北京市自然科学基金(5053028)
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
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- 相关机构：军事医学科学院华中农业大学中华人民共和国农业部更多>>
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- 猪内源性反转录病毒5′非编码区启动子活性的分析被引量：1
- 2007年
- 【目的】构建以缺失不同功能区的猪内源性反转录病毒(PERV)5′非编码区(5′UTR)为启动子的萤光素酶表达载体,分析5′UTR的转录调控规律。【方法】将含有不同功能域的PERV的UTR克隆至萤光素酶表达载体上,转染瞬时表达细胞Cos-7,检测萤光素酶的表达。【结果】缺失R区的5′UTR显示出很强的启动子活性,U3重复区序列缺失的5′UTR启动子活性显著下降。UTR显示出较之LTR强的启动子活性。缺失整个U3区的UTR比仅缺失U3重复区的UTR启动子活性强。【结论】在R区有转录因子的结合位点可引起转录活性下降;U3重复区序列表现出增强子的活性。在5′UTR的下游序列中,包括引物结合区(PBS)和前导序列(Leader)可能有某些转录因子的结合位点引起转录增强,同时在U3重复区的上游和下游序列可能存在某些转录因子的结合位点可减少5′UTR的转录活性。
- 丁芳吕茂民马玉媛吴健敏田克恭毕丁仁章金刚
- 关键词：猪内源性反转录病毒启动子活性
- 我国小型猪内源性反转录病毒的相关研究
- 随着移植医学和免疫学研究的进展,也由于人源供体器官的短缺,猪被选定为最合适的异种移植供体。现今,猪心脏瓣膜已成功地移植入人体内,猪皮肤已作为烧伤病人的暂时覆盖物,猪胰岛细胞已被植入糖尿病人体内,猪→人异种移植已展现出十分...
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- 文献传递
- 反转录病毒基因治疗载体及其安全性评价被引量：2
- 2007年
- 反转录病毒载体是目前基因治疗中应用最广泛的基因运载工具之一,具有能稳定整合入宿主细胞、持久表达目的基因、感染细胞范围广、基因容量较大等优点,但其生物安全性还存在争议。在简要介绍反转录基因治疗病毒载体的基础上,对反转录病毒载体中外源目的基因的表达调控及反转录病毒载体的安全性评价进行了综述。
- 徐述马玉媛吕茂民史利军章金刚
- 关键词：基因治疗反转录病毒载体基因表达调控安全性评价
- 中国五指山猪内源性反转录病毒5′LTR启动子活性分析
- 猪内源性反转录病毒(PERV)属反转录病毒科哺乳动物C型反转录病毒属成员,是以前病毒 DNA形式整合于宿主细胞基因组中,并随细胞染色体复制而复制的内源性病毒。由于其在体外能够感染多种人源细胞,这引起了人们对猪→人异种移植...
- 丁芳吕茂民马玉媛吴健敏章金刚
- 文献传递
- 系列功能区缺失的猪内源反转录病毒5′非编码区的构建及序列分析被引量：2
- 2007年
- 为构建缺失不同功能区的猪内源性反转录病毒(PERV)5′非编码区(5′UTR)克隆,分析5′UTR的转录调控规律,以质粒WZSP-293-5′UTR为模板,应用重组PCR方法分别扩增5′UTR与缺失引物结合区及前导序列(PBS-Leader),即5′UTR(5′长末端重复区)、U3区、R区、U3区中重复序列的5′UTR等5种PCR片段,并分别将其克隆至T载体上,挑取阳性克隆,酶切鉴定插入方向,选择正确方向插入的克隆,测序并进行序列分析。结果表明,构建了系列功能区缺失的5种5′UTR克隆,分别命名为UTR-PMD、LTR-PMD、UTR-U3-PMD、UTR-R-PMD、UTR-U-PMD以备后用。结论:在PERV 5′UTR的不同功能区中含有一系列可能的转录因子结合位点;中国五指山猪内源性反转录病毒(WZSP-PERV)在293细胞中传代时,不仅U3重复区数目增加,重复亚型也发生了一定的改变。
- 丁芳吕茂民马玉媛吴健敏田克恭毕丁仁章金刚
- 关键词：猪内源性反转录病毒克隆
