国家自然科学基金(30371086)
- 作品数：12 被引量：55H指数：5
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- 相关机构：苏州大学浙江大学山东农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- DNA分子标记检测家蚕黄海、苏春品种和纯度的研究被引量：7
- 2005年
- 利用单粒卵微量DNA抽提法,从家蚕黄海、苏春及其一代杂交种转青蚕卵快速提取出基因组DNA。筛选出的RAPD随机引物S60稳定扩增出2个原种的DNA特异性片段RH-Ⅰ440和RS-Ⅱ1000,克隆和测序后发现分别为463bp和约938bp。利用网上数据库进行序列分析,RH-Ⅰ440的nt2-462与一个家蚕wholegenomeshotgunsequence(WGS)(No:BAAB01096026.1)的nt1644-2104有96%的一致性,其中存在2个Caps。RS-Ⅱ1000的nt3-935与另一个家蚕WGS(No:BAAB01031489.1)的nt1046-1989有97%的一致性,其中存在13个Gaps。RH-Ⅰ440和RS-Ⅱ1000可以作为两个品种RAPD特征DNA片段进行品种和纯度的鉴定。
- 徐世清陈息林戴璇颖司马杨虎王玉军吴阳春朱端红唐斌
- 关键词：家蚕纯度分子标记DNA分子标记DNA片段基因组DNARAPD
- 蓖麻蚕滞育与过氧化氢代谢的关系被引量：5
- 2006年
- 为了探讨蓖麻蚕滞育的机理，研究了蓖麻蚕蛹H2O2代谢的变化，并比较了在5℃冷藏滞育条件下的差异。结果表明，常温环境蓖麻蚕蛹期的H2O2含量呈减少趋势，第3～5天急速变化，超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性在第5天出现活性峰，故蛹期第3～5天是蓖麻蚕生理变化的一个敏感时期。第3天开始蛹滞育条件5℃冷藏，雄蛹在30d前后、雌蛹在80d左右H2O2含量出现快速改变；SOD和CAT活性一直呈下降趋势，但自30d开始CAT活性出现快速下降过程，5℃冷藏30d是蓖麻蚕蛹H2O2代谢的临界期生理时间，这与蚕蛹的30d冷藏阈值时间吻合。
- 郑必平徐世清徐孟奎陈息林赵林川
- 关键词：蓖麻蚕滞育过氧化氢超氧化物歧化酶过氧化氢酶
- 野桑蚕铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆分析与原核表达被引量：9
- 2007年
- 超氧化物歧化酶是野桑蚕保护酶体系的重要酶类。利用RT-PCR方法克隆出野桑蚕铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)cDNA(EMB I登陆号:AM410997),其开放阅读框ORF长465 bp,编码154个氨基酸。同源性及系统进化分析表明,推导出的氨基酸序列与3种果蝇的同源性平均为69.3%,与线虫为57%,各物种中与Cu/Zn结合的残基高度保守。利用ExPASy的ScanProsite以及PSort和TMpred对此编码的蛋白质结构和功能域分析,预测出其具有2段Cu/Zn-SOD特异序列,且该蛋白不存在信号肽以及跨膜区。将Cu/Zn-SOD cDNA克隆到pET-28 a(+)表达载体,测序鉴定后以IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳鉴定其表达的融合蛋白质分子量为19.4 kD。
- 丛海峰徐世清司马杨虎张升祥王更先董航刘莹柳学广
- 关键词：野桑蚕铜锌超氧化物歧化酶原核表达
- 采种环境对家蚕越年卵催青期过氧化氢代谢的影响被引量：4
- 2005年
- 家蚕卵内过氧化氢代谢变化与蚕卵所处环境密切相关。采种室空气污染环境中所产蚕卵,越年催青过程中H2O2代谢水平与对照仍然有明显差异,H2O2含量在胚胎发育中期开始显著高于对照,CAT和SOD活性在前期和中期高于对照,孵化前夕则没有对照区活性快速升高的现象,甚至出现活性下降,孵化率也显著低于对照。而高温与低温环境所产蚕卵,越年催青期H2O2含量、SOD活性和CAT活性的变化趋势与对照十分接近,孵化成绩与对照的差异也不明显。
- 徐世清蒋龙元戴璇颖郑必平陈息林徐永平
- 关键词：催青期采种家蚕卵家蚕孵化成绩CAT活性
- 20-羟基蜕皮酮对小鼠生长发育的影响
- 2006年
- 徐世清戴璇颖郑必平司马杨虎杨敏夏晔华
- 关键词：小鼠20-羟基蜕皮酮发育
- 家蚕的半活化胚现象初探被引量：7
- 2003年
- 滞育是家蚕的生理现象 ,家蚕滞育卵的活化处理是养蚕生产上重要的技术操作。研究了家蚕盐酸处理卵、复式冷藏卵和长期保存卵的胚胎活化过程 ,认为家蚕胚胎除滞育态和活化态以外 ,还存在半活化状态。半活化胚胎的形态与萌动期 (乙 1)至反转期 (己 1)的活化胚相似 ,但胚胎整体发育不平衡 ,后部发育慢于前部 ,在 2 5℃、RH 75 %～ 85 %催青环境中的发育速度明显慢于活化胚 ,而越接近反转期发育速度越接近活化胚。同一群体内出现的半活化胚胎之间发育比较整齐 ,而不同群体的半活化胚胎之间发育有一定差异。活化刺激量越大 ,出现的半活化胚胎发育越快。
- 徐世清陈息林司马杨虎
- 关键词：家蚕滞育活化处理盐酸处理
- SCAR分子标记方法检测家蚕品种和纯度的研究被引量：3
- 2007年
- 【目的】家蚕(Bombyx moriL.)品种和纯度的鉴别,普遍依靠幼虫斑纹或茧形等形态鉴别方法,该方法易受环境影响,结果时效性和准确性差。【方法】筛选RAPD随机引物,稳定扩增出亲本品种的DNA特异性片段,转换成SCAR标记。【结果】利用微量DNA抽提法,从家蚕主要品种苏5、苏6及其F1孵化前日卵快速提取单粒卵基因组DNA,筛选出RAPD随机引物S42,稳定扩增出苏5和苏6两个亲本品种的DNA特异性片段R5和R6,克隆和测序确认其大小分别为255bp和343bp。Blastn分析显示,R5的nt7～192与家蚕的一个非长末端逆转录转座子(AB002270.1)的nt183～368片段碱基序列有高达91%的相似性,无缺口序列。R6的nt5～340与家蚕的一个WGS(BAAB01113163.1)的nt675～337有91%的一致性,其中存在13个碱基的缺口序列。将2个亲本的RAPD标记转换成SCAR标记,分别利用合成的S42-255-2(P5-2)和S42-343-2(P6-2)SCAR标记引物,能够准确、快速地鉴别所标记的苏5和苏6及其F1蚕品种。【结论】SCAR分子标记方法能够检测家蚕品种和纯度。
- 唐斌徐世清戴璇颖陈息林司马杨虎王玉军吴阳春
- 关键词：家蚕分子标记SCAR纯度
- 家蚕卵温汤处理酯酶A4的活性变化被引量：4
- 2004年
- 温汤孵化法是一种重要的家蚕卵人工孵化方法。酯酶A4 (EsteraseA4 ,EA4 )是家蚕卵的滞育生物钟蛋白质。将家蚕C10 8品种卵温汤处理 ,纯化出EA4 ,测定了EA4的ATP酶 (ATPase)活性变化。结果显示 :产卵后 15h(2 5℃ )的温汤处理蚕卵 ,其EA4的ATP酶最大活性 ,体外 5℃或 2 5℃条件下 ,分别出现在处理后 2 4h或 1.5h ,蚕卵也随即解除滞育 ,获得孵化能力 ;产卵后 30h(2 5℃ )的温汤处理蚕卵 ,其点青卵率随温汤刺激量增大而提高 ,点青时间随刺激量增大而缩短 ;蚕卵EA4的ATPase最大活性出现时间也随温汤刺激量增大而提前 ;且温汤处理蚕卵EA4的活性变化与蚕卵活化有高度相关性。
- 徐世清司马杨虎陈息林戴璇颖
- 关键词：家蚕温汤处理酯酶A4活性人工孵化滞育
- 家蚕丝蛋白生物材料新功能的开发及应用被引量：17
- 2006年
- 家蚕丝蛋白质是一种具有良好透气与透湿性、无毒、无刺激、与人体相容性强的生物材料。文章总结了家蚕丝蛋白作为人造皮肤、血管、肌腱、韧带、骨骼和牙齿等人造组织材料,以及作为手术缝合线、隐形眼镜、角膜、抗血凝剂、药物控释材料、功能性细胞培养基质、固定化酶载体和生物传感器等生物医学材料的功能开发和应用进展,还总结了家蚕丝蛋白质在环保新材料、化妆品、保健营养食品等日化和环保领域的功能开发和应用方法。分析认为,由于家蚕基因组研究工作的重大成果,以及基因工程和生物技术的快速进步,家蚕丝蛋白质的生物功能有望在军事、航天、医学、环保等领域得到更深、更广地开发和应用。
- 王玉军柳学广徐世清
- 关键词：桑蚕丝蛋白生物材料
- 家蚕生物钟蛋白TIME-EA4的进化踪迹分析被引量：1
- 2014年
- 家蚕是卵滞育性鳞翅目模式昆虫,其滞育卵的活化与生物钟蛋白TIME-EA4密切相关。TIME-EA4具备稳定的Cu/Zn SOD活性和瞬时的ATP酶活性。目前,国内外关于家蚕TIME-EA4的研究主要集中在结构和功能上,其分子进化机制研究尚未开展。本文利用生物信息学方法对TIME-EA4进行了进化踪迹分析,结果显示TIME-EA4的重要氨基酸残基(coverage<25%)的91.2%都用来维持与Cu/Zn SOD的序列一致性,但TIME-EA4与Cu/Zn SOD的Cu/Zn离子结合位点在氨基酸残基组成、极性、绑定原子方面都存在差异。
- 王文栋徐世清
- 关键词：家蚕生物钟生物信息学分子进化
