑肌细胞分泌和凋亡影响的研究被引量：2
- 2012年
- 目的前列腺素E2（prostaglandinE2，PGE2）通过调控气道平滑肌细胞（airway smooth muscle cells，ASMCs）的迁移、分泌、增殖功能，对哮喘气道重塑有关键性影响。研究PGE。对ASMCs凋亡及其分泌白介素4（interleukin4，IL-4）、白介素10（interleukin10，IL-10）和-γ干扰素（interferon-γ，IFN-γ）的影响，对阐明PGE2通过调控ASMCs分泌Th1／Th2细胞因子对气道炎症发挥作用机制有重要意义。方法用大鼠气道平滑肌细胞株与终浓度为10^-9～10^-6的PGE。共培养24h，分6组，共4个浓度梯度。用AnnexinV—EGFP／PI双染细胞凋亡检测试剂盒在流式细胞仪测定凋亡率，同时用IL-4、IL-10和IFN7ELISA试剂盒在酶标仪检测其浓度。每4个复孔为1组，实验重复2次，数据为8孔的平均值。结果应用不同浓度的PGEz后ASMCs各组细胞凋亡率与对照组相比无明显变化。但IL分泌与PGE2有显著的量效关系，IL-4和IL-10随PGE2浓度下降而分泌量显著下降，但IFN7随PGE2浓度下降而分泌量呈升高趋势，两者呈分离现象（空白对照、阴性对照、10PGE2、10PGE2、10PGE2、10～PGE2组，IL-4分别为6．77±1．58、9．24±2．45、38．17±11．33、29．27±11．12、26．05±9．49、21．11±7．21；IL-10为4．8±1．06、6．35±2．11、71．89±12．03、43．68±11．25、28．89±8．75、24．31±6．67；IFN-γ为2．17±1．97、3．25±1．48、10．63±4．75、13．4±5．57、15．47±6．16、19．54±6．35）。结论PGE2能调控ASMCs分泌细胞因子，随着浓度梯度增加能促进Th1型细胞因子IFN-γ分泌，同时抑制Th2型细胞因子IL-4、IL-10分泌，但对ASMCs凋亡无显著影响。认为在正常状态下PGE2的分泌与维持气道内Th1／Th2的平衡有关。
- 应延风陈浩浩金耀建屠平光胡野
- 关键词：气道平滑肌细胞前列腺素E2Γ-干扰素凋亡
- 大鼠支气管哮喘模型气道平滑肌细胞上前列腺素E受体分布改变被引量：1
- 2015年
- 目的气道重塑是支气管哮喘（简称哮喘）的主要病理特征之一，它与气道平滑肌细胞迁移和增殖功能密切相关，前列腺素E受体（E—prostanoid，EP）对之有调控功能。本研究通过大鼠哮喘模型构建，评价了哮喘状态下气道平滑肌细胞上EP改变情况，为开发EP类药物治疗哮喘气道重塑方法提供理论依据。方法20只SD清洁级大鼠，随机分为卵白蛋白激发哮喘组和对照组，28d后处死，进行组织学检查，分离培养气道平滑肌细胞，用荧光定量PCR测定。结果大鼠哮喘模型经组织病理学检查符合哮喘气道重塑现象，气道平滑肌细胞RNA纯度A260／280处于1．8～2．0之间，用Oligod Tadaptor作引物进行逆转录反应，以特异miRNAs引物为正向引物，以共同的与adaptor配对的通用引物为反向引物，进行实时荧光定量PCR扩增。用GAPDH作为内参。扩增反应体系为miRNAQ-PCR诊断试剂盒。EPl～4相对表达量（2^-△△Ct）在对照组和哮喘组分别为（EP1：4．35±0．18，6．55±1．21；EP2：1．35±0．12，0．24±1．06；EP3：4．59±1．14，5．89±1．74；EP4：2．89±1．85，1．69±0．44）哮喘组EP2／4显著下降，而EP1显著增高（P〈0．01）。结论大鼠哮喘模型气道平滑肌细胞上EP2／4减少，和EP1表达增加，这可能是哮喘气道重塑的重要因素。
- 应延风胡野陈浩浩屠平光
- 关键词：哮喘气道平滑肌细胞
- 姜黄素对人气道平滑肌细胞免疫调控功能影响的研究
- 2017年
- 目的研究姜黄素对体外培养的人气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)分泌Th1、Th2细胞因子功能影响,为姜黄素对局部气道免疫调控提供理论依据。方法原代培养ASMCs,第4~6代细胞用于实验,细胞用不同浓度姜黄素(μmol/L)(4.24、8.48、16.97、33.93、67.86、135.73、271.45)诱导培养48 h,经细胞鉴定后,用ELISA法测定上清液中IL-4、IFN-γ浓度。结果姜黄素对ASMCs分泌IL-4、IFN-γ分泌水平有显著影响,与对照组对比,随浓度增高,加姜黄素8.48μmol/L以上浓度组,IL-4水平显著下降(pg/m L)(对照组68.05±13.37,实验组56.77±15.54(P<0.05),49.24±11.34,51.41±9.56,50.05±10.13,45.41±7.53,43.89±8.77(P均<0.01));67.86μmol/L以上浓度组,IFN-γ显著增高(pg/m L)(对照组:22.21±4.28,实验组:33.98±7.32,38.53±7.64,45.31±7.59,P均<0.01)。结论姜黄素能调控气道平滑肌细胞分泌IFN-γ、IL-4,调节Th1、Th2的平衡并向Th1方向偏移,可能在抑制局部气道过敏反应中有一定作用。
- 郭阳应佩蓓楼英彪朱海松施妙春王永兴
- 关键词：姜黄素白细胞介素气道平滑肌细胞
