国家自然科学基金(81370792)
- 作品数：5 被引量：33H指数：4
- 相关作者：李瑛李军刘虹李华肖争更多>>
- 相关机构：中南大学湘雅二医院湖南省第二人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 曲尼斯特延缓糖尿病肾病肾间质纤维化的作用及机制被引量：4
- 2013年
- 目的:研究曲尼斯特延缓糖尿病肾病肾间质纤维化的作用及机制。方法:建立糖尿病肾病(DKD)大鼠模型:SD大鼠随机分为正常对照组(n=6)、DKD模型组(n=8)、曲尼斯特低剂量(n=8)和高剂量治疗组(n=8)。采用高糖高脂饲料喂养联合低剂量STZ注射构建大鼠DKD模型。成模后,分别予以曲尼斯特200 mg/(kg·d)(曲尼斯特低剂量组)和400 mg/(kg·d)(曲尼斯特高剂量组)分2次灌胃。于第8周末处死大鼠,收集大鼠24 h尿液测24 h尿白蛋白排泄量,收集血测肾功能及血白蛋白;取部分肾组织置于4%中性甲醛溶液中固定,采用免疫组织化学检测肾组织补体C3a受体(C3aR),E-钙黏附蛋白(epithelial cadherin,E-Cadherin),α-SMA,纤维连接蛋白(fibronectin,FN),I型胶原蛋白(collagen I,Col I),干细胞生长因子(stem cell factor,SCF)和干细胞因子受体(c-kit)的表达以及分布;Western印迹检测肾组织E-cadherin,α-SMA,FN,Col I,SCF和c-kit蛋白的表达;RT-PCR检测肾组织FN,Col I,SCF,c-kit mRNA的表达。结果:曲尼斯特能抑制肥大细胞在DKD大鼠肾组织的浸润;DKD模型组肾小管上皮细胞E-cadherin的表达较正常对照组减少,并可见α-SMA表达,曲尼斯特可一定程度逆转这一过程;与正常对照组比较,DKD模型组肾小管间质区域Col I和FN的表达增加,曲尼斯特能剂量依赖性地抑制Col I和FN的表达;DKD大鼠肾组织SCF,c-kit蛋白及mRNA表达增加;肾组织SCF,c-kit蛋白表达与肥大细胞浸润程度及肾小管间质FN,Col I蛋白的表达呈显著正相关。曲尼斯特能抑制SCF,c-kit mRNA及蛋白的表达(P<0.05)。结论:肥大细胞参与了DKD大鼠肾间质纤维化的发生发展,曲尼斯特可能通过阻断SCF/c-kit信号通路,抑制肥大细胞的募集而逆转DKD大鼠肾小管上皮细胞的EMT,抑制肾间质纤维化。
- 罗俊辉李瑛杨阳李军孙林段绍斌刘虹刘伏友刘玉平奚易云尤燕华李华
- 关键词：曲尼斯特糖尿病肾病肾间质纤维化肥大细胞干细胞生长因子干细胞因子受体
- 去甲斑蝥素抑制蛋白磷酸酶2Ac对Smad3-L区去磷酸化抗肾间质纤维化被引量：4
- 2015年
- 目的 证实去甲斑蝥素（NCTD）具抗肾间质纤维化的作用,其抗肾间质纤维化的机制与靶向抑制蛋白磷酸酶2Ac（PP2Ac）对Smad3中间连接区（Smad3-L）的去磷酸化修饰有关.方法 常规培养人肾小管上皮细胞（HK-2）,转染PP2Ac shRNA质粒后,细胞分为5组：（1）空白组;（2）TGF-β1（5μg/L）组;（3） TGF-β1 ＋NCTD （2.5 mg/L）组;（4）TGF-β1＋PP2Ac shRNA组;（5）TGF-β1＋PP2Ac shRNA＋NCTD组.采用实时荧光定量PCR和Western印迹检测PP2Ac、纤维连接蛋白（FN）、胶原蛋白Ⅰ （Col-Ⅰ）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和E-钙黏蛋白（Ecadherin） mRNA及蛋白的表达.然后将HK-2细胞随机分为3组：（1）空白组;（2）TGF-β1组;（3）TGF-β1＋NCTD组,采用免疫荧光检测pSmad3-L（Ser204）和pSmad3-L（Ser208）在HK-2细胞的分布,Western印迹检测HK-2细胞核蛋白pSmad3-L（Se204）和pSmad3-L（Ser208）的表达.结果 （1）TGF-β1促进HK-2细胞PP2Ac表达,同时上调FN、Col-Ⅰ和α-SMA的表达,下调E-cadherin 的表达.NCTD和PP2Ac shRNA均抑制PP2Ac的表达,下调FN、Col-Ⅰ和α-SMA表达,上调E-cadherin的表达.但NCTD与小干扰RNA共同作用对PP2Ac表达的抑制,以及对TGF-β1诱导的上述指标的改变程度同单纯PP2Ac小干扰RNA干预组无明显差异.（2）TGF-β1刺激HK-2细胞核内pSmad3-L（Ser204）、pSmad3-L（Ser208）表达明显增多,NCTD干预使pSmad3-L（Ser204）、pSmad3-L （Ser208）在细胞核内表达进一步增多.结论 NCTD通过抑制PP2Ac介导的Smad3-L区去磷酸化,发挥抗肾间质纤维化作用.
- 肖争尤燕华李瑛李华向玉琼庾楠楠李军段邵斌刘虹
- 关键词：去甲斑蝥素PHOSPHATASE
- β连环蛋白翻译后修饰与肾间质纤维化被引量：9
- 2016年
- β连环蛋白(β-catenin)在细胞中具有双重作用,一是参与钙黏蛋白(cadherin)介导的细胞间的黏附作用,二是作为经典wnt信号通路中最重要的信息分子,调控细胞生长、分化和凋亡等。β-catenin能发生多种蛋白翻译后修饰,如磷酸化、泛素化、乙酰化,影响其自身稳定性、细胞定位及活性,进而介导E-cadherin/β-catenin复合物完整性,并调节Wnt/β-catenin信号通路,调控β-catenin靶基因的表达,最终影响肾间质纤维化的发生发展过程。
- 肖争李瑛
- 关键词：Β-CATENIN肾间质纤维化
- 去甲斑蝥素通过抑制蛋白磷酸酶2Ac抗肾间质纤维化被引量：7
- 2014年
- 目的研究蛋白磷酸酶2Ac（PP2Ac）和肾间质纤维化的关系，探讨去甲斑蝥素（NCTD）对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型肾间质纤维化的作用及其机制。方法16只雄性SD大鼠随机分成4组：假手术组（Sham组）、UUO3d组、UUO7d组及UUO14d组，每组各4只，分别于术后1d、3d、7d、14d处死。免疫组化法检测肾组织PP2Ac、纤连蛋白（FN）、I型胶原（C01．I）的表达。20只雄性SD大鼠随机分成4组，每组5只：假手术组（Sham组）、UUO模型组、NCTD低剂量治疗组（0．05mg·kg-1·d。）及NCTD高剂量治疗组（0．1mg·kg-1·d-1）。从建立UUO模型前1d始，治疗组分别予以NCTD0．05mg·kg·d。和0．1mg·kg-1·d。腹腔注射，Sham组和UUO模型组仅予以等量生理盐水腹腔注射，术后第14天处死大鼠。免疫组化、Western印迹和实时荧光定量PCR法检测肾组织FN、Col—I、d—SMA、E．cadherin和PP2Ac蛋白及mRNA的表达。结果（1）与Sham组相比，随着梗阻时间的延长，PP2Ac的表达逐渐增多，UUO14d表达最高，同时伴随FN、C01．I的表达升高（均P〈0．05）。相关分析结果显示，PP2Ac与FN、Col—I表达呈正相关（r=0．894和r=0．887，均P〈0．05）。（2）与Sham组相比，UUO模型组FN、C01．I、a-SMA表达明显上调，而E．cadherin表达明显下降，同时伴PP2Ac表达上调（均P〈0．05）；与UUO模型组相比，NCTD组剂量依赖性抑制FN、C01-I的表达，下调a．SMA的表达，上调E—eadherin的表达，同时抑制PP2Ae的表达（均P〈0．05）。结论PP2Ae与肾间质纤维化程度呈正相关；NCTD可抑制肾问质纤维化，其机制可能与抑制PP2Ae的表达有关。
- 尤燕华刘玉平李瑛奚易云李华李军段绍斌刘虹孙林彭佑铭刘伏友
- 关键词：纤维化去甲斑蝥素梗阻性肾病
- 微小RNA早期诊断急性肾损伤的研究进展被引量：9
- 2020年
- 急性肾损伤(AKI)是由多种病因引起的短时间内肾功能急剧恶化的临床综合征,由于血清肌酐值和尿量变化在早期诊断AKI和评判预后等方面存在不足,因此寻找并获得有潜力的AKI生物标志物是亟待解决的临床实际问题。
- 李湘玉(综述)李瑛
- 关键词：急性肾损伤微小RNA
