国家自然科学基金(30901721)
- 作品数：3 被引量：18H指数：2
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- 相关机构：南方医科大学广东省人民医院广州军区广州总医院更多>>
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- AQP1在维甲酸诱导红白血病细胞红系分化中的作用被引量：2
- 2012年
- 目的建立稳定抑制水通道蛋白1(AQP1)表达的K562细胞株,探讨AQP1在维甲酸(RA)诱导红白血病细胞红系分化中的作用。方法 RA处理K562细胞,通过real-time PCR法检测γ-珠蛋白表达和分光光度法检测血红蛋白的含量研究RA对K562细胞红系分化的影响。Real-time PCR法、蛋白质印迹法检测RA诱导后K562细胞AQP1转录和蛋白表达水平的变化。设计特异AQP1 shRNA序列,构建pSUPER-retro-puro重组质粒转染K562细胞,筛选建立稳定抑制AQP1基因表达的K562细胞株(K562-shAQP1);通过比较K562-shAQP1细胞株与对照组细胞在维甲酸诱导后γ-珠蛋白和血红蛋白的表达,研究AQP1在维甲酸诱导K562细胞红系分化中的作用。结果 RA处理K562细胞后红系分化指标γ-珠蛋白和血红蛋白的表达均明显增加,同时AQP1 mRNA及蛋白表达随RA作用时间显著增加(P<0.01)。pSUPER-retro-puro-shAQP1干扰载体转染K562细胞后AQP1基因在转录和蛋白水平上的表达均被抑制,差异有统计学意义(P<0.01);K562-shAQP1细胞与对照K562细胞相比,在RA诱导后γ-珠蛋白和血红蛋白表达受到不同程度的抑制,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 RA诱导K562细胞红系分化后AQP1表达显著增加,而抑制AQP1基因的表达可部分阻断RA诱导红系分化的作用,说明AQP1在RA诱导K562细胞红系分化过程中发挥重要作用。
- 危敏石嵘姜立王妮莎马文丽
- 关键词：水通道蛋白1维甲酸红系分化SHRNA
- 水通道蛋白1基因过表达对K562细胞红系分化和增殖的影响被引量：6
- 2012年
- 目的:探讨水通道蛋白1(aquaporin-1,AQP1)过表达对人慢性髓细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)K562细胞红系分化和增殖的影响。方法:以人脑cDNA文库为模板,通过PCR扩增出AQP1基因的编码序列,构建pBABE-puro-AQP1真核表达载体;感染K562细胞,筛选建立稳定过表达AQP1基因的K562细胞株(命名为K562-AQP1);实时荧光定量PCR法、细胞免疫荧光染色法及蛋白质印迹法分别检测AQP1转录和蛋白表达水平。通过MTT法检测细胞生长增殖、实时荧光定量PCR法检测γ珠蛋白表达和分光光度法检测血红蛋白含量,研究AQP1过表达对K562细胞红系分化和增殖的影响。结果:与空载体对照组相比,pBABE-puro-AQP1转染入K562细胞后AQP1 mRNA和蛋白表达水平皆有显著升高(P<0.01),K562-AQP1细胞中红系分化指标γ珠蛋白和血红蛋白表达水平明显增加,同时细胞生长速度明显降低(P<0.05)。结论:AQP1过表达可以显著促进K562细胞向红系分化,同时抑制细胞增殖。推测AQP1可能成为临床诱导分化治疗CML的基因靶点之一。
- 危敏姜立王妮莎马文丽
- 关键词：水通道蛋白1细胞分化K562细胞
- 沉默HERC4表达可抑制宫颈癌细胞的增殖、凋亡和迁移被引量：12
- 2017年
- 目的探讨HERC4对宫颈癌细胞生物学功能的影响及其分子机制。方法设计特异HERC4 si RNA干扰序列,Lipofectamine2000法转染Hela细胞,Western blotting检测转染特异si RNA后Hela细胞HERC4蛋白的表达水平;CCK-8法检测转染后Hela细胞的增殖能力;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测转染后Hela细胞凋亡率的变化;划痕实验检测转染后Hela细胞迁移能力。Western blotting检测转染后Hela细胞Cyclin D1、Bcl-2表达变化。结果转染特异si RNA后Hela细胞HERC4蛋白表达量明显下降,差异有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比,干扰组Hela细胞生长速度明显减慢,细胞凋亡率增加,迁移能力明显下降,差异有统计学意义(P<0.01)。转染后Cyclin D1和Bcl-2在蛋白水平的表达显著下调(P<0.01)。结论 si RNA可有效降低宫颈癌Hela细胞中HERC4的表达,并通过抑制Cyclin D1表达抑制宫颈癌Hela细胞的增殖和迁移能力,抑制Bcl-2表达增加细胞凋亡能力。
- 危敏张艳玲陈岚蔡翠霞王涵多
- 关键词：SIRNAHELA细胞细胞迁移
