国家自然科学基金(81300361)
- 作品数：8 被引量：34H指数：3
- 相关作者：窦科峰陶开山李霄张锐马奔更多>>
- 相关机构：第四军医大学西京医院宝鸡市中医医院第四军医大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划西京医院学科助推计划更多>>
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- 肝脏灌洗液中单个核细胞的抗菌作用研究
- 2017年
- 目的明确肝脏灌洗液中的单个核细胞(MC)的抗菌作用。方法体外实验:收集SD大鼠肝脏灌洗液中的MC细胞并分为两组,一组在培养液中添加白细胞介素(IL)-15,另一组不添加IL-15。将两组细胞分别与铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)共培养4 h后收集上清并裂解细胞。以LB平板培养检测裂解液中细菌负荷,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清中干扰素(IFN)-γ和肿瘤坏死因子(TNF)-α含量。体内实验:将40只SD大鼠自气管注入P.aeruginosa菌液(1×109 CFU/m L)并随机分为4组,每组10只:对照组,生理盐水灌胃;免疫抑制组,他克莫司(FK506)灌胃;MC细胞组,应用FK506后自尾静脉注射MC细胞1.0×108;IL-15预处理MC细胞组,应用FK506后自尾静脉注射IL-15预处理的MC细胞1.0×108。收集各组大鼠肺组织及肺泡灌洗液,以LB平板培养检测肺组织及肺泡灌洗液中的细菌负荷,ELISA、Western blot检测肺泡灌洗液、肺组织中IFN-γ和TNF-α含量。结果与单纯MC细胞比较,IL-15预处理的MC细胞体外抗菌能力显著提高,CFU仅为前者35%,且合成、释放IFN-γ、TNF-α的能力更强。与对照组大鼠比较,免疫抑制组大鼠肺脏内免疫细胞数量减少,肺组织和肺泡灌洗液中的细菌负荷量明显升高,而IFN-γ和TNF-α含量呈下降趋势。输入IL-15预处理MC细胞后可显著提高肺组织内免疫细胞数量,减轻细菌负荷量并增加IFN-γ和TNF-α分泌。结论肝脏灌洗液中的MC细胞具有良好的抗菌活性,在免疫抑制条件下可有效提升机体对机会性致病菌的免疫防御能力。
- 曹薇薇李霄徐纪茹
- 关键词：铜绿假单胞菌肝脏灌洗液单个核细胞抗感染
- 使用转人TFPI的猪骨髓间充质干细胞缓解异种凝血功能障碍的研究
- 2016年
- 目的观察使用转人组织因子途径抑制物（TFPI）的猪骨髓间充质干细胞在体外异种移植凝血障碍模型中的抗凝血作用。方法使用SV40T慢病毒载体将猪骨髓间充质干细胞永生化，并在永生化的细胞内转入人TFPI基因。在人血浆、猪主动脉内皮细胞、人单核细胞共培养的异种移植凝血功能障碍细胞模型中检测转人TFPI的猪骨髓间充质干细胞对异种凝血功能的影响。结果在转染SV40T基因后，猪骨髓间充质干细胞被成功永生化，并具有和原代细胞相同的形态和细胞表型，转入人TFPI的猪骨髓间充质干细胞可以稳定表达人TFPI，并可以在体外细胞模型中有效缓解异种移植凝血功能障碍。结论转人TFPI的猪骨髓间充质干细胞可以有效缓解人组织因子激活导致的异种移植凝血功能障碍，具备在异种移植动物实验中进行应用的潜力。
- 李霄纪洪辰张卓超马奔张玄陶开山窦科峰
- 关键词：异种移植凝血功能障碍
- 儿茶素没食子酸酯预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用被引量：2
- 2018年
- 目的观察儿茶素没食子酸酯（EGCG）预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法健康雄性sD大鼠30只，随机均分为实验组、对照组和假手术组。建立大鼠70％肝脏缺血再灌注损伤（IRI）模型。实验组术前2周用0．4mg／ml的EGCG饮用水持续喂养。HE染色观察肝脏组织学变化。血清转氨酶测定反映肝损伤；蛋白印迹（Western—blot）检测p-p85和p-AKT的表达量；PCR测定炎性因子TNF-α、IL-6和IL-1BmRNA的相对表达量；ELISA测定血清中TNF-α、1L-6和IL-1β的蛋白分泌情况。结果与对照组比较，EGCG预处理可减少血清转氨酶释放，降低组织损伤评分[AST：（550．0±66．5）IU／L比（220．0±63．5）IU／L；AUr：（376．0±25．7）IU／L比（158．0±33．1）IU／L；均P〈0．05）]。分析显示虽然实验组和对照组p-p85和p-AKT表达均增加，但实验组显著高于对照组（均P〈0．05）。实验组炎性因子TNF-α、IL-6和IL-1β mRNA相对表达量明显低于对照组（P〈0．05）；血清TNF-α、IL-6和IL-1β蛋白浓度实验组低于对照组[TNF-α：（398．0±33．4）ng／L比（211．0±23．6）ng／L；IL-6：（341．0±27．3）ng／L比（187．0±19．6）ng／L；IL-1β：（486．0±43．7）ng／L比（352．0±31．5）ng／L；均P〈0．05]。结论EGCG预处理能促进肝脏IRI过程中P13K／AKT信号进一步活化，减少炎性因子释放，发挥肝保护作用。
- 李霄张玄王权成张虹白鸽陶开山窦科峰
- 关键词：肝脏缺血再灌注损伤炎性细胞因子
- 腔内激光治疗术与静脉剥脱术治疗大隐静脉曲张疗效比较被引量：24
- 2017年
- 目的探讨腔内激光治疗术和静脉剥脱术2种方法治疗大隐静脉曲张的临床疗效。方法选取2015年10月—2016年10月于宝鸡市中医医院手术治疗的单侧大隐静脉曲张患者128例纳入课题研究,根据随机数表法分为激光治疗组(64例)和剥脱手术组(64例),分别行大隐静脉高位结扎联合腔内激光治疗术和大隐静脉高位结扎剥脱术。比较2组患者平均手术时间、平均术中出血量、术后并发症的发生率、术后恢复时间及术后复发率的差异。结果腔内激光治疗组的平均手术时间、术中出血量和术后恢复时间均明显优于静脉剥脱组(P<0.001);而2组术后并发症的发生率和再通率差异无统计学意义(P>0.05);2组术后3个月的CEAP分级较术前明显改善(P<0.05)。结论大隐静脉腔内激光治疗联合高位结扎术是治疗大隐静脉曲张的安全、有效的微创方法。
- 张锐李霄
- 关键词：腔内激光治疗大隐静脉曲张大隐静脉剥脱术
- 供体来源ImDex联合抗原特异性Treg保护大鼠肝脏移植物的研究
- 2015年
- 目的:探讨供体来源低剂量未成熟树突状细胞外来体(immature dendritic cells exosome,im Dex)联合供体抗原特异型调节性T细胞(regulatory t cells,Tregs)对于肝脏移植物的保护作用。方法:以BN->Lewis大鼠为供受体,建立大鼠原位肝移植模型。利用超高速梯度离心法获得im Dex,采用流式细胞术鉴定该im Dex的表型。不同剂量im Dex用于本移植模型,生存分析探究其对肝脏移植物的保护作用及该作用与剂量的相关关系。利用磁珠分选技术获得Treg,混合淋巴细胞培养获得供体抗原特异性Treg,将不同性质的Treg用于移植受体,验证抗原特异性Treg保护肝脏移植物。进一步探究两者联合使用的效果,应用免疫荧光、流式细胞术研究Treg在移植受体中的分布。结果:超高速梯度离心法分选出的im Dex具有im DC表型,其保护肝脏移植物的最佳作用剂量为20μg,Treg发挥保护移植物作用具有抗原特异性。两者联合应用组生存时间长于对照组(P<0.05)。病理显示,输注的Treg分布于受体移植物。结论:Im Dex联合抗原特异性Treg可以有效保护大鼠肝脏移植物。
- 马奔李霄张卓超纪洪辰王璟汪建林杨西胜王德盛陶开山窦科峰
- 关键词：外来体肝脏移植
- 异种肝移植现状与未来被引量：5
- 2014年
- 以猪为供体,利用其器官进行异种移植,是解决人体器官严重短缺的重要思路和方法。随着对异种移植排斥和人畜共感染性疾病的深入研究,以及α-1,3-半乳糖苷转移酶基因敲除猪的成功构建,以猪为供体的异种移植越来越接近于临床应用。然而,与心脏移植和肾移植相比,异种肝移植的效果仍十分有限,受体和移植肝的最长存活时间仅为14 d。本文试就异种肝移植进入临床应用的主要问题和可能的解决方法进行综述,希望对未来的临床异种移植研究提供参考。
- 窦科峰李霄陶开山潘登科周亮
- 关键词：异种移植肝脏免疫排斥
- 转人AT-Ⅲ猪骨髓间充质干细胞抑制异种移植凝血紊乱的体外研究
- 2015年
- 目的观察转染人抗凝血酶-3（hAT-Ⅲ）的猪骨髓间充质干细胞（MSC）在体外异种移植凝血模型中的抗凝血作用。方法提取a-1，3-半乳糖转移酶基因敲除小型猪的MSC，利用流式细胞术鉴定其表型。构建含hAT-Ⅲ的慢病毒载体，转染MSC，使其表达hAT-Ⅲ，分别应用逆转录聚合酶链反应、蛋白质印迹法和免疫荧光技术检测hAT_Ⅲ的表达情况。在体外人血浆和猪内皮细胞共培养体系中，分别加入转染空质粒MSC（空转染组）、转染hAT-ⅢMSC（转染组）、重组hAT-ⅢMSC（重组hAT-Ⅲ组）和经鼠抗hAT_Ⅲ阻断性抗体处理的转染hAT-Ⅲ MSC（抗hAT-Ⅲ组），并提取上清液检测凝血酶一抗凝血酶复合物（TAT）的含量，并进行复钙实验，检测凝集时间。结果提取的细胞具有MSC表型，转染后成功表达hAT-Ⅲ基因，实验组相对表达量为2．80±0．51。空转染组、转染组、重组hAT-Ⅲ组和抗hAT-Ⅲ组TAT含量为（4．33±1．20）ng／ml、（15．00±2．89）ng／ml、（22．67±1．45）ng／ml、（3．02±1．16）ng／ml；在凝血模型中转染组TAT含量高于空转染组和抗hAT-Ⅲ组（P〈0．05）。空转染组、转染组、重组hAT-Ⅲ组和抗hAT-Ⅲ组的凝集时间为（150．0±4．58）S、（172．0±5．51）s、（181．3±4．06）s和（132．7±6．12）S；转染组凝集时间少于空转染组和抗hAT-Ⅲ组（P〈0．05）。结论基因修饰的MSC能够表达hAT-Ⅲ，并可以有效抑制体外异种移植凝血模型中人血浆中的凝血酶。
- 王璟李霄张卓超马奔纪洪辰王德盛汪建林陶开山窦科峰
- 关键词：间充质干细胞基因修饰凝血酶
- 两种经腹手术入路治疗Siewert Ⅱ型和Ⅲ型食管胃结合部腺癌的效果比较被引量：3
- 2017年
- 目的两种经腹手术入路治疗SiewertⅡ型和Ⅲ型食管胃结合部腺癌(AEG)的效果比较,即全胃切除和近端胃切除的疗效比较。方法回顾性分析2007年10月~2011年5月宝鸡市中医医院普外科接受手术治疗的SiewertⅡ、Ⅲ型AEG患者51例的临床资料,其中全胃切除术32例,近端胃切除术19例。比较两组患者年龄、临床病理特征、手术时间及术中出血量、术后病理分期、营养状态及术后生存情况。结果全胃切除组在淋巴结清扫数上优于近端胃切除组,而在手术时间及术中出血则高于近端胃切除术,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者围术期并发症的发生率差异无统计学意义(P>0.05)。近端胃切除组较全胃切除组更容易在术后1年发生反流性食管炎,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者在术后1年的营养状况差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者术后5年生存率差异无统计学意义(P>0.05),Ⅲ期患者全胃切除术组5年生存率为12.50%,而近端胃切除术组5年生存率为10.53%。结论全胃切除组的反流性食管炎的发生率明显低于近端胃切除组,且没有增加手术风险,在术后营养状态与近端胃切除无明显差异,是目前SiewertⅡ、Ⅲ型AEG患者较为合适的手术方式。
- 张锐李霄
- 关键词：食管胃结合部腺癌全胃切除近端胃切除疗效
