国家自然科学基金(31260345)
- 作品数：5 被引量：8H指数：1
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- 相关机构：海南大学中国科学院北京农学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项公益性行业科研专项更多>>
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- 水稻OsMAPK17-1基因的分离及转基因研究被引量：1
- 2013年
- OsMAPK17-1作为一种MAP激酶,受多种生物和非生物胁迫的诱导,且对病原菌的侵染有一定的防卫作用。为研究水稻OsMAPK17-1基因的功能,通过RT-PCR方法分离OsMAPK17-1基因全长cDNA,分别构建过表达与RNAi植物表达载体,采用农杆菌介导法以粳稻日本晴为受体进行遗传转化,PCR检测具有潮霉素抗性基因的转基因水稻植株,结果表明:OsMAPK17-1基因及RNAi片段均已整合到水稻基因组中。利用PCR和RT-PCR的方法对转基因后代进行筛选,获得过表达和RNAi转基因纯系各1个,模拟干旱处理结果表明,RNAi株系在干旱处理下比对照更有利于根的生长,这些结果为进一步研究OsMAPK17-1基因的功能奠定了基础。
- 肖文芳陈艳汪德锋符秀梅肖晓蓉黎秀琼庞金环陈银华
- 关键词：水稻RNAI载体
- 水稻OsNHO1基因cDNA序列分离及表达分析被引量：1
- 2014年
- OsNHO1是一种甘油激酶,受多种因素的诱导,在植物先天免疫反应中起着重要的作用。笔者采用同源序列法,根据已报道的拟南芥NHO1基因序列结合水稻基因组测序结果,筛选水稻OsNHO1基因,采用RT-PCR获得水稻OsNHO1基因全长cDNA(1 590 bp,529AA),并通过半定量RT-PCR方法分析OsNHO1基因在SA,PXO99刺激下的表达模式,结果显示OsNHO1基因的表达受SA,PXO99的诱导,为进一步研究OsNHO1的具体功能和作用机理奠定了基础。
- 高志亮肖晓蓉陈艳黎秀琼符秀梅林道哲陈银华
- 关键词：白叶枯病非寄主抗性半定量RT-PCR
- 水稻OsCERK2转基因植株的获得及初步分析
- 2013年
- 以水稻粳稻品种日本晴为研究材料,利用拟南芥CERK1的蛋白质序列检索,在水稻基因组候选了与拟南芥CERK1同源的水稻基因OsCERK2,通过RT-PCR分离了该基因的全长cDNA。生物信息学分析显示,OsCERK2是一种含有信号肽的质膜蛋白,胞外结构域含有LsyM基序,激酶结构域含有酪氨酸蛋白激酶结构域。构建了由35S启动子驱动该基因的过表达遗传转化载体和由玉米的泛素基因的启动子驱动的RNA干涉(RNAi)的遗传转化载体,利用农杆菌介导的遗传转化技术,将OsCERK2基因导入水稻,得到T0代转基因植株。对T0代植株进行了PCR检测和半定量RT-PCR检测,获得了OsCERK2有效表达的转基因植株。
- 汪德锋陈艳肖文芳符秀梅肖晓蓉黎秀琼庞金环陈银华
- 关键词：基因分离RT-PCR
- 木薯细菌性枯萎病病原菌的分离与鉴定被引量：6
- 2015年
- 采用组织分离法,从发病的木薯叶片上分离纯化病原菌,对纯化的病原菌进行菌落形态、致病性及生化特性的测定,并采用16S r DNA基因序列进行了分子鉴定和进化分析。结果表明,分离的木薯致病菌为黄单胞菌(Xanthomonas sp.)。
- 任希望梁丽雯王鹤鸣廖华兰林道哲黎秀琼陈银华
- 关键词：木薯细菌性枯萎病病原菌鉴定
- 水稻OsCERK2转基因后代的鉴定与分析
- 2015年
- 为了研究水稻Os CERK2基因的功能,构建了Os CERK2基因过表达和RNAi载体,利用农杆菌介导的遗传转化获得转基因植株,经多代筛选和分子检测,获得了4个超量表达的过表达纯系和2个转录水平下降的RNAi纯系。转基因植株经病原微生物细胞壁成分喷雾处理,采用半定量RT-PCR方法分析转基因植株中病程相关(PR)基因的表达情况,结果发现,诱导后过表达植株中PR基因表达增强,而RNAi植株中表达下降;抗病性鉴定结果表明,过表达转基因植株对白叶枯菌致病小种PXO99的抗性增强,而RNAi植株与野生型差异不显著。结果表明,过量表达Os CERK2基因可能是水稻抗病的有效途径。
- 肖晓蓉苏桐慧廖华兰黎秀琼汪德锋符秀梅陈银华牛晓磊
- 关键词：转基因几丁质植物抗病反应
