国家自然科学基金(30770838)
- 作品数:5 被引量:7H指数:2
- 相关作者:邬力祥舒坤贤黄东谷永红韩仰更多>>
- 相关机构:中南大学重庆邮电大学中南大学湘雅三医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生一般工业技术更多>>
- PAP1/METTL9基因在肺癌细胞中表达谱的生物信息学分析被引量:4
- 2011年
- 目的研究PAP1/METTL9基因在肺癌细胞中的表达谱,进一步了解肺癌发病的分子机制。方法利用GeneSifter软件对人类正常的和永生的肺支气管表皮细胞的基因芯片数据集进行分析,并结合GO工具和KEGG通路分析其生物学意义。方法筛选出22个与PAP1/METTL9表达相关的基因,涉及到细胞分裂、蛋白质合成、免疫反应等多种生物学过程。结论 PAP1/METTL9基因在肺癌细胞中有特异性表达,可作为肺癌基因诊断与基因治疗新的候选基因。
- 舒坤贤夏燕冉启煤
- 关键词:基因本体聚类分析
- 大鼠Mettl9基因的克隆及其慢病毒表达载体的构建
- 2013年
- 目的:克隆大鼠Mettl9基因,并构建慢病毒表达载体,为研究Mettl9基因功能奠定基础。方法:提取原代培养大鼠星形胶质细胞的总RNA,应用RT-PCR方法,扩增出Mettl9基因的cDNA,克隆至pGEM-T载体上并测序;再将该基因亚克隆至慢病毒载体pLenti6.3-MCS-IRES-EGFP,测序鉴定,利用脂质体lipofectamine 2000转染至293T细胞进行包装,感染U251细胞,荧光显微镜下观察其表达。结果:Mettl9 cDNA的RT-PCR扩增产物为954 bp的基因片段,连接到pGEM-T载体后测序结果向GenBank递交获得收录号HQ898855;构建的pLen-ti6.3-Mettl9-IRES-EGFP慢病毒载体在293T细胞完成包装,测得慢病毒滴度达1.825×108TU/mL;经感染U251细胞,荧光显微镜下可见绿色荧光。结论:成功克隆了SD大鼠Mettl9基因,构建了该基因的慢病毒表达载体pLenti6.3-Mettl9-IRES-EGFP。
- 黄柏胜彭志宏韩仰舒坤贤刘发益邬力祥
- 关键词:慢病毒表达载体P53基因
- 胶质瘤细胞中miR-223对PAX6基因3'非翻译区的调控作用被引量:1
- 2014年
- 目的:明确miR-223在胶质瘤细胞中对PAX6基因3'-UTR的靶向调控作用。方法:生物信息学软件预测PAX6基因3'-UTR的靶向miRNAs;分别构建野生型和突变型PAX6基因3'-UTR双荧光素酶报告基因质粒;共转染miR-223 mimics与野生型和突变型双荧光素酶报告基因质粒于U251细胞中,双荧光素酶检测系统测定荧光素酶活性。结果:生物信息学软件预测显示PAX6可能是miR-223的靶基因;与转染野生型PAX6 3'-UTRpsiCHECKTM-2质粒组和转染突变型PAX6 Mut 3'-UTR-psiCHECKTM-2质粒组相比,miR-223 mimics能明显降低野生型荧光素酶质粒活性。结论:miR-223能够靶向负性调控PAX6基因3'-UTR的活性。
- 罗奇志邬力祥文芳韩仰黄柏胜
- 关键词:胶质瘤PAX6
- 十六烷基三甲基溴化铵修饰的单壁碳纳米管和寡核苷酸的结合及细胞毒性(英文)被引量:2
- 2011年
- 应用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)作为表面活性剂修饰单壁碳纳米管,研究CTAB修饰后的单壁碳纳米管的分散情况和表面电荷情况;观察在场发射扫描电子显微镜和透射电子显微镜下的形貌,同时还研究CTAB修饰后的单壁碳纳米管与小干扰RNA结合的最佳浓度配比,以及CTAB功能修饰后的碳纳米管对培养的人脐静脉内皮细胞的毒性。结果表明:CTAB修饰后的单壁碳纳米管分散良好,CTAB吸附到单根或成束的碳纳米管管壁上,表面带正电荷;与带负电荷的寡核苷酸分子小干扰RNA可以结合,并且CTAB-SWNT与小干扰RNA结合比例达到1:1.5到1:2之间时基本饱和;缺乏CTAB的单壁碳纳米管不能结合小干扰RNA;没有分散的单壁碳纳米管具有更大的细胞毒性,CTAB可以改善SWNTs的分散性,从而减轻单壁碳纳米管的细胞毒性。
- 阎雪彬谷永红黄东甘丽邬力翔黄利华陈哲东黄苏萍周科朝
- 关键词:寡核苷酸细胞毒性
- 羟基磷灰石纳米颗粒/NR2B-siRNA复合物减轻小鼠福尔马林炎性痛
- 2014年
- 目的:观察羟基磷灰石纳米颗粒(hydroxyapatite nanoparticles,HA)/N-甲基-D-天门冬氨酸受体2B亚基(N-Methyl-D-aspartic Acid receptor 2B,NR2B)siRNA复合物(HA/NR2B-siRNA)鞘内转染对小鼠福尔马林炎性痛的影响及脊髓背角NR2B表达的变化,初步探讨HA作为NR2B-siRNA体内转染载体的可行性.方法:制备HA/NR2B-siRNA,检测HA对NR2B-siRNA的结合能力和稳定性.选18~20 g昆明小鼠48只,随机分六组(n=8):HANR组,PEINR组,HAGFP组,HA组,NS组,SO组.术后第7天,各组行福尔马林检测后,取腰段脊髓行NR2B免疫组化检测.结果:HA/NR2B-siRNA的最佳质量比为35:1,在生理盐水重悬液中不解离.HN组和PN组的Ⅱ相痛行为显著减少(P<0.05).HN组和PN组脊髓背角NR2B阳性细胞数明显减少(P<0.05).结论:①HA能与NR2B-siRNA形成稳定的转染复合物;②鞘内注射HA/NR2B-siRNA能减少福尔马林致痛小鼠Ⅱ相痛行为并有效抑制脊髓背角NR2B的表达.
- 杨慧颜辉谷永红黄东邬力祥
- 关键词:炎性痛小干扰RNA小鼠