国家自然科学基金(30901772)
- 作品数：7 被引量：28H指数：4
- 相关作者：张春智康春生浦佩玉魏厚禄陈步东更多>>
- 相关机构：天津市环湖医院天津医科大学总医院天津医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”天津市科技计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-221与miR-222通过靶基因TIMP3调控胶质瘤细胞侵袭能力被引量：4
- 2011年
- 目的 探讨miR-221和miR-222在胶质瘤细胞侵袭过程中的作用及其机制.方法 采用反义寡核苷酸下调miR-221和miR-222表达,Transwell、Western blot、荧光素酶实验及体内实验分别检测细胞侵袭能力、体内肿瘤生长、相关基因蛋白表达变化及靶基因鉴定.结果 下调miR-221和miR-222表达能明显抑制胶质瘤细胞侵袭能力,同时相关侵袭蛋白MMP2和MMP9表达下降.miRNA靶基因预测软件分析、Western blot、荧光素酶实验证实TIMP3是miR-221和miR-222的靶基因.裸鼠皮下肿瘤模型显示下调miR-221和miR-222表达抑制体内肿瘤生长.免疫组化发现TIMP3表达上调,MMP2和MMP9表达下调.结论 在胶质瘤细胞中,侵袭相关蛋白TIMP3是miR-221和miR-222的一个新靶基因.
- 翟博智张春智韩磊浦佩玉康春生
- 关键词：神经胶质瘤MIR-221MIR-222TIMP3
- 人胶质瘤细胞及组织中miRNA-221、miRNA-222表达变化及意义被引量：5
- 2012年
- 目的观察人胶质瘤细胞及组织中miRNA-221、miRNA-222的表达变化,探讨其与肿瘤放射敏感性的相关性。方法根据Trizol试剂盒说明书,从体外培养的人胶质瘤细胞系U87、U251、A172、LN229和60例胶质瘤组织(手术切除获得)中提取其总RNA,采用RT-PCR法测定miRNA-221及miRNA-222,以正常脑组织为对照。60例胶质瘤患者术后均予以放疗,治疗后MRI检查随访,分析胶质瘤患者的放疗疗效。采用克隆形成实验测算X线照射后(照射剂量为2 Gy)的胶质瘤细胞存活率(SF),以胃黏膜上皮细胞(ges)为对照。结果与对照组织及细胞相比,胶质瘤组织及细胞中miRNA-221、miRNA-222呈高表达(P<0.05),其中高度恶性胶质瘤组织中miRNA-221、miRNA-222均明显高于低度恶性者(P<0.05)。X线照射后胶质瘤细胞SF明显高于ges(P均<0.05),胶质瘤各细胞中miRNA-221、miRNA-222表达量与X线照射后胶质瘤SF呈正相关(r=0.673、0.696,P均<0.01)。胶质瘤组织中miRNA-221、miRNA-222高表达的患者较低表达者生存时间短(P均<0.05)。结论人胶质瘤细胞及组织中miRNA-221、miRNA-222均呈高表达。miRNA-221、miRNA-222表达量与胶质瘤细胞的放射抗性呈正相关关系,胶质瘤组织中miRNA-221、miRNA-222表达量与患者生存时间呈负相关关系。
- 魏厚禄张春智戚贵军姚鑫陈步东孙树鹏王计伟梁思泉杨玉山
- 关键词：颅内肿瘤胶质瘤微小RNA
- 反义miR-221/222上调Cx43恢复人胶质瘤细胞系U251细胞间缝隙连接通讯的体外研究被引量：2
- 2009年
- 目的探讨反义miR-221/222上调缝隙连接蛋白43(Cx43)以恢复人胶质瘤细胞系U251细胞间缝隙连接通讯的作用机制。方法脂质体共转染反义寡核苷酸(AS-miR-221/222),下调U251细胞miR-221和miR-222表达水平,采用Northern blotting法检测U251细胞miR-221和miR-222表达水平;虫荧光素酶活性分析并获得靶基因;Western blotting法和免疫荧光法检测U251细胞Cx43表达水平;划痕标记染料示踪技术检测细胞间缝隙连接通讯。结果 AS-miR-221/222组U251细胞miR-221(t=1312.152,P=0.000)和miR-222(t=1226.031,P=0.000)表达水平明显降低;荧光活性明显高于其他各组(均P=0.000),证实Cx43基因为miR-221和miR-222靶基因;Cx43表达水平亦明显升高,且高于无义序列组(t=735.768,P=0.000)和对照组(t=686.252,P=0.000)。对照组和无义序列组U251细胞细胞间缝隙连接通讯缺失,罗氏黄仅传递划痕细胞边缘单列细胞;AS-miR-221/222组U251细胞细胞间缝隙连接通讯明显恢复,罗氏黄传递至划痕细胞邻近7～8列细胞。结论反义miR-221/222可通过上调Cx43表达水平恢复人胶质瘤细胞系U251细胞间缝隙连接通讯。
- 张春智康春生杨卫东王广秀张安玲浦佩玉
- 关键词：连接蛋白43神经胶质瘤
- 反义miR-221／222抑制Akt通路活性提高胶质瘤细胞放射敏感性的研究被引量：1
- 2012年
- 目的探讨敲低miR-221／222表达抑制Akt通路活性提高胶质瘤细胞放射敏感性的作用。方法脂质体共转染反义寡聚核苷酸（反义miR-221／222）下调胶质瘤U251，LN-229细胞miR-221与miR-222的表达。用Northern印迹方法测定转染后细胞miR-221、miR-222的表达水平；克隆形成实验验证各组胶质瘤细胞的放射敏感性；Western印迹分析各组胶质瘤细胞的pAkt蛋白表达变化；反义miR-221／222联合X线照射治疗裸鼠皮下移植瘤，观察肿瘤生长水平；Real-time PCR检测治疗后miR-221、miR-222的表达；免疫组化分析肿瘤组织中pAkt蛋白表达水平。结果Northern印迹分析显示反义miR-221／222可以有效地敲低胶质瘤细胞的miR-221和miR-222的表达水平。克隆形成实验证实反义mi-221／222联合X线照射可增加胶质瘤细胞放射敏感性。Western印迹分析显示反义miR-221／222可下调pAkt蛋白表达。经反义miR-221／222转染联合X线照射治疗后，裸鼠皮下移植瘤生长明显受抑，肿瘤组织中miR-221／miR-222表达水平下降，pAkt蛋白表达水平也明显降低。结论反义miR-221／222通过抑制Akt通路活性增加胶质瘤细胞的放射敏感性。
- 孙树鹏陈步东张春智王计伟戚贵军魏厚禄梁思泉杨玉山姚鑫
- 关键词：神经胶质瘤蛋白激酶B
- 射波刀治疗颅内恶性肿瘤
- 2011年
- 在脑肿瘤放射治疗的过程中，需要特别关注放射损伤风险，其可能损害正常脑组织，从而造成认知障碍。射波刀对治疗靶的适形性好，且定位准确，因此，可以在分次较少的情况下完成整个治疗。射波刀治疗是迄今为止放射损伤的危险最小的治疗手段，其使得患者的生活质量得到了最大保护。射波刀已被证明了在治疗颅内常见恶性肿瘤性疾病转移瘤方面具有较好的应用价值，但它在治疗颅内恶性胶质瘤方面仍存争议。该文就射波刀在治疗肿瘤上的优势及其在恶性胶质瘤、脑转移瘤中的应用做相关综述。
- 张春智王平
- 关键词：星形细胞瘤脑转移瘤放射外科手术射波刀
- 恶性胶质瘤患者预后与微小RNA-221和微小RNA-222表达的关系被引量：6
- 2012年
- 目的探讨微小RNA（miRNA）-221和miRNA-222表达与胶质瘤病理分级及胶质瘤患者预后的关系。方法收集手术切除的胶质瘤标本120例，病理学分级I级19例、Ⅱ级31例、Ⅲ级38例、Ⅳ级32例；采用实时聚合酶链反应（Real—timePCR）及荧光原位杂交（FISH）法检测miRNA-221和miRNA-222的表达。对进行标准治疗的胶质瘤患者进行4年随访。结果肿瘤病理级别随miRNA-221和miRNA-222表达的升高而增加，组间比较差异有统计学意义（x2=43．53，P〈0．01）；生存时间随miRNA-221和miRNA-222表达升高而减少，各组间差异有统计学意义（x2=55．63，P〈0．01）。结论miRNA-221和miRNA-222的表达与胶质瘤的病理学分级及预后密切相关，可以作为独立的预后因素。
- 戚贵军陈步东张春智魏厚禄姚鑫杨玉山
- 关键词：胶质瘤预后
- 共抑制miR-221/222表达上调PUMA促进胶质瘤U251细胞凋亡的体外研究被引量：11
- 2010年
- 目的 探讨反义miR-221/222上调PUMA表达促进人脑胶质母细胞瘤U251细胞凋亡及其机制.方法 脂质体共转染反义miR-221/222下调U251人脑胶质瘤细胞株miR-221、miR-222的表达.流式细胞术检测转染后U251细胞凋亡变化;Caspase 3/7活性检测转染后U251细胞中Caspase 3的活性;JC-1检测转染后U251细胞线粒体膜电位变化;免疫荧光检测Bax蛋白定位;Western blot分析凋亡相关蛋白的表达变化.结果 流式细胞术显示反义miR-221/222可增加U251细胞凋亡;Caspase 3/7活性检测显示反义miR-221/222可增加U251细胞Caspase 3活性;JC-1检测显示反义miR-221/222可增加U251细胞线粒体膜电位衰减;免疫荧光检测反义miR-221/222可促进Bax蛋白从胞质中向线粒体膜上转移;Western blot显示反义miR-221/222共转染组的PUMA、Caspase 3、Bax蛋白表达明显上调,bc1-2蛋白表达明显下调.结论 反义miR-221/222通过上调PUMA蛋白表达来增加胶质瘤细胞U251的凋亡.
- 张春智康春生杨卫东王广秀贾志凡浦佩玉
- 关键词：MIR-221MIR-222PUMA
