辽宁省科学技术计划项目(2009225008-10)
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 相关作者：牛慧彦何平王佳贺张毅张萌更多>>
- 相关机构：中国医科大学更多>>
- 发文基金：辽宁省科学技术计划项目辽宁省博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 鸟苷酸解离抑制因子-2真核表达载体构建及稳定转染A549细胞株的建立
- 2011年
- 目的构建Rab蛋白鸟苷酸解离抑制因子-2(GDI2)真核表达载体并建立稳定转染A549细胞株。方法聚合酶链反应(PCR)扩增GDI2基因片段,构建pcDNA3.1-GDI2真核表达载体,经酶切、PCR、测序验证其正确性,脂质体法转染真核细胞A549,G418筛选建立稳定转染的细胞株。免疫印迹法检测稳定转染的细胞株。结果构建了真核表达载体并建立了稳定转染的A549细胞株,成功表达GDI2蛋白。结论 GDI2真核表达载体成功构建及稳定转染A549细胞株的建立,为研究GDI2过度表达对肿瘤侵袭和转移的影响奠定了实验基础。
- 牛慧彦张毅王鑫王佳贺何平
- 关键词：真核表达载体稳定转染
- 肿瘤转移相关因子RhoGDI2蛋白在肺癌95D细胞侵袭转移中的作用被引量：1
- 2011年
- 目的研究肿瘤转移相关因子RhoGDI2蛋白在肺癌95D细胞侵袭转移中的作用。方法应用细胞培养技术培养95D细胞,分别10,30μg/L不同浓度rhHGF作用95D细胞48 h后收集细胞沉淀,利用蛋白印迹方法检测RhoGDI2蛋白表达情况。结果无血清培养的95D细胞中RhoGDI2蛋白的表达,高于正常10%胎牛血清培养的细胞组,而10%胎牛血清培养的细胞组与10ng/mL rhHGF组RhoGDI2蛋白的表达水平相当,但30ng/mL rhHGF组RhoGDI2蛋白表达明显降低。结论促进肺癌95D细胞生长、侵袭转移的因素与RhoGDI2的表达成负相关。
- 牛慧彦张萌张毅李慧何平
- 关键词：肺癌
- 雷帕霉素联合多西紫杉醇对肺癌细胞增殖和凋亡的影响被引量：7
- 2012年
- 目的探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路抑制剂雷帕霉素(RAPA)联合多西紫杉醇(DOC)对肺癌细胞系A549、SPC-A-1、95D和NCI-H446增殖抑制及凋亡的影响。方法甲基噻唑基四唑(MTT)法检测不同浓度RAPA组、DOC组及DOC联合20.0 nmol.L-1 RAPA组对肺癌细胞系增殖抑制作用;流式细胞仪法检测RAPA组、DOC组及DOC联合20.0 nmol.L-1 RAPA组对肺癌95D细胞凋亡的影响。结果 RAPA能抑制肺癌细胞的增殖,其作用呈剂量依赖性;单独应用DOC及DOC联合20.0 nmol.L-1 RAPA均可显著抑制肺癌细胞的增殖,且联合应用抑制率显著升高(P<0.05);流式细胞仪检测显示RAPA及DOC均可增加肺癌95D细胞的凋亡率(P<0.05),联合应用明显增加细胞的凋亡率(P<0.05)。结论 mTOR信号通路参与肺癌细胞的增殖与凋亡,mTOR信号通路抑制剂RAPA可增强DOC的抗肿瘤效应。
- 牛慧彦王鑫张萌王佳贺何平
- 关键词：肺癌哺乳动物雷帕霉素靶蛋白雷帕霉素多西紫杉醇
- 雷帕霉素联合多西紫杉醇诱导肺癌95D细胞凋亡的机制研究被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路抑制剂雷帕霉素(rapamycin,Rapa)联合多西紫杉醇(docetaxel,DTX)对肺癌95D细胞系凋亡的影响。方法:流式细胞仪检测雷帕霉素及联合多西紫杉醇对95D细胞凋亡的影响,RT-PCR方法和Western blot检测凋亡基因survivin mRNA和蛋白的表达。结果:mTOR抑制剂雷帕霉素和多西紫杉醇单独处理组均能促进肺癌细胞的凋亡,下调凋亡基因survivin mRNA和蛋白的表达;联合应用雷帕霉素和多西紫杉醇促凋亡作用更强,survivin mRNA和蛋白的表达下降更明显。结论:雷帕霉素联合多西紫杉可以降低survivin的表达,从而起到促进肿瘤细胞凋亡的作用,为临床寻找新型抗肿瘤药物及治疗肺癌的新化学治疗方案提供了理论和实践基础。
- 牛慧彦姜洪芳王佳贺阚亮何平
- 关键词：雷帕霉素多西紫杉醇肺癌凋亡SURVIVIN
- 细胞外信号调节激酶蛋白参与雷帕霉素诱导的肺癌95D细胞凋亡的机制研究被引量：2
- 2012年
- 目的观察雷帕霉素(Rapa)及联合多西紫杉醇(DTX)对肺癌95D细胞系凋亡的作用,并进一步探讨其对细胞外信号调节激酶蛋白(ERK1/2)表达的影响。方法流式细胞仪方法检测单独应用雷帕霉素和多西紫杉醇及两药联合应用对95D细胞凋亡的影响,Western Blot方法检测ERK1/2蛋白及p-ERK1/2蛋白的表达。结果雷帕霉素和多西紫杉醇单独处理组均能促进肺癌细胞的凋亡,且随着浓度的增加其促凋亡作用明显增加;联合应用雷帕霉素和多西紫杉醇促凋亡作用更强,并能显著降低p-ERK1/2蛋白的表达。结论雷帕霉素联合多西紫杉能进一步促进肺癌95D细胞凋亡,ERK1/2信号通路参与其诱导的肺癌95D细胞的凋亡过程。
- 牛慧彦申明惠张毅李慧何平
- 关键词：西罗莫司肺肿瘤凋亡
