国家自然科学基金(30672175)
- 作品数：9 被引量：24H指数：3
- 相关作者：刘月明刘漪沦刘海荣杨汀孙静更多>>
- 相关机构：成都医学院第一附属医院成都医学院郑州市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省卫生厅科研基金四川省教育厅重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- EOLA1与MT2A相互作用及其上下游关系的确定被引量：1
- 2015年
- 目的研究内皮细胞高表达脂多糖相关因子1（EOLA1）与金属硫蛋白2A（MT2A）的相互作用关系,明确其相互作用位点及上下游关系。方法构建EGFP-EOLA1融合表达载体,转染HUVEC细胞,应用免疫荧光共定位成像技术观察EOLA1和MT2A在HUVEC中的共定位情况;应用截短突变和酵母双杂交确定EOLA1和MT2A的相互作用位置;应用RNAi技术建立EOLA1/MT2A上调和下调的HUVEC细胞模型,观测模型细胞EOLA1/MT2A的表达情况。结果 EOLA1和MT2A在HUVEC中存在共定位现象,共定位主要发生在核膜周围;酵母双杂交和免疫共沉淀实验结果显示,EOLA1的截短突变体1~77氨基酸（aa）片段和MT2A无结合活性,1~115aa片段及1~158aa片段和MT2A有结合活性。EOLA1上调/下调表达时MT2A同时相应上调/下调表达,MT2A的上调和下调表达对EOLA1表达无明显影响。结论 EOLA1和MT2A在HUVEC细胞内存在相互作用,相互作用位点位于EOLA1ORF的100~113功能域,EOLA1可以调控MT2A在HUVEC中的表达。
- 刘月明刘海荣杨汀陈文海张玮刘漪沦
- 关键词：内毒素蛋白质相互作用
- 金属硫蛋白2A重组质粒的构建及其在血管内皮细胞中的表达
- 2015年
- 目的建立人血管内皮细胞金属硫蛋白2A(MT2A)上调表达细胞模型。方法构建重组质粒pEGFP-N1-MT2A,转染至人脐静脉内皮细胞(HUVECs),荧光显微镜观察转染效果,RT-PCR及蛋白印迹法测定细胞MT2A表达水平。结果测序证实pEGFP-N1-MT2A重组质粒构建正确,转染至HUVECs后,通过RTPCR蛋白印迹实验证实细胞MT2A表达水平升高。结论成功构建了重组质粒pEGFP-N1-MT2A,转染至HUVECs可使MT2A表达水平升高。
- 杨汀刘海荣李家丽刘月明
- 关键词：重组质粒HUVECS
- 纤维喉镜在成批吸入性损伤患者早期诊治中的应用被引量：1
- 2012年
- 在吸入性损伤的救治中，早期准确的伤情判断非常重要，需依据患者的临床表现和x线片检查、纤维支气管镜检查、呼吸功能测定及血气分析等相关检查结果来判定[1-2]。对于可能存在吸入性损伤的成批患者而言，短时间内完成这些检查是不现实的，需用更方便快捷的方法进行诊断。
- 刘月明刘海荣刘漪沦牛希华娄季鹤张业龙
- 关键词：吸入性损伤早期诊治伤患者纤维喉镜纤维支气管镜检查伤情判断
- 大黄素对增生性瘢痕成纤维细胞的作用被引量：8
- 2014年
- 目的探讨大黄素对增生性瘢痕成纤维细胞(HSFs)的作用及其机制。方法分别以终浓度为0,20,40,80μmol·L-1的大黄素处理HSFs,以MTS法检测细胞活力,以Annexin V、碘化丙啶双染法行流式细胞仪检测,以Western blot法检测细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及其磷酸化蛋白、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、髓样细胞白血病-1(Mcl-1)、受体相互作用蛋白激酶1(RIP1)的表达。结果大黄素对HSFs的增殖活力有抑制作用,且呈剂量依赖性;HSFs在终浓度为40,80μmol·L-1大黄素作用48 h后死亡率分别为28.6%,68.0%(P<0.01),以泛caspase抑制药Z-VAD-FMK预处理能够部分降低大黄素所致细胞死亡率(P<0.05);大黄素能够抑制ERK磷酸化、Mcl-1和RIP1的表达。结论大黄素能够抑制HSFs的增殖活力、诱导细胞死亡,其机制可能与其抑制ERK1/2磷酸化及Mcl-1、RIP1蛋白表达有关。
- 刘漪沦邓峰美刘卫华罗永慧赵宁宁刘海荣刘月明王航宇
- 关键词：大黄素成纤维细胞细胞死亡
- 增生性瘢痕形成过程中组织谷胱甘肽和辅酶Ⅱ含量变化研究
- 2012年
- 目的探讨瘢痕增生过程中氧化还原状态的动态变化情况。方法对正常皮肤、伤后2周组织（早期组）、伤后1个月组织（中期组）和伤后6个月组织（成熟期组）中的氧化型与还原型谷胱甘肽（GSSG、GSH）、氧化型与还原型辅酶Ⅱ（NADP^＋、NADPH）含量进行测定，计算还原型与氧化型的比值，分析氧化还原状态的变化。结果各个时期烧伤组织中GSSG、GSH、NADP^＋、NADPH的含量均高于正常皮肤组（P〈0．05）；不同阶段烧伤组织中GSSG、GSH、NADP^＋、NADPH的含量随时间延长而下降，各组之间各项指标差异有统计学意义（P〈0．05）；早期组GSH／GSSG明显低于其余各组，其余各组间GSH／GSSG、NADPH／NADP^＋的值，其差异无统计学意义（P〉0．05）。结论组织微环境内高氧化还原状态可能是病理性瘢痕发生机制中的一个重要环节，随着瘢痕的成熟其组织内的氧化还原水平下调，但仍高于正常皮肤组织的氧化还原水平。
- 刘月明刘海荣刘漪沦张业龙牛希华
- 关键词：瘢痕氧化还原状态谷胱甘肽
- 基因转染猪皮在老年顽固性皮肤溃疡自体皮片移植中的应用被引量：3
- 2007年
- 目的:观察基因转染猪皮在老年顽固性皮肤溃疡自体皮片移植中的干预效果。方法:选择2002-01/2006-10在成都医学院第一附属医院应用基因转染猪皮处理的老年顽固性皮肤溃疡患者20例,均知情同意。简单清创后应用基因转染猪皮(购自重庆宗申军辉生物技术有限公司,为新鲜制备全厚猪皮,然后冻存于液氮中备用,厚度为2.0～3.0mm,规格分为100mm×100mm,100mm×20mm,200mm×400mm等,存储和运输均在液氮中进行,使用前用40℃水复温)覆盖创面,培养新鲜肉芽组织,创造手术条件,后期行自体皮片移植术治疗。结果:患者全部治愈出院,其中4例出院后植皮区破溃,门诊换药数次后愈合。所有患者在治疗过程中未发生严重并发症,供皮区愈合良好,未遗留瘢痕。20例患者有16例用转基因猪皮处理创面1次,4例患者用转基因猪皮处理两次后行自体游离皮片移植,皮片成活率为90%～100%。结论:应用基因转染猪皮处理顽固性皮肤溃疡创面能有效提高自体皮移植成活率,可以提高老年顽固性皮肤溃疡的治愈率。
- 刘月明陈光秀马兵
- 关键词：皮肤溃疡皮肤移植外科皮瓣转染
- 病理性瘢痕谷胱甘肽和辅酶Ⅱ含量测定及其意义被引量：1
- 2009年
- 目的了解病理性瘢痕中氧化还原状态的变化。方法对正常皮肤、增生性瘢痕、瘢痕疙瘩组织中的氧化型与还原型谷胱甘肽（GSSG、GSH）、氧化型与还原型辅酶Ⅱ（NADP＋、NADPH）含量进行测定，计算还原型与氧化型的比值，分析氧化还原状态的变化。结果增生性瘢痕组和瘢痕疙瘩组组织中GSSG、GSH、NADP＋、NADPH的含量均高于正常皮肤组（P〈0．05），增生性瘢痕组和瘢痕疙瘩组之间各项指标差异均无统计学意义（P〉0．05），各组GSH／GSSG比值、NADPH／NADP＋比值差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论组织微环境内氧化能力的提高，可能是病理性瘢痕发生机制中的一个重要环节；病理性瘢痕组织中，很有可能发生了氧化还原系统的代偿性再平衡。
- 刘漪沦刘月明孙静文科
- 关键词：增生性瘢痕瘢痕疙瘩氧化还原状态谷胱甘肽
- 内毒素耐受形成过程中TLRs信号通路的作用及其调控被引量：5
- 2015年
- 内毒素耐受是指脂多糖(LPS)刺激后,机体或细胞对后续刺激反应性降低的一种现象。Toll样受体(TLR)参与了LPS信号的跨膜转导。TLRs信号转导通路在内毒素耐受发生中发挥了重要作用,其通过改变信号蛋白和下游细胞因子的结构和功能,导致炎性因子释放减少。丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)及IL-1受体相关激酶(IRAK)家族成员、细胞膜表面的清道夫受体SR-A、TLR4同源体RP-105、细胞因子信号抑制物(SOCS)等均可参与TLRs信号转导通路的调控。miRNA作为小分子非编码RNA,通过作用于炎症信号传导通路调控内毒素耐受的发生发展,同时可调控免疫反应和炎性因子表达。关于miRNA在内毒素耐受调控中的作用的研究较多。在TLRs信号转导通路中产生调控作用的miRNA主要有miRNA-155、miRNA-146、miRNA-98、miRNA-125b和let-7e,具体作用机制有待进一步探索。
- 杨汀刘海荣李家丽刘月明
- 关键词：内毒素耐受信号通路TOLL样受体
- 氧化还原状态与细胞信号传导被引量：5
- 2009年
- 细胞内氧化还原状态的变化决定着氧化还原反应的发生方向,并通过一定的机制进行制衡。细胞膜以及细胞内分子的氧化或还原反应,导致发生结构或构象的改变,在细胞的信号转导、基因转录等过程中发挥重要的调控功能,对细胞生命活动产生着重要的影响。酪氨酸蛋白激酶与磷酸酶、丝苏氨酸激酶与磷酸酶、磷脂酶及其代谢产物、钙离子等重要信号分子可通过氧化还原反应介导细胞信号的传导。细胞内这种氧化还原-信号传导体系受到复杂而灵敏的调控。目前在分子水平上进一步认识氧化还原状态对细胞调控的机制具有重要的意义。
- 刘漪沦孙静刘月明
- 关键词：氧化还原状态细胞信号传导
