中国科学院西部之光基金(2008DF01)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
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- 相关机构：西北大学西北工业大学更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 褪黑素合成酶基因转化烟草及转化植株抗氧化系统变化被引量：4
- 2009年
- 通过根癌农杆菌(含植物表达载体YXu55)介导的转化技术,将褪黑素生物合成酶-芳烷基胺N-乙酰转移酶(Arylalkylamine N-acetyltransferase,AANAT)与羟基吲哚O-甲基转移酶(Hydroxyindole O-methyltransferase,HIOMT)基因导入到烟草(秦烟95)中。对所获得的庆大霉素抗性烟草株系进行Southern blotting和RT-PCR分子生物学检测,结果表明,AANAT-HIOMT基因已成功地整合到烟草基因组中,并且可以在mRNA水平上进行转录。用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定转化株系的褪黑素含量表明,转AANAT-HIOMT基因烟草株系的褪黑素含量均明显高于pZP122(不含AANAT和HIOMT基因的空白质粒)转基因株系和未转基因的对照植株,证明AANAT-HIOMT基因在转基因植株中的表达增强了褪黑素的合成能力。对不同株系抗氧化系统的部分指标进行了测定,并与其亲本对照植株比较,发现AANAT-HIOMT基因在转基因植物中的表达引起超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性增加,谷胱甘肽(GSH)浓度以及总抗氧化能力升高,且没有引起膜脂质过氧化物丙二醛(MDA)的变化,说明转基因烟草抗氧化潜能得到提高。
- 王英娟贾敬芬步怀宇赵宇玮许耀Carl Hirschie JohnsonJan Kolár
- 关键词：烟草褪黑素抗氧化
- 毛脉蓼的离体培养
- 2009年
- 1植物名称毛脉蓼[Polygonum ciliinerve（Nakai）Ohwi]。
2材料类别幼叶和茎段。
3培养条件基本培养基为MS。愈伤组织诱导培养基：（1）MS＋2，4-D1．0mg·L^-1（单位下同）＋6-BAO．5；（2）MS＋2，4-D2．0＋6-BA0．5。芽分化培养基：（3）MS＋6-BA2．0＋NAA0．1；（4）MS＋6-BA1．0＋NAA0．1；
- 王英娟步怀宇贾敬芬
- 关键词：离体培养基本培养基诱导培养基分化培养基植物名称愈伤组织
- RP-HPLC法测定转基因贯叶连翘植株中褪黑素被引量：2
- 2009年
- 目的建立测定褪黑素的反相高效液相色谱紫外分析方法,分析并测定通过组培获得的贯叶连翘不同转基因株系及其亲本植株的褪黑素。方法以SymmetryC18(150mm×4.6mm,5.0μm)为色谱柱;100mmol乙酸铵-甲醇(80∶20)为流动相,体积流量为0.8mL/min;检测波长为265.8nm,灵敏度为2.00AUFS。结果褪黑素浓度在20～500ng/mL线性关系良好(R2=0.9992),平均加样回收率为98.09%(n=6),RSD为2.21%,最小检出量为1.0ng/mL。褪黑素峰保留时间约为8.8min。结论该方法可以简便准确分析不同株系贯叶连翘中的褪黑激素的量;贯叶连翘YXu55(含庆大霉素抗性标记和AANAT-HIOMT基因)转基因株系的褪黑素的量均高于pZP122(仅含庆大霉素抗性标记,不含AANAT-HIOMT基因的空白质粒)转基因株系和未转基因的对照植株;而pZP122转基因株系褪黑素的量跟未转基因的对照植株的量几乎相等。
- 王英娟郝建国贾敬芬岑举人赵宇玮
- 关键词：贯叶连翘褪黑素转基因
