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北京市自然科学基金(6032008): 作品数：11 被引量：105H指数：7; 相关作者：安健汪明王黎霞张永红夏茂华更多>>; 相关机构：北京农学院中国农业大学北京动物园更多>>; 发文基金：北京市自然科学基金国家科技攻关计划北京市优秀人才培养资助更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

柔嫩艾美耳球虫交叉抗药性试验被引量：3: 2005年; 以雏鸡为试验对象,以抗球虫指数(ACI)为判断指标,检测5 mg/kg马杜霉素,70 mg/kg盐霉素,1 mg/kg 地克珠利对抗盐霉素株、抗地克珠利株和实验室保存的敏感株的控制效果。结果表明,马杜霉素对3 个虫株都有很好的抑杀效果,地克珠利也可有效地控制抗盐霉素株,同时,盐霉素也可有效地控制抗地克珠利株,说明盐霉素和地克珠利2种药物之间没有交叉抗药性。; 王黎霞安健张永红杨静夏茂华曲京红; 关键词：柔嫩艾美耳球虫抗药性盐霉素马杜霉素

柔嫩艾美耳球虫马杜拉霉素抗药株与敏感株的mRNA差异显示被引量：15: 2006年; 利用柔嫩艾美耳球虫马杜霉素敏感虫株裂殖子和抗药虫株裂殖子为材料,对马杜霉素敏感虫株和抗药虫株进行差异显示PCR,共回收34条电泳差异片段,反向Northern点杂交鉴定4个片段为真正差异片段,并对4个片段进行测序、Blast同源性比较。来自于马杜霉素抗药虫株裂殖子的ACD3-2序列与柔嫩艾美耳球虫微线-5同源性99%,说明ACD3-2序列是该基因的部分序列,微线-5蛋白与虫体融解宿主细胞膜、入侵、运动和溢出有关,在第二代裂殖子时期,抗药性虫株该序列发生转录,而在敏感虫株中沉默;HCD1序列来自马杜霉素敏感虫株,与柔嫩艾美耳球虫表面抗原16和17序列同源性分别为83%和86%,说明与这2个基因同源。AGD5片段来自抗药虫株,HAD8-2序列来自敏感虫株,通过比较这2条序列可能为新序列。; 安健汪明樊宝良赵兴波李宁; 关键词：柔嫩艾美耳球虫裂殖子

鸡柔嫩艾美耳球虫单卵囊分离技术的建立被引量：20: 2004年; 以玻璃纸做材料,用单卵囊分离技术,对柔嫩艾美耳球虫进行了分离,实验室单卵囊感染26只鸡,在感染后5～12d,用饱和盐水漂浮集卵法进行检测,其中10只鸡检出卵囊,结果表明,该单卵囊分离技术简单易行,单卵囊感染成功率达38%,单卵囊技术的关键步骤为:(1)滴管拉的尽量细,(2)滴液尽量小,(3)要耐心观察,(4)实验鸡在0～7日龄。; 安健汪明王黎霞郝霖雨郭睿徐建华; 关键词：柔嫩艾美耳球虫单卵囊

离体条件下球虫卵囊子孢子囊的释放被引量：3: 2006年; 利用柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)为试验虫株,盖玻片、载玻片为实验材料,用拇指适当施加压力时,在400倍的光学显微镜下,观察了柔嫩艾美耳球虫卵囊破裂和子孢子囊释放的过程,结果发现,卵囊在适当压力的作用下,在卵囊一端发生破裂,随后子孢子囊逐个从破裂口处溢出,溢出后的子孢子囊内含有2个子孢子,说明球虫卵囊虽然对常规的消毒剂抵抗力很强,但是在鸡的消化道内,尤其在肌胃内球虫卵囊很容易破裂而释放子孢子囊。; 安健王黎霞汪明张建军李翠莲高立娜; 关键词：柔嫩艾美耳球虫卵囊

mRNA差异显示PCR的研究进展被引量：10: 2005年; mRNA差异显示PCR技术是在基因转录水平上研究差异表达和性状差异的有效方法之一,该方法在生物的发育、性状和对各种生物、理化因子作用时应答过程基因表达的研究中应用十分广泛,笔者简述了mRNA差异显示PCR技术的基本原理、技术改进以及此技术在球虫抗药性研究中的应用。; 安健汪明王黎霞杨静夏茂华; 关键词：球虫抗药性

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因的克隆、原核表达及生物活性鉴定被引量：2: 2010年; 为了探讨粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)在免疫中的作用,根据GenBank上发表的鸡GM-CSF基因序列设计特异引物,采用RT-PCR法对球虫免疫后的海蓝灰蛋鸡盲肠扁桃体中GM-CSF基因进行克隆和序列分析;设计GM-CSF原核表达引物,原核表达GM-CSF融合蛋白,通过菌体裂解,包涵体的洗涤、溶解、复性后,过Sepharose4B柱纯化融合蛋白,采用抗病毒试验和淋巴细胞增殖试验检测表达蛋白的生物活性。结果显示,从人工感染柔嫩艾美耳球虫的海蓝灰蛋鸡盲肠扁桃体中扩增到了435bp的DNA片段;序列分析表明其与GenBank中报道的鸡GM-CSF序列仅有1个碱基的差异,与哺乳动物的同源性在35.2%～45.4%;原核表达了海蓝灰蛋鸡GM-CSF,分离纯化的融合蛋白在抗病毒活性试验和淋巴细胞增殖试验中证明具有一定的生物学活性。; 王黎霞徐赓王彩霞安健; 关键词：粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子原核表达生物活性

柔嫩艾美球虫裂殖子的分离纯化被引量：15: 2003年; 采用标准分样筛过滤、离心洗涤、差速离心和DEAE 5 2纤维素柱层析法对球虫裂殖子进行了纯化 ,并对不同填充高度的DEAE 5 2纤维素层析柱的纯化效果进行了比较。结果表明 ,采用填充高度为 14cm的层析柱分离纯化效果较好 ,操作程序较简单 ,从 30只鸡的盲肠黏膜中纯化裂殖子 1.85× 10 7个 ,平均每只鸡获得裂殖子 6 .17× 10 5个 ,所获得的裂殖子杂质极少 ,其纯度适用于mRNA差异显示等分子生物学研究。; 安健汪明韩春来吴艳花沈伟; 关键词：柔嫩艾美球虫裂殖子分离纯化鸡球虫

球虫抗药性分子生物学检测技术的建立被引量：11: 2007年; 选择在敏感虫株中沉默、抗药虫株中表达的特异序列AGD5设计检测引物,采用RT-PCR方法,以总RNA反转录的cDNA为模板,RT-PCR方法能够鉴别马杜霉素抗药虫株和3株马杜霉素敏感虫株(2株对所有药物敏感的不同地理株,1株地克珠利抗药性虫株对马杜霉素敏感),此鉴定结果与鸡体试验的结果一致,说明敏感虫株和抗药虫株在该序列上的差异发生在转录水平。而以卵囊总DNA为模板的PCR方法不能鉴别敏感和马杜霉素抗药性虫株。; 安健汪明王黎霞盛守强; 关键词：柔嫩艾美耳球虫抗药性 PCR

北京市自然科学基金(6032008)