武汉市科技攻关计划项目(2013060602010270)
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
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- 线粒体自噬与中枢神经系统疾病关系的研究进展被引量：3
- 2017年
- 1线粒体自噬1.1概念细胞自噬（Autophagy）是真核细胞中进化上高度保守的、用于降解和回收利用细胞内生物大分子和受损细胞器的过程。根据底物进入溶酶体内的途径不同可将自噬分为3种类型：微自噬（microautophagy）、分子伴侣介导的自噬（chaperonemediatedautophagy,CMA）、巨自噬（macroautophagy）[1]。大多数情况下所指的自噬即为巨自噬或大自噬。巨（大）自噬可以分为选择性和非选择性,之前的研究认为自噬对降解底物没有选择性,
- 方聪聪毛善平董慧敏刘宝辉王舜
- 关键词：细胞衰老溶酶体线粒体膜电位分子伴侣生物大分子
- 大鼠早期局灶性脑缺血再灌注损伤中USP10的表达水平变化及其与自噬的关系被引量：2
- 2017年
- 目的探讨早期局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠模型中再灌注不同时间点USP10的表达水平变化及其与自噬的关系。方法将36只成年雄性SD大鼠随机分成4组:假手术组、脑缺血2 h再灌注6 h模型组、脑缺血2 h再灌注12 h模型组、脑缺血2 h再灌注24 h模型组;采用线栓法致大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,给予神经行为学评分,用TTC染色法测定脑梗死体积,透射电镜观察梗死周边区皮层神经元自噬,Western blot法检测梗死周边区皮层USP10和自噬相关蛋白LC3B的表达水平,免疫荧光双标法检测梗死周边区皮层神经元中USP10及LC3B的表达水平变化。结果免疫荧光双标显示模型组自噬蛋白阳性细胞数与存活神经元数均于再灌注12 h最多(P<0.05),二者某种程度上趋势一致;Western blot免疫荧光双标均显示与假手术组相比,USP10及LC3B蛋白在模型组中表达上调(P<0.01),且于再灌注12 h组达到高峰(P<0.05);透射电镜显示再灌注不同时间点自噬强度的变化与免疫荧光自噬蛋白表达水平的趋势基本一致。结论早期脑I/R损伤中自噬的激活某种程度上可减轻神经元的损伤,而USP10可能通过某种机制调控脑I/R中自噬的发生发展。
- 方聪聪毛善平曾智董慧敏刘宝辉王舜谭华威
- 关键词：脑缺血再灌注损伤自噬LC3
- 缺血后处理对PC12细胞缺血再灌注损伤致细胞凋亡的作用及其机制研究
- 2016年
- 目的探讨缺血后处理对PC12细胞缺血再灌注损伤引起的细胞凋亡的作用及其作用机制。方法将PC12细胞分为3组:正常组、缺血再灌注组、缺血后处理组。缺血再灌注组予以糖氧剥夺12 h后正常培养,缺血后处理组经糖氧剥夺12 h后予以3个循环的正常培养(10 min)→糖氧剥夺(10 min),再正常培养12 h后通过Hoechst染色检测各组细胞的凋亡情况,应用Westernblot检测各组细胞Caspase-3活化蛋白及磷酸化NF-κB/p65蛋白表达水平,采用RT-PCR检测各组细胞NF-κB及Caspase-3 mRNA表达水平。结果Hoechst染色显示缺血后处理可降低缺血再灌注引起的细胞凋亡;与对照组相比,缺血再灌注组磷酸化NF-κB/p65和Cleaved caspase-3的蛋白表达水平高;缺血后处理组磷酸化NF-κB/p65和Cleaved caspase-3的蛋白表达水平明显低于缺血再灌注组;NF-κB和Caspase-3的mRNA表达趋势与蛋白表达基本一致。结论缺血后处理可以减轻缺血再灌注损伤引起的PC12细胞凋亡,这可能与NF-κB/p65信号通路有关。
- 郭晓洁毛善平董慧敏刘宝辉腊琼王舜方聪聪
- 关键词：缺血后处理PC12细胞NF-ΚB/P65凋亡
- TLR4参与缺血后处理对缺血再灌注损伤致细胞凋亡的保护作用被引量：1
- 2014年
- 目的探讨TLR4是否参与缺血后处理对PC12细胞缺血再灌注损伤致细胞凋亡的保护作用及其作用机制。方法将PC12细胞分为4组:正常组、缺血再灌注组、缺血后处理组及缺血后处理+脂多糖组,通过流式细胞术Annexin-FITC和PI双染法检测各组PC12细胞凋亡率,Western blotting检测各组细胞TLR4及Caspase-3表达水平,通过RT-PCR测定各组TLR4mRNA水平。结果缺血后处理可以降低缺血再灌注组细胞TLR4蛋白表达、mRNA水平及凋亡率,脂多糖可以逆转其下降趋势。结论 TLR4可能参与了缺血后处理对PC12细胞缺血再灌注损伤致细胞凋亡的保护作用。
- 刘军毛善平董慧敏赵海专邢变枝郭晓洁
- 关键词：缺血后处理PC12细胞
