山西省自然科学基金(2010011050-2)
- 作品数：4 被引量：18H指数：3
- 相关作者：向川卫小春侯慧铭段王平秦迎泽更多>>
- 相关机构：山西医科大学第二医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- LMP-1基因慢病毒载体构建及其在大鼠骨髓间充质干细胞的表达被引量：6
- 2013年
- 目的:构建人LMP-1重组慢病毒载体,体外转染大鼠骨髓间充质干细胞,检测LMP-1基因在大鼠骨髓间充质干细胞的表达。方法:利用PCR法从cDNA文库中钓取LMP-1基因,将其与经AgeⅠ酶切线性化的慢病毒载体pGC-FU-EGFP相连接,转化感受态大肠杆菌,筛选出阳性克隆pGC-FU-LMP-1-EGFP,基因测序对其鉴定。经293T细胞包装后,收集富含病毒颗粒LV-LMP-1-EGFP的细胞上清,浓缩并标定滴度,RT-PCR检测并鉴定。以最佳MOI值体外转染大鼠骨髓间充质干细胞,荧光显微镜观察转染是否成功,流式细胞仪检测转染效率,RT-PCR和Western blot检测转染细胞LMP-1基因的表达。结果:①基因测序及RT-PCR检测证实携带人LMP-1基因的慢病毒载体构建成功,包装后获得滴度为2×108TU/ml的LV-LMP-1-EGFP。②以MOI=100转染大鼠骨髓间充质干细胞,荧光显微镜下可见大量绿色荧光蛋白表达,转染效率可达93.5%,经RT-PCR与Western blot检测,被转染细胞内有LMP-1基因表达。结论:成功构建携带人LMP-1基因的慢病毒载体,可高效转染大鼠骨髓间充质干细胞,被转染细胞可高效表达LMP-1基因。
- 侯慧铭向川郭丽张桦栋
- 关键词：慢病毒LMP-1骨髓间充质干细胞
- 咖啡酸苯乙酯对雌性骨质疏松小鼠的实验研究被引量：2
- 2013年
- 目的采用骨生物力学、骨密度测定方法综合评价咖啡酸苯乙酯(Caffeic acid phenethyl esterCAPE)对去势小鼠骨质疏松影响的实验研究。方法取96只12周龄C57BL/6J雌性小鼠随机分16组,(每组6只)。分别研究CAPE预防骨质疏松部分:1周假手术组(sham PBS组)、去势组(ovx PBS组);4周、7周的sham PBS组、ovx PBS组、ovx CAPE(0.5 mg/kg)组、ovx CAPE(1 mg/kg)组。CAPE治疗骨质疏松部分:7周sham空白组和ovx空白组;造模7周后腹腔注射药物4周,包括11周sham PBS组、ovx PBS组、ovx CAPE(0.5 mg/kg)组、ovx CAPE(1 mg/kg)组。96只小鼠均用0.5%的戊巴比妥0.3 ml腹腔注射麻醉,5分钟后心脏采血,采用ELISA方法检测血清中雌激素水平。并对小鼠的双侧肱骨、脊柱进行取材,取双侧肱骨进行三点弯曲实验,采用美国HOLOGIC骨密度仪分析小鼠脊柱骨密度变化。结果 (1)血清中雌激素水平检测发现,所有ovx组雌激素较sham组显著降低(P<0.05)。(2)骨密度:预防部分4周ovx组的脊柱骨密度值较sham组、ovx0.5mg组及ovx1mg组明显降低(P<0.05)。(3)生物力学:预防部分1周、4周与治疗部分7周、11周ovx组较sham组、ovx0.5mg组、ovx1mg组的最大破坏应力指标显著降低(P<0.05)。结论咖啡酸苯乙酯能明显改善去势骨质疏松小鼠骨的力学性能,增加去势骨质疏松小鼠的骨密度,抑制骨吸收,从而达到预防和治疗骨质疏松的作用。
- 秦迎泽向川段王平李琦卫小春
- 关键词：骨质疏松咖啡酸苯乙酯生物力学骨密度
- LMP-1基因慢病毒重组体对大鼠骨髓间充质干细胞的增殖影响及其表达被引量：5
- 2013年
- 目的：探讨LMP-1重组慢病毒载体体外转染大鼠骨髓间充质干细胞（BMSC）的方法，并检测LMp-1基因对BMSC增殖能力的影响及表达。方法：选取清洁级4周龄SD大鼠6只（雌雄不限），无菌条件下提取骨髓间充质干细胞并培养至第3代，设立空白对照组（未经特殊处理，只有第3代骨髓间充质干细胞）、慢病毒载体转染组（在未经特殊处理的第3代骨髓间充质干细胞中加入PGC-FU-GFP及转染试剂Polybrene）和重组基因转染组（在未经特殊处理的第3代骨髓间充质干细胞中加入PGC-FU-LMP．1-GFP及转染试剂Polybrene）进行转染。转染48h后，通过免疫荧光显微镜观察荧光表达，流式细胞仪检测慢病毒的转染效率，采用MTY法评价慢病毒转染对BMSC增殖的影响；WesternBlot检测转染后基因的表达情况。结果：①成功培养出第3代SD大鼠BMSC，以100的感染复数（MOI）转染，48h后免疫荧光显微镜下可见大量绿色荧光蛋白表达，转染效率达67％；②不同时间点慢病毒载体转染组和重组基因转染组，与空白对照组细胞增殖比较差异无统计学意义；③WestemBlot检测示重组基因转染组72kDa处有条特征带，其大小与LMP－l融合蛋白（～50kDa＋28kDa=78kDa）基本吻合。结论：经LMp-1基因慢病毒重组体转染大鼠骨髓间充质干细胞对其增殖活力没有影响并可有效表达LMP－1。
- 梁长生向川魏增永侯慧铭秦迎泽卫小春
- 关键词：骨髓细胞
- 高龄股骨转子间骨折三种手术方法的临床疗效分析被引量：6
- 2012年
- 背景:股骨转子间骨折是老年常见骨折,临床以手术治疗为主,但高龄股骨转子间骨折患者手术内植物选择尚存争议。目的:探讨三种手术方法治疗高龄股骨转子间骨折的临床疗效。方法:2009年5月至2012年5月收治80岁以上股骨转子间骨折患者142例,其中包括动力髋螺钉(DHS)组45例、股骨近端防旋髓内钉(PFNA)组42例及人工股骨头置换(FHR)组55例,比较三组的术中出血量、术后部分负重时间、术后并发症及Harris髋关节功能评分等指标。结果:142例全部获得随访,随访时间5～40个月,平均21.4个月,死亡12例。术后并发症比较无统计学差异(P>0.05)。术中出血量:FHR组>DHS组>PFNA组,两两比较有统计学差异(P<0.05);术后部分负重时间:DHS组>PFNA组>FHR组,两两比较有统计学差异(P<0.05);Harris髋关节功能评分优良率:FHR组优于DHS组(P<0.05)。结论:DHS、PFNA及FHR治疗高龄股骨转子间骨折均有较满意疗效,相对于DHS和FHR,PFNA具有微创操作、出血少及固定可靠的优点,而FHR在临床疗效以及早期下地负重活动的优点更加明显,认为高龄股骨转子间骨折应以PFNA或FHR为首选。
- 胡艳辉向川段王平王斌王子江卫小春
- 关键词：转子间骨折高龄动力髋螺钉股骨近端防旋髓内钉人工股骨头置换
