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国家高技术研究发展计划(2006AA022456)
作品数:
1
被引量:6
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相关作者:
王化磊
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侯小强
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2008
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狂犬病病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立与初步应用
被引量:6
2008年
目的建立狂犬病病毒快速检测法。方法根据狂犬病病毒核蛋白基因的保守序列分别设计两对引物及其相应的TaqMan探针。构建pMD-N重组质粒,建立荧光定量RT-PCR绝对定量标准品,并对反应体系进行优化,建立绝对定量的标准曲线。利用10倍稀释法检验方法的灵敏度并与普通RT-PCR法进行比较;作重复性和特异性检验后进行临床标本的检测。结果构建了绝对定量的参照质粒,标准曲线相关系数为0.998。狂犬病病毒荧光定量RT-PCR检测反应的灵敏度为10个TCID_(50);5种非狂犬病病原体检测均为阴性。结论建立的狂犬病病毒的荧光定量RT- PCR检测方法快速、特异性强、灵敏度高、稳定性好,可以应用于临床样品的检测。
郑学星
杨松涛
侯小强
王化磊
孙培录
刘林立
夏咸柱
关键词:
狂犬病病毒
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