国家自然科学基金(30770824)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 相关作者：胡锦董万利惠国桢张艳荣金由辛更多>>
- 相关机构：上海交通大学附属第六人民医院苏州大学中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- SYBR Green实时定量PCR检测人原发脑胶质瘤中REV3和REV7基因的表达被引量：1
- 2008年
- 目的运用实时定量PCR检测跨损伤修复基因REV3和REV7在人脑原发脑胶质瘤组织中的表达水平,探讨其和肿瘤级别之间的关系。方法采用SYBR Green实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测跨损伤修复基因REV3和REV7的mRNA在85例原发胶质瘤(Ⅱ级20例、Ⅲ级20例和Ⅳ级45例)和14例正常脑组织中的表达水平,统计学分析表达水平和肿瘤级别之间的关系。结果与正常组织相比,REV3和REV7在各病理级别胶质瘤中均表达上调(P<0.05);并且REV3在Ⅳ级胶质瘤中的表达比在Ⅱ级和Ⅲ级中都要高(P<0.05)。秩相关分析表明:REV3的表达量与胶质瘤病理分级呈正相关性(r=0.454,P<0.001)。结论REV3和REV7在胶质瘤组织中均高表达,而且REV3表达水平和恶性程度有密切联系。
- 奚才华王慧博赵世光张舒羽卢大儒胡锦
- 关键词：脑胶质瘤实时定量PCRSYBR
- EphA2对神经胶质瘤细胞系U251的凋亡﹑增殖﹑迁移和侵袭的研究被引量：5
- 2009年
- 为了研究EphA2对神经胶质瘤细胞系U251在增殖、凋亡、迁移和侵袭方面所起的作用,用RT-PCR方法检测正常脑组织标本与两种恶性胶质瘤细胞系中EphA2 mRNA表达水平,然后用化学合成的针对EphA2基因的小干扰RNA(siRNA)下调该基因的表达,以检测其在U251中的生物学功能.证实了EphA2基因在正常脑组织标本中的表达水平远低于两种恶性胶质瘤细胞系.把体外化学合成针对EphA2基因的小干扰RNA(siRNA-EphA2)转染入U251细胞后,Western blot,实时定量RT-PCR检测到U251细胞中EphA2蛋白及mRNA表达水平都明显降低,并且细胞增殖受到显著抑制,同时出现了明显的细胞凋亡.伤口愈合实验(检测细胞迁移能力),Transwell小室实验(检测细胞侵袭能力)均表明,下调EphA2的表达后,细胞的迁移和侵袭能力较阴性对照组显著减弱.上述结果表明,在神经胶质瘤U251细胞中,EphA2与其恶性增殖及高度侵染性相关,可作为分子治疗的有效靶点.
- 柏燕燕史毅惠国桢张艳荣董万利胡锦金由辛
- 关键词：神经胶质瘤U251细胞小干扰RNAEPHA2
- RNA干扰介导EphB4基因表达下调对胶质瘤细胞系U251生长的影响被引量：4
- 2008年
- 目的:探讨靶向EphB4基因的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)对胶质瘤细胞EphB4 mRNA表达及细胞生长的影响。方法:体外化学合成针对人EphB4基因的小干扰RNA并转染恶性胶质瘤U251细胞系后,RT-PCR法检测EphB4 mRNA表达的变化,CCK-8检测法观察RNA干扰对肿瘤细胞增殖活性的影响,FCM检测细胞周期变化,划痕实验观察细胞的迁移能力,采用Transwell小室穿膜细胞的数量来反应细胞的侵袭能力。结果:U251细胞转染siRNA-EphB4 100nmol/L后,EphB4 mRNA的表达水平下降了75.0%,细胞增殖抑制表现为剂量依赖性,FCM检测与阴性对照相比,细胞周期不同程度阻滞于亚G1期;并且细胞的迁移能力与对照组比较有所下降,Transwell小室穿膜细胞与对照组比较明显减少。结论:siRNA-EphB4能够明显靶向并抑制U251细胞中EphB4基因的表达,而EphB4基因表达下调可使U251细胞增殖受到影响,细胞周期出现凋亡峰。转染siRNA-EphB4后U251细胞的迁移和侵袭能力受到不同程度的抑制。提示抑制EphB4基因表达有可能成为胶质瘤治疗的新方法。
- 张艳荣董万利胡锦惠国桢金由辛史毅
- 关键词：EPHB4小分子干扰
