国家自然科学基金(31260424) 作品数:7 被引量:9 H指数:2 相关作者: 陈绵才 王会芳 赵志祥 符美英 芮凯 更多>> 相关机构: 海南大学 海南省农业科学院 海南省农业科学院农业环境与植物保护研究所 更多>> 发文基金: 公益性行业(农业)科研专项 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
植物寄生线虫Hsp70研究进展 被引量:3 2013年 热激蛋白70(heat shock protein 70,Hsp70)是所有原核生物和真核生物在发育过程中为了适应不同环境而合成并起关键作用的蛋白质家族。多种植物寄生线虫编码的Hsp70基因序列己被克隆和检测,但其在应激反应中线虫与寄主植物的互作机制仍不是很清楚。本文对Hsp70家族的分类、Hsp70结构及其生物学功能进行了综述,从Hsp70基因的克隆、表达和系统进化介绍了植物寄生线虫Hsp70基因的研究进展,并就今后植物寄生线虫Hsp70的相关应用基础研究进行了展望。 练冬梅 王会芳 陈绵才关键词:HSP70 HSP70基因 植物寄生线虫 杀象耳豆根结线虫Pro-21fa6克隆子产活性蛋白酶研究 2015年 本文提取土壤样品总DNA,以Fosmid为载体,构建宏基因组文库。以脱脂奶为底物,象耳豆根结线虫为靶标,筛选杀象耳豆根结线虫的产蛋白酶基因克隆子。以克隆子Pro-21fa6为研究对象,从酶活、蛋白含量变化、p H变化对发酵过程进行了研究。结果表明,构建31 104个克隆子,库容1.067 Gb,获得产蛋白酶阳性克隆子111株,其中9株对象耳豆根结线虫具有毒杀作用,Pro-21fa6克隆子毒杀效果最好。培养条件温度35℃、转数200 r/min、以及脱脂奶与诱导剂共同作用可以使酶活提高,是基础培养基的1.33倍。Pro-21fa6蛋白酶克隆子初步研究,为蛋白酶基因基因片段亚克隆、测序、活性蛋白酶分离纯化奠定了基础。 张怀军 赵志祥 陈绵才关键词:基因组文库 FOSMID文库 象耳豆根结线虫 2个根结线虫种群鉴定及致病性研究 2017年 采用雌虫会阴花纹形态观察比较、EST同工酶图谱分析以及与mt DNA-PCR分子技术相结合的方法,将来自海巴戟的2个根结线虫种群万宁种群和定安种群鉴定为花生根结线虫,酯酶分别为A2、A1;通过盆栽接种测定了这2个根结线虫种群对32种农作物的致病性。试验结果表明,定安种群的致病性比万宁种群强,且寄主范围比万宁种群广。 符美英 王会芳 芮凯 曾向萍 严婉荣 陈绵才关键词:根结线虫 象耳豆根结线虫Hsp70基因相关功能分析 象耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii)是世界上公认的一种为害巨大的根结线虫,常造成农作物严重的经济损失.研究象耳豆根结线虫Hsp70基因相关功能有助于解析其生存适应机制,为寻找高效低毒的方法防治... 陈慧 王会芳 陈绵才关键词:抗逆性 RNA干扰 象耳豆根结线虫actin基因的克隆与分析 2014年 采用RT-PCR、cDNA末端快速扩增法(RACE),克隆了象耳豆根结线虫生长发育关键基因actin的全长cDNA序列(登录号:KF534787),并与NCBI核酸数据库进行序列比对,结果表明:序列全长1298 bp,包含一个全长1125 bp的开放阅读框ORF,编码375个氨基酸,起始密码子在82位,终止密码子在1207位,与已知的其它物种的actin具有高度的保守性,与马铃薯腐败线虫和松才线虫actin的同源性分别为99.20%和98.67%,与秀丽隐杆线虫、人类相似性分别达到98.67%和97.33%。系统发育分析表明,象耳豆根结线虫actin可能是β-actin,同时也发现了象耳豆根结线虫actin与人类的胞质actin(β-actin)更相似。本研究填补了GenBank数据库中象耳豆根结线虫内标参照基因的空白。 练冬梅 赵志祥 陈绵才 王会芳关键词:象耳豆根结线虫 全长CDNA 象耳豆根结线虫分子诊断技术研究进展 被引量:2 2015年 象耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii),被公认为是世界上最危险的根结线虫之一,它有非常广泛的寄主范围,并能克服Mi基因。因其重要性,其分子诊断技术近年来不断得到发展,其主要的分子诊断技术有直接PCR、RFLP、RAPD、LAMP及SCAR等。本文对几种主要诊断技术近年来的研究进展进行了概述。 王会芳 芮凯 符美英 王三勇 云霞 陈绵才 吴凤芝关键词:象耳豆根结线虫 PCR 分子诊断 香蕉种资资源对相似穿孔线虫的抗性鉴定 2015年 [目的]初步筛选出抗相似穿孔线虫的香蕉品种。[方法]通过在温室中采用盆栽接种方法,分别测定了13个香蕉种资资源对相似穿孔线虫种群1和种群2的抗病性。[结果]接种种群1的处理中,云南粉蕉属高抗品种,皇帝蕉(AA)属抗病品种,有7个品种表现中抗;接种种群2的处理中,没有高抗或抗病品种,有9个香蕉品种表现中抗,巴西蕉(AAA)为高感品种。[结论]试验结果为寻找抗相似穿孔线虫的香蕉品种或基因奠定了基础。 符美英 符尚娇 芮凯 陈绵才关键词:相似穿孔线虫 抗性鉴定 象耳豆根结线虫Hsp70基因的克隆与原核表达 被引量:4 2015年 采用RT-PCR、cDNA末端快速扩增法(RACE),克隆了象耳豆根结线虫Hsp70基因的全长cDNA(MeHsp70)序列。MeHsp70cDNA全长2203bp.含有1959bp的开放阅读框.编码653个氨基酸,相对分子量为71.09kDa,具有3段Hsp70家族的签名序列,GenBank登录号KF739434。同源性分析表明,氨基酸序列与其他真核生物的Hsp70序列具有很高的相似性。该Hsp70与其他物种中的Hsp70进行系统进化分析,结果显示,Hsp70的系统发育树不能体现物种间的亲缘关系,推测其反映的是不同物种间Hsp70生物学功能的相似性程度。构建了一个原核表达载体pEASY—E1-MeHsp70,当IPTG终浓度为0.4-1.0mmol/L时,能诱导表达融合蛋白。MeHsp70基因的克隆和表达,将为象耳豆根结线虫的生态适应性机理研究提供依据。 练冬梅 王会芳 赵志祥 陈绵才关键词:象耳豆根结线虫 HSP70 克隆