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国家自然科学基金(30770868): 作品数：18 被引量：62H指数：5; 相关作者：廖端芳庹勤慧郭紫芬朱炳阳何淑雅更多>>; 相关机构：南华大学湖南中医药大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划湖南省重点学科建设项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

MDM2对DAXX泛素化影响的研究进展: 2013年; 小鼠双微体基因（murinedoubleminute2，MDM2）为凋亡抑制家族（IAP）新成员，是迄今为止发现最强的凋亡抑制因子，在人类大多数肿瘤组织中都有表达。Fas死亡结构域相关蛋白（Fasdeathdomain—associatedprotein，DAXX）是一种高度保守的核蛋白，在细胞凋亡和转录调控中发挥重要作用。大量文献显示MDM2有可能通过调节DAXX泛素化和稳定性参与到DAXX对细胞凋亡和基因转录的调控中。; 张燕李天平彭鹏廖端芳庹勤慧; 关键词：RASSFLA ATM DNA损伤泛素化

microRNA在血管疾病和血管新生中的作用: 2009年; 凌宏艳欧和生刘刚朱炳阳廖端芳; 关键词：MICRORNA 血管疾病血管新生

抗人血管内皮细胞膜蛋白单克隆抗体的制备与鉴定被引量：1: 2008年; 目的研制特异性抗人血管内皮细胞膜蛋白的单克隆抗体,为深入研究血管内皮细胞的功能及血管内皮细胞与疾病的关系提供基础。方法以血管内皮细胞株为免疫原直接免疫Balb/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术,通过细胞酶联免疫吸附试验筛选分泌抗人血管内皮细胞膜蛋白的特异性单抗的阳性克隆后,将杂交瘤细胞株腹腔注射Balb/c小鼠诱生腹水。腹水中的单抗用蛋白质G琼脂糖凝胶-4B柱亲和层析纯化后,采用酶联免疫吸附试验、流式细胞术、免疫组织化学染色法及免疫印迹法对其特异性进行鉴定。结果获得了一株可稳定分泌抗人血管内皮细胞膜蛋白单抗的杂交瘤细胞株。特异性单抗NH-2亚型为IgG1,腹水NH-2效价为1×10-6,含量为18.82g/L。NH-2与人血管内皮细胞株和原代培养的人脐静脉内皮细胞均有特异性结合,并可识别细胞裂解液还原条件下相对分子量为40kDa左右的蛋白多肽。NH-2对相应抗原具有高度的细胞特异性及组织特异性,在体内与正常组织的交叉反应少。结论成功制备了抗人血管内皮细胞膜蛋白的单抗,在血管内皮细胞的生物学功能及临床意义研究方面将具有潜在的应用价值。; 郭紫芬陈成立周翠兰郭玉涂剑廖端芳; 关键词：药理学单克隆抗体血管内皮细胞膜蛋白

Cyclophilin A通过调控炎症/免疫反应介导动脉粥样硬化被引量：5: 2009年; 廖端芳庹勤慧郭琰Berk B C; 关键词：CYCLOPHILIN 炎症反应 CD4^+T细胞动脉粥样硬化

Cyclophilin A触发荷脂细胞免疫反应与胆固醇跨膜转运的关系被引量：1: 2009年; 郭紫芬廖端芳; 关键词：亲环素A 免疫调节胆固醇转运

利用hTM表达细胞株制备抗人血栓调节蛋白单克隆抗体被引量：2: 2009年; 为了研制抗人血栓调节蛋白(hTM)的单克隆抗体(mAb),给经CHO细胞免疫的BALB/c小鼠腹腔注射环磷酰胺诱导其对CHO和CHO-TM5细胞的共同抗原表位产生免疫耐受,再用高效表达hTM的CHO-TM5常规免疫小鼠.细胞融合后,ELISA筛选分泌抗hTM的特异性mAb阳性克隆,并将其腹腔注射BALB/c小鼠诱生腹水.腹水中的mAb经亲和层析纯化后,采用ELISA、流式细胞术、免疫组织化学染色法及Westernblotting对其进行特异性鉴定.结果显示,共获得了5株阳性克隆,其中2F7可稳定分泌IgG1亚型的mAb,腹水抗体效价为1×10-6,含量为19.56g/L.2F7在体内与正常组织的交叉反应极少,对HUVEC、CHO-TM5有特异性结合,并可识别细胞裂解液还原条件下分子质量为105ku左右的蛋白质多肽.2F7的解离常数Kd约为1.22×10-9mol/L.实验结果表明,通过采用新的技术路线,直接应用hTM表达细胞株免疫小鼠,成功制备了具有高度特异性与高亲和力的抗hTMmAb,为其他来源困难的蛋白质mAb制备提供了可借鉴的技术方案,同时2F7的研究鉴定为进一步应用抗hTMmAb进行hTM生物学功能及临床意义研究提供了新的物质基础.; 郭紫芬何淑雅朱炳阳李斌元廖端芳; 关键词：免疫耐受环磷酰胺血栓调节蛋白单克隆抗体

稳定高效表达人血栓调节蛋白的CHO细胞株的建立: 2008年; 目的:构建稳定高效表达人血栓调节蛋白(human thrombomodulin,hTM)的CHO细胞株,以便于大量生产纯化hTM蛋白。方法:利用脂质体li-pofectamine 2000将包含hTM基因全长序列的重组表达质粒pThr402转染CHO细胞。转染后用G418的选择性培养液筛选、挑取抗性克隆。采用流式细胞术和Western blotting检测hTM在CHO细胞膜表面的表达情况,筛选建立稳定高效表达hTM的CHO细胞株并对其稳定性进行观察。结果:重组表达质粒pThr402转染CHO细胞后,流式细胞术证实hTM稳定高效表达于随机挑选的5个抗性克隆细胞株的细胞膜表面,但表达量有差异。Western blotting分析检测显示hTM表达量较高的CHO-TM1、CHO-TM4与CHO-TM5细胞株的细胞裂解液出现了与预期值相符的约105000的特异性条带。CHO-TM5已经经过冻存复苏前后各20次传代,且无论有无G418选择压力存在,hTM表达水平无明显差异。结论:成功构建了稳定高效表达hTM的CHO细胞株,可望获得大量蛋白,为进一步研究hTM的生物学功能以及制备和筛选抗hTM的单抗开辟新的途径。; 郭紫芬何淑雅周翠兰廖端芳; 关键词：CHO细胞稳定转染

PI3K信号通路介导apelin-13促进单核细胞-血管内皮细胞黏附的研究(英文)被引量：6: 2011年; 本室以前已经报道G蛋白偶联受体APJ的内源性配体多肽apelin-13促进单核细胞-血管内皮细胞黏附,本文研究PI3K信号途径是否参与apelin-13促进单核细胞-血管内皮细胞黏附,探讨apelin/APJ系统的细胞信号转导机制.MPO方法检测细胞黏附;Western blot方法检测PI3K、VCAM-1的表达.Western blot方法结果显示,apelin-13(0、0.5、1、2、4μmol/L)浓度依赖性刺激血管内皮细胞PI3K磷酸化,以1μmol/L最为明显;1μmol/L apelin-13时间依赖性促进血管内皮细胞PI3K磷酸化,在30 min增加最为显著;PI3K抑制剂LY294002明显抑制apelin-13诱导的VCAM-1表达和单核细胞-血管内皮细胞黏附.上述结果表明,PI3K信号途径介导apelin-13促进单核细胞-血管内皮细胞黏附.; 毛小环苏桃张先慧李芳秦旭平廖端芳李兰芳陈临溪; 关键词：APJ PI3K 血管内皮细胞单核细胞

Preparation of Anti-hTM Monoclonal Antibody by Using hTM Expression Cell Line: ＜正＞To produce monoclonal antibody（mAb）specifically against human thrombomodulin（hTM）, an immune-tolerizing pro...; GUO Zi-fen~(1)),HE Shu-ya~(2)),ZHU Bing-yang~(1)),LI Bin-yuan~(2)),LIAO Duan-fang~(1)**) (~(1))Institute of Pharmacy and Pharmacology,University of South China,Hengyang 421001,China; 文献传递

尼曼-匹克C1型类似蛋白1介导依泽替米贝对RAW264.7细胞脂质蓄积的抑制作用被引量：5: 2009年; 目的观察肠道胆固醇吸收抑制剂依泽替米贝(ezetimibe)对RAW264.7细胞源性荷脂细胞脂质蓄积的影响并对其机制进行初步探讨。方法采用油红O染色、高效液相色谱法检测细胞内脂滴数量和细胞内脂质含量,Western blot对NPC1L1(Niemann-Pick type C1Like-1)进行定性和半定量检测。结果RAW264.7细胞中有NPC1L1蛋白表达。不同浓度(0、0.003、0.01和0.03mol.L-1)依泽替米贝预先孵育RAW264.7细胞24h或最佳浓度(0.03mol.L-1)预先孵育不同时间(0、6、12和24h)后,换50mg.L-1oxLDL继续孵育24h,结果显示不同浓度ezetimibe预先孵育后,细胞内脂滴数量与面积随着浓度的增加而逐渐减少;Ezetimibe预先孵育可减少细胞内脂质蓄积,并呈浓度和时间依赖性。其中0.03mol.L-1ezetimibe预先孵育24h组作用最明显,CE百分比较oxLDL单独孵育组减少了约47%±0.1%。结论小鼠源性巨噬细胞RAW264.7中存在NPC1L1蛋白表达;依泽替米贝能够减少RAW264.7细胞中NPC1L1蛋白表达;依泽替米贝抑制RAW264.7细胞中脂质蓄积。; 李靓袁皓愉唐振旺于伟霞谢志忠庹勤慧廖端芳; 关键词：依泽替米贝巨噬细胞脂质蓄积

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