黑龙江省教育厅科学技术研究项目(12531234)
- 作品数：7 被引量：12H指数：2
- 相关作者：牛玉梅李艳萍潘爽何丽娜张巍巍更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学更多>>
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- 模拟微重力影响人牙髓干细胞的矿化能力与RhoA-Rho激酶信号通路相关性研究被引量：1
- 2016年
- 目的初步研究Rho A-Rho激酶信号通路在模拟微重力(Simulated Microgravity,SMG)影响人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,h DPSCs)矿化过程中的作用。方法将经酶消化法分离、纯化后的人牙髓干细胞体外扩增培养,以1×106细胞接种于PLGA支架上,分别于模拟微重力下及普通重力下矿化诱导液中培养,72 h后收集细胞,采用Western Blot检测Rho A蛋白表达;此外,在重力条件下采用Rho激酶抑制剂Y-27632,以矿化诱导液培养组作为对照组,检测矿化诱导3、5、7、10d两组碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,AKP)活性变化,采用Western Blot检测矿化诱导10 d,成牙本质相关蛋白牙本质基质蛋白(dentin matrix protein-1,DMP-1)、牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein,DSP)、牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)的表达,采用茜素红染色法检测矿化诱导21 d,矿化结节形成水平。结果模拟微重力下,人牙髓干细胞中Rho A蛋白的表达下调;在普通重力矿化诱导条件下,加入抑制剂Y-27632后,各时间点细胞AKP表达水平均较对照组有所降低;矿化诱导10 d,成牙本质相关蛋白DSP、DSPP、DMP-1表达明显下调,矿化诱导21 d,矿化结节形成同样有所减少。结论模拟微重力下,Rho A蛋白表达水平下调;抑制Rho激酶的表达,可降低h DPSCs矿化能力,提示Rho A-Rho激酶信号通路可能参与模拟微重力对h DPSCs矿化能力的影响。
- 牛玉梅张巍巍曹涛李艳萍刘会梅贾丛辉
- 关键词：人牙髓干细胞模拟微重力矿化
- 模拟微重力环境对人牙髓干细胞体外增殖能力的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:研究模拟微重力环境对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)在PLGA支架上体外增殖能力的影响。方法:将分离、鉴定后的人牙髓干细胞接种在PLGA支架上,采用MTT法检测普通环境和模拟微重力环境中培养24、48、72h的人牙髓干细胞在PLGA支架上的细胞活性。DAPI荧光染色和流式细胞术比较牙髓干细胞在两种环境培养3d的细胞数量以及细胞周期分布情况。结果:MTT显示模拟微重力组中各时间点的A值均高于普通环境培养组;DAPI荧光染色显示在模拟微重力下培养3d的人牙髓干细胞数量明显多于普通环境培养组;细胞周期分析结果表明模拟微重力组中S期细胞比例明显高于普通环境培养组(P<0.05)。结论:接种在PLGA支架上的人牙髓干细胞在模拟微重力环境下较普通环境具有更高的体外增殖能力。
- 何丽娜王田田张巍巍潘爽李艳萍牛玉梅
- 关键词：人牙髓干细胞模拟微重力体外细胞增殖
- 模拟微重力对人牙髓干细胞在裸鼠体内矿化能力的影响
- 2015年
- 目的:研究模拟微重力环境对聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)支架上的人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)在裸鼠体内矿化能力的影响。方法:分离、培养hDPSCs并进行鉴定,然后将hDPSCs接种到PLGA支架上培养72h后随机分为两组,普通重力组和模拟微重力组,经矿化诱导液培养1周后分别将细胞支架复合物移植到裸鼠体内,植入术后4周取材,进行组织学(HE和Vonkossa)和免疫组织化学(DSPP)检测。结果:HE染色均可见有血管生成,Vonkossa染色均为阳性,模拟微重力组DSPP的表达水平明显高于普通重力组(P<0.05)。结论:模拟微重力有利于hDPSCs在裸鼠体内的矿化。
- 徐丹丹李艳萍潘爽张巍巍何丽娜牛玉梅
- 关键词：人牙髓干细胞矿化
- 模拟微重力对人牙髓干细胞细胞骨架及迁移能力影响的研究被引量：2
- 2015年
- 目的:初步研究模拟微重力(simulated microgravity,SMG)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)细胞骨架及迁移能力影响的信号通路机制。方法:采用酶消化法分离培养hDPSCs,并将其接种于PLGA支架上进行模拟微重力培养及普通重力培养。72h后收集细胞,行Realtime-PCR检测LARG(leukemia-associated Rho GEF factor)基因的mRNA相对定量表达;拖拽实验检测RhoA-GTP表达情况;western blot检测RhoA及下游信号分子LIMK-P蛋白表达情况。结果:模拟微重力下培养的hDPSCs细胞LARG基因的mRNA表达下调(P<0.05);微重力下RhoA-GTP、RhoA及LIMK-P蛋白表达均较对照组下调(P<0.05)。结论:模拟微重力下人牙髓干细胞细胞骨架的重排,细胞迁移能力的改变可能与RhoA/ROCK信号通路有关。
- 吴相周潘爽李艳萍何丽娜张巍巍牛玉梅
- 关键词：人牙髓干细胞模拟微重力RHOA迁移
- 模拟微重力环境对人牙髓干细胞体内增殖能力的影响
- 2014年
- 目的:研究模拟微重力环境对聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)支架上人牙髓干细胞(hDPSCs)体内增殖能力的影响。方法:分离、培养hDPSCs并进行鉴定。以PLGA作为支架材料培养人牙髓干细胞,将hDPSCs-PLGA复合物分别在模拟微重力环境和普通重力环境下培养72h,然后移植到裸鼠背部皮下。植入4周后取出组织块,分别进行HE染色、Masson染色、Ki67和I型胶原免疫组化检测。结果:模拟微重力环境下细胞密度、胶原生成量、I型胶原表达量和Ki67阳性细胞数量明显高于普通环境(P<0.01)。结论:模拟微重力环境培养的hDPSCs的体内增殖能力高于普通重力组。
- 王田田张巍巍朱澌洁潘爽何丽娜牛玉梅
- 关键词：人牙髓干细胞模拟微重力增殖
- 整合素α6对模拟微重力下人牙髓干细胞粘附能力的影响被引量：5
- 2016年
- 目的:探究整合素α6对模拟微重力下人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)粘附能力的影响。方法:以PLGA支架为载体,将采用酶消化法培养的hDPSCs接种在PLGA支架上,分普通重力组和模拟微重力组培养72h,Western blot检测整合素α6(Integrinα6)、整合素αv(Integrinαv)、整合素β1(Integrinβ1)、粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、磷酸化粘着斑激酶(phospho-FAK)的达;si-RNA转染hDPSCs,抑制整合素α6表达,DAPI荧光染色检测转染后hDPSCs在PLGA支架上的粘附数量,Western blot检测转染后hDPSCs中整合素β1、FAK、phospho-FAK的表达。结果:模拟微重力下,整合素α6、phospho-FAK蛋白水平上调(P<0.05),整合素αv、整合素β1和FAK的蛋白水平未见显著性差异;si-RNA转染的hDPSCs粘附能力、phosphoFAK蛋白水平均低于对照组(P<0.05),整合素β1和FAK的蛋白水平未见显著性差异。结论:模拟微重力下,hDPSCs在PLGA支架上粘附能力增强可能与整合素α6及其下游信号分子FAK的表达水平上调相关。
- 杨典凇潘爽何丽娜李艳萍张琳牛玉梅
- 关键词：人牙髓干细胞模拟微重力细胞粘附整合素
- Rho激酶抑制剂Y-27632对人牙髓干细胞增殖能力的影响被引量：3
- 2016年
- 目的:初步研究Rho激酶抑制剂Y-27632对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)增殖能力的影响。方法:采用体外贴壁式培养法培养人牙髓干细胞,应用Rho激酶抑制剂Y-27632,根据培养条件,分为普通培养液培养组(Con)及普通培养液+抑制剂Y-27632培养组(Con+Y),采用MTT法检测两种培养条件下人牙髓干细胞培养24、48、72、96h细胞活性;采用DAPI染色法及流式细胞定量检测技术(FCM)比较两组在培养48h的细胞数量及细胞周期分布情况。结果:MTT结果显示,实验组hDPSCs细胞增殖曲线较对照组明显上移,且增殖高峰期提前;培养48h,DAPI染色结果显示,实验组细胞总数量明显多于对照组;FCM结果显示,对照组G0/G1期细胞比例为(66.8±6.84)%,S期细胞比例为(25.17±0.62)%,实验组G0/G1期细胞比例为(58.59±1.76)%,S期细胞比例为(31.34±1.16)%,实验组S期细胞比例明显高于对照组(P<0.05)。结论:Rho激酶抑制剂Y-27632促进人牙髓干细胞DNA合成、细胞分裂及增殖。
- 于天瑶潘爽何丽娜李艳萍张琳牛玉梅
- 关键词：人牙髓干细胞RHO激酶增殖
