河南省科技攻关计划(112102210385)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：李运会耿三春刘伟董冰雪詹慧莹更多>>
- 相关机构：南阳师范学院南阳理工学院更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省教育厅科学技术研究重点项目高层次人才科研启动基金更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程更多>>
- OE-PCR快速合成基因的探索研究
- 2013年
- 根据GenBank中基因序列,利用DNAworks3.1软件,选择合适的参数优化设计引物。通过一步简单的重叠延伸PCR(OE-PCR),然后使用最外端的引物进行PCR扩增得到完整的基因序列。结果表明,利用该方法不但成功地合成了几个具有毕赤酵母密码子偏好性的基因,而且一次向野生型Cip基因里引入了12个点突变,并可以低成本、低错误率甚至是正确无误地合成1.5 kb以内的任何已知基因。
- 董冰雪韩雪梅薜淑萍耿三春刘伟李运会詹慧莹
- 关键词：基因合成
- 一种快速简便高通量筛选重组克隆的方法被引量：1
- 2012年
- 介绍了一种极其简单、快速、廉价、可靠的从cDNA文库或者转化平板上高通量筛选重组质粒的方法。将细菌培养液或者转化平板上的单菌落直接用1%SDS一步裂解,琼脂糖凝胶快速电泳,根据DNA迁移速率判断是否重组质粒。裂解上清液可以稀释后直接用作PCR模板,扩增出目的基因。利用这种方法可以在短短的几个小时内完成几百个重组质粒的筛选。
- 董冰雪李玉英叶壮清耿三春李运会宋雅菲刘伟
- 关键词：重组质粒高通量筛选PCR
- 突变灰盖鬼伞过氧化物酶降解刚果红的响应面法优化分析被引量：3
- 2014年
- 酶法降解偶氮染料刚果红是一个复杂的过程,受温度、pH、酶量、刚果红浓度和双氧水浓度显著影响。为研究各因素及因素间交互作用对刚果红降解影响,提高刚果红的降解率,分别使用单因素法和响应面分析法对刚果红降解条件进行了优化。单因素实验结果显示灰盖鬼伞过氧化物酶降解刚果红的最适条件为:pH 5.0、32℃、酶量4.98 U、双氧水0.1mmol/L、刚果红20 mg/L,此时刚果红最高降解率为34.84%。然后选双氧水浓度、刚果红浓度和灰盖鬼伞过氧化物酶量作为3个因素,通过中心组合设计实验,用响应面法对刚果红降解进行优化分析,最后得到一个拟合度良好的二次多项方程模型(R2=0.9900)。方差分析结果显示,刚果红浓度和酶量是影响最显著的因素,双氧水与酶以及染料与酶之间的交互作用极显著。响应面分析优化后的反应体系为:双氧水浓度0.15 mmol/L,刚果红浓度为27.21 mg/L,酶为2.0 7 U,在此条件下,刚果红降解率达58.13%。
- 董冰雪张磊耿三春李运会刘伟詹慧莹贡一峰李鹏远万里
- 关键词：单因素分析
