国家高技术研究发展计划(Z19-01-01-03)
- 作品数：2 被引量：17H指数：2
- 相关作者：宫立国邱广蓉孙开来邱广斌贺光更多>>
- 相关机构：中国医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划辽宁省教育厅基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 单纯性先天性心脏病中TBX5基因表达异常的机制被引量：7
- 2009年
- 为探讨人类单纯性先天性心脏病患者中TBX5基因表达下调的可能原因,应用变性高效液相色谱(DHPLC)方法检测100例单纯性先天性心脏病患者中TBX5基因上游1200bp调控区的突变情况;应用甲基化敏感性限制性内切酶(MS-RE)法检测50例单纯性先天性心脏病患者和5例非先天性心脏病患者心肌组织TBX5基因启动子区两个CpG岛(转录起始点上游-49～-188bp和-247～-464bp处)的甲基化情况;应用P-match软件预测小鼠Tbx5基因上游转录因子Nkx2-5的结合位点,构建Nkx2-5表达载体转染小鼠H9C2(2-1)心肌细胞,RT-PCR及Western blotting检测Tbx5基因表达,凝胶阻滞实验(EMSA)验证Nkx2-5和Tbx5基因的作用。结果在100例单纯性先天性心脏病患者中,未检测到TBX5基因上游1200bp调控区突变;非先天性心脏病患者和单纯性先天性心脏病患者在两个CpG岛存在相同的甲基化;小鼠Tbx5基因转录起始点上游-312～-315bp可能存在Nkx2-5的结合位点,转染Nkx2-5表达载体后Tbx5基因在mRNA及蛋白质水平均有表达增高趋势,Nkx2-5在体外可以与Tbx5基因上游-312～-315bp序列相结合。以上结果提示TBX5基因调控区突变和两个CpG岛的甲基化不是单纯性先天性心脏病患者心肌组织中TBX5基因表达下调的原因,TBX5基因表达下调可能由于NKX2-5的表达异常引起。
- 辛娜邱广蓉宫立国徐小延孙开来
- 关键词：先天性心脏病
- 人类单纯性先天性心脏病中TBX5基因的突变及表达研究被引量：10
- 2003年
- 应用PCR DGGE方法在61个单纯性先天性心脏病核心家系共216位成员中检测TBX5基因8个外显子的突变情况;以β actin作为内对照对单纯性先天性心脏病患者(房间隔缺损12例、室间隔缺损16例、法洛四联症6例)和3个非先天性心脏病患者(正常对照)心肌标本进行RT PCR扩增和定量分析,观察TBX5基因在mRNA水平有无差异。研究了人类单纯性先天性心脏病患者中TBX5基因突变及表达情况。在所有被检成员中,未发现突变;与非先天性心脏病患者(正常对照)相比,单纯性先天性心脏病患者TBX5基因mRNA表达呈下降趋势。通过本研究认为TBX5基因编码区突变不是人类单纯性先天性心脏病的致病原因,但其转录水平的异常可能是单纯性先天性心脏病的一种潜在致病机制。
- 宫立国邱广蓉邱广斌贺光孙开来
- 关键词：单纯性先天性心脏病TBX5基因突变心脏发育
