浙江省教育厅科研计划项目(Y200803445)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 相关作者：张丽芳巩文词陈俊朱珊丽文金生更多>>
- 相关机构：温州医学院温州医学院附属第二医院温州医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：浙江省教育厅科研计划国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 间接免疫荧光法检测沙眼衣原体包涵体抗原的研究被引量：1
- 2010年
- 目的探讨基于沙眼衣原体全菌体兔血清抗体的间接免疫荧光法检测沙眼衣原体包涵体抗原的研究。方法将6×103IFU沙眼衣原体接种于Hep-2细胞,培养72 h,PCR检测验证;以兔抗沙眼衣原体全菌体血清抗体为一抗,用免疫荧光法检测沙眼衣原体包涵体抗原,同时采用传统的Giemsa染色、Lugol′s碘染对沙眼衣原体包涵体进行鉴定,并统计和比较其包涵体的检出率。结果经PCR鉴定为阳性的沙眼衣原体感染的Hep-2细胞,间接免疫荧光检测在细胞浆中出现绿色荧光,检出率为28.84%;经Giemsa染色和Lugol′s碘染验证胞浆中存在典型的包涵体结构,检出率分别为15.19%和17.36%,与免疫荧光法比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论基于兔抗沙眼衣原体全菌体血清的间接免疫荧光法可显著提高沙眼衣原体包涵体的检出率。
- 巩文词朱珊丽赵朋云王佳陈俊陈韶李文姝张丽芳
- 关键词：间接免疫荧光法沙眼衣原体包涵体
- 人白细胞抗原-A＊0201限制性丙型肝炎病毒细胞毒性T淋巴细胞表位的鉴定被引量：3
- 2010年
- 目的 鉴定人白细胞抗原（HLA）-A＊0201限制性HCV-CTL表位.方法 基于RANKpep和SYFPEITHI细胞表位预测软件预测结果,选择合成6条候选CTL表位.研究候选CTL表位肽与T2细胞表达的HLA-A＊0201分子的亲和力,进一步采用酶联免疫斑点实验（ELISPOT）和细胞内细胞因子染色（ICS）实验研究HLA-A＊0201高亲和力肽在HLA-A＊0201阳性HCV感染者的外周血单个核细胞（PBMC）中刺激CTL反应情况.结果 在6条候选CTL表位肽中,肽C_181（LLSCLTTPV）和NS2_172（VLQAGLIRV）与HLA-A＊0201分子有高亲和力,其亲和力随肽浓度增加而升高.在10例HLA-A＊0201阳性HCV-1b感染者每1×105PBMC中,肽C_181和NS2_172刺激后,特异性分泌IFN-γ细胞的斑点形成细胞数（SFC）分别为0～19和0～20.肽C_181和NS2_172特异性IFN-γ＋CD8＋T淋巴细胞占CD8＋T淋巴细胞的比例分别为0.006%～0.065%和0.005%～0.080%.结论 肽C_181（LLSCLTTPV）和NS2_172（VLQAGLIRV）为HLA-A＊0201 限制性HCV-CTL表位.
- 陈俊段志良巩文词陈永平张丽芳张琴文金生
- 关键词：肝炎病毒属酶联免疫斑点技术
- HPV6L1/CtMOMP多表位融合基因在COS-7细胞的表达及其在小鼠的免疫效果观察被引量：2
- 2010年
- 研究人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)6b结构蛋白L1(HPV6b L1)基因佐剂增强沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)主要外膜蛋白(MOMP)多表位(Ct MOMP168)DNA疫苗的免疫效果的可能性.构建pcDNA3.1(+)/HPV6b L1/Ct MOMP168融合重组质粒,转染COS-7细胞,用RT-PCR、激光共聚焦显微技术及Western印迹技术检测其表达.分别用pcDNA3.1(+)/HPV6b L1/Ct MOMP168、pcDNA3.1(+)/Ct MOMP168及pcDNA3.1(+)质粒肌肉免疫BALB/c小鼠,ELISA检测外周血中IgG及阴道分泌物中sIgA.结果表明,pcDNA3.1(+)/HPV6b L1/CtMOMP168可在COS-7细胞中表达;Ct MOMP168组和HPV6b L1/Ct MOMP168组均可刺激小鼠产生抗Ct MOMP特异性的抗体,抗体滴度随免疫次数增加而升高,且HPV6b L1/Ct MOMP168组小鼠产生的抗体滴度明显高于Ct MOMP168组(P<0.05).结果提示,分子佐剂HPV6b L1与CtMOMP多表位基因融合能够显著增强Ct MOMP多表位DNA疫苗的体液免疫应答.
- 许文石朝辉朱珊丽陆丽君孟锐峰李玲张丽芳
- 关键词：人乳头瘤病毒沙眼衣原体主要外膜蛋白DNA疫苗
