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广西教育厅科研项目(200103YB154)

作品数：5 被引量：27H指数：1
相关作者：段斯亮于声苏晓庆马新博宫汝飞更多>>
相关机构：广西科技大学贵阳医学院更多>>
发文基金：广西教育厅科研项目更多>>
相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 3篇生物学
  • 2篇医药卫生
  • 1篇农业科学

主题

  • 3篇酶链反应
  • 3篇聚合酶
  • 3篇聚合酶链反应
  • 3篇基因
  • 3篇贵阳腐霉
  • 3篇合酶
  • 2篇上游调控序列
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白酶基因
  • 1篇药理
  • 1篇药理作用
  • 1篇药理作用研究
  • 1篇药理作用研究...
  • 1篇叶黄酮
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光蛋白
  • 1篇增强型绿色
  • 1篇增强型绿色荧...
  • 1篇融合基因
  • 1篇柿叶

机构

  • 5篇广西科技大学
  • 3篇贵阳医学院

作者

  • 4篇于声
  • 4篇段斯亮
  • 3篇苏晓庆
  • 1篇宫汝飞
  • 1篇马新博

传媒

  • 2篇广西医科大学...
  • 1篇生物技术
  • 1篇中医药学报
  • 1篇广西医学

年份

  • 1篇2014
  • 2篇2013
  • 2篇2012
共 5 条 记 录，以下是 1-5
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排序方式：
适于Panhandle PCR模板的贵阳腐霉基因组DNA的提取方法被引量：1
2014年
目的:探索适合作为锅柄聚合酶链反应(Panhandle PCR)模板的贵阳腐霉基因组DNA的提取方法。方法:采用氯化苄法、微波法、改良的SDS法提取贵阳腐霉基因组DNA,利用核酸蛋白检测仪及琼脂糖凝胶电泳法测定其纯度和浓度,并比较其作为Panhandle PCR模版的扩增效果。结果:氯化苄法、微波法、改良的SDS法均能提取到贵阳腐霉基因组DNA,氯化苄法提取的基因组DNA纯度及含量较高。而且氯化苄法提取的基因组DNA扩增的条带专一,特异性强。结论:氯化苄法提取的贵阳腐霉基因组DNA最适合作为Panhandle PCR的模板。
于声段斯亮
关键词：贵阳腐霉基因组
柿叶黄酮药理作用研究进展被引量：25
2012年
简要综述了柿叶的有效成份柿叶黄酮类化合物提取分离方法、药理作用研究进展,为进一步研究及开发我国柿叶资源提供了参考。
马新博宫汝飞
关键词：柿叶黄酮药理作用
贵阳腐霉Pr1基因上游调控序列的克隆及分析被引量：1
2012年
目的:克隆贵阳腐霉类枯草菌素蛋白酶(Pr1)基因上游调控序列并进行分析,进一步了解Pr1基因的表达规律。方法:采用锅柄聚合酶链反应法(Panhandle PCR)扩增Pr1基因上游调控序列,并利用真核生物启动子分析软件对扩增序列进行启动子顺式作用元件预测分析。结果:获得864bp基因序列,分析表明,该序列包含2个TATA框,一个可能的转录起始区,并具备氮调控因子结合位点(相隔很近的GATA序列),碳调控因子结合位点(5’SYGGRG 3’)。这与Pr1的表达受碳/氮抑制的结果一致。结论:Panhandle PCR方法成功克隆贵阳腐霉Pr1基因上游调控序列,GenBank登录号为:JQ975036。
段斯亮于声苏晓庆
关键词：贵阳腐霉上游调控序列
锅柄聚合酶链反应法扩增贵阳腐霉Pr1基因上游未知序列
2013年
目的在灭蚊真菌贵阳腐霉Pr1基因已知序列的基础上,利用锅柄聚合酶链反应法扩增Pr1基因上游未知序列。方法首先采用限制性内切酶BamHⅠ对基因组DNA进行完全酶切,用小牛肠碱性磷酸酶去磷酸化后,与5'磷酸化的寡核苷酸链连接,经过变性、链内退火和聚合酶延伸形成锅柄状,最后进行嵌套式PCR。结果获得了Pr1基因已知序列上游864bp核苷酸序列,GenBank登录号为:JQ975036。结论锅柄聚合酶链反应法可以高度有效地扩增与已知位点相邻的基因组片段,是一种可靠的染色体步移法,有利于Pr1基因全长的克隆。
段斯亮于声苏晓庆
关键词：上游调控序列染色体步移贵阳腐霉
Pr1基因和绿色荧光蛋白基因融合表达载体的构建
2013年
目的:以增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)基因为报告基因,类枯草菌素蛋白酶(sub-tilisin-like protease,Pr1)基因为目的基因,分别构建含有EGFP-Pr1和Pr1-EGFP融合基因的原核表达载体。方法:将Pr1基因分别连接到EGFP基因的上游和下游,插入质粒pTWIN1,构建表达载体pEGFP-Pr1和pPr1-EGFP。结果:经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,重组菌株在长波紫外线的照射下,均能发出明亮的绿色荧光,并且诱导菌株破碎后均可检测到Pr1蛋白酶的活性。结论:应用基因工程技术成功构建pPr1-EGFP和pEGFP-Pr1融合基因表达载体,EGFP作为Pr1生物标记分子,有利于进一步开展Pr1基因的特异性功能研究。
段斯亮于声苏晓庆
关键词：增强型绿色荧光蛋白融合基因
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