国家自然科学基金(81300405)
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
- 相关作者：沈莉菁陈芳源蔡佳翌钟济华钟华更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Notch1高表达急性T淋巴细胞白血病发病中细胞增殖的相关机制被引量：2
- 2018年
- 目的探讨Notch1高表达急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）发病中，细胞增殖的相关机制及靶向药物干预效价。
方法选择Notch1高表达的T-ALL细胞株（A3、MOLT-4、Jurkat细胞株）和来源于20例健康志愿者的外周血单个核细胞（PBMC）为研究对象。采用不同浓度（0、50、100 nmol/L）的细胞周期抑制剂palbociclib处理T-ALL细胞株与PBMC，采用CCK-8法检测其细胞增殖状态，计算不同浓度palbociclib处理时的半数抑制浓度（IC50）值，细胞涂片观察细胞形态，并且采用流式细胞术分析T-ALL细胞株与PBMC的细胞周期变化，实时荧光定量（RT）-PCR检测相关基因mRNA的相对表达水平。采用t检验比较不同浓度palbociclib处理后T-ALL细胞株与PBMC相关基因mRNA的相对表达水平等呈正态分布计量指标。结果①A3、MOLT-4细胞株Notch1基因表达的灰度值百分比，分别为（62.3±3.40）%、（77.6±4.71）%，显著高于PBMC的（20.8±1.53）%，并且差异均有统计学意义（t=6.236、10.034，P=0.025、0.008）；Jurkat细胞Notch1基因表达的灰度值百分比为（28.5±1.36）%，与PBMC比较，差异无统计学意义（t=1.257，P=0.430）。②相较于PBMC，MOLT-4细胞株增殖活性被palbocicib显著抑制，其次为A3细胞株，并且3种细胞增殖活性抑制呈明显时间和浓度依赖。经palbocicib处理48 h后，A3及MOLT-4细胞株的IC50值分别为（0.43±0.12）μmol/L和（0.10±0.06）μmol/L，显著低于PBMC的（0.83±0.15）μmol/L，前二者分别与后者相比，差异均有统计学意义（t=12.354、7.486，P=0.006、0.015）。③细胞形态结果显示，相较于PBMC，经palbocicib 100 nmol/L处理后，A3和MOLT-4细胞株的细胞增殖受到明显抑制，细胞分散，簇状增殖现象消失。④细胞周期检测结果显示，经palbocicib 50 nmol/L处理时S＋G2期A3、MOLT-4细胞株的细胞比例较palbocicib 0 nmol/L处理时显著降低，并且差异均有统计学意义（t=5.358�
- 李香沈莉菁陈芳源高晓钟华蔡佳翌张义炜朱迪
- 关键词：急性病细胞增殖
- 三氧化二砷对白血病细胞EVI-1基因作用的研究被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)对白血病细胞中EVI-1基因的作用。方法:采用1μmol/L的As2O3处理1例高表达EVI-1基因的急性单核细胞白血病患者的原代细胞,并用反转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测细胞的EVI-1 mRNA表达率;同时采用RT-PCR检测人白血病细胞株K562、HL-60、U937和THP-1中EVI-1 mRNA基因的相对表达量。选取EVI-1 mRNA表达量最高的THP-1细胞株作为研究对象,经多位点PCR测序确认其包含EVI-1基因全长片段后,分别以1、3、5μmol/L的As2O3处理THP-1细胞株,观察细胞形态变化,CCK8检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR检测EVI-1 mRNA表达率,蛋白质印迹法检测细胞内EVI-1蛋白的表达情况。结果:As2O3能下调原代细胞中EVI-1 mRNA,抑制THP-1细胞株增殖、诱导其凋亡,且呈剂量、时间依赖性;As2O3能下调THP-1细胞株EVI-1 mRNA、EVI-1蛋白的表达。结论:As2O3通过抑制白血病细胞EVI-1 mRNA、EVI-1蛋白的表达,从而促进其凋亡。
- 周凌云陈芳源沈莉菁万海霞钟济华蔡佳翌
- 关键词：三氧化二砷凋亡
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂阻断ERK/MAPK信号通路抗急性T淋巴细胞白血病的机制研究被引量：3
- 2019年
- 目的探讨选择性组蛋白去乙酰化酶抑制剂西达本胺对急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞株A3和Molt-4增殖和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法通过Oncomine数据库挖掘分析组蛋白去乙酰化酶(HDAC)1-11在不同类型白血病中的mRNA表达情况。采用CCK-8法检测不同浓度的西达本胺对A3和Molt-4细胞增殖的影响并计算IC 50值;流式细胞术AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;Western blot法检测组蛋白H3第9位赖氨酸(H3K9)乙酰化、凋亡信号通路和ERK/MAPK信号通路蛋白表达水平。结果HDAC1、2、3、9、10在T-ALL中的表达水平高于正常对照组(P<0.05)。经不同浓度西达本胺处理后,A3和Molt-4细胞存活率显著低于对照组(P<0.05),且呈时间-浓度依赖性。随西达本胺药物浓度的增加,A3和Molt-4细胞的凋亡率与对照组相比均显著增加(P<0.05);与对照组比较,组蛋白H3K9乙酰化、BAX、cleaved caspase-9、cleaved PARP蛋白表达均显著增加(P<0.05);Bcl-2、Mcl-1以及MAPK通路关键蛋白p-ERK1/2表达则显著减少(P<0.05)。结论T-ALL中高表达Ⅰ类HDAC1、2、3和Ⅱ类HDAC9、10。选择性组蛋白去乙酰化酶抑制剂西达本胺可有效抑制T-ALL细胞株A3和Molt-4的增殖,并通过线粒体凋亡途径诱导凋亡,其作用机制可能与抑制ERK/MAPK信号通路有关。
- 高晓沈莉菁刘嘉颖李香
- 关键词：T-ALL去乙酰化酶抑制剂线粒体凋亡途径
- 黄酮联合阿霉素协同诱导HL60/ADR细胞凋亡机制的研究被引量：1
- 2014年
- 目的:探究黄酮在体外对多药耐药细胞系HL60/ADR的影响及联合阿霉素后对细胞生长抑制和凋亡的作用机制,探讨中药在白血病化疗中扶正、增效的可能性。方法:用CCK-8法检测黄酮和阿霉素对HL60/ADR细胞生长的抑制作用;用流式细胞仪检测药物作用后的细胞凋亡率,并在光镜下观察细胞形态变化;蛋白印迹法检测药物作用后凋亡信号通路蛋白表达的情况;流式细胞仪检测药物作用后HL60/ADR线粒体跨膜电位的变化。结果:黄酮能显著抑制HL60/ADR细胞的增殖,且其抑制细胞增殖效应呈现浓度-时间依赖性;不同浓度的黄酮及联合阿霉素1.5μg/mL(20%抑制浓度即IC20值)后对细胞的抑制作用更明显,具有协同和相加作用。75μg/mL和100μg/mL黄酮能促进HL60/ADR细胞凋亡,而黄酮联合阿霉素的促凋亡作用更显著。蛋白信号通路研究显示,单药黄酮及两药联合能使HL60/ADR细胞线粒体膜电位下降,抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-XL表达明显下调,促凋亡蛋白Bim、Bad、Bax明显增加,激活caspase途径;同时磷酸化的P-JNK蛋白表达水平升高,而P-ERK明显下降。结论:黄酮联合阿霉素可通过线粒体跨膜电位的下降,依赖caspase活化调控Bcl-2家族中Bim、Bad和Bax蛋白表达,下调ERK细胞保护通路并上调JNK应激相关通路,最终协同抑制HL60/ADR细胞增殖并诱导其凋亡。
- 陈芳源张旻玥蔡佳翌沈莉菁钟济华曹兰芳
- 关键词：黄酮阿霉素凋亡HL60
- 三氧化二砷对Molt-4细胞株Notch信号通路作用机制的研究被引量：1
- 2015年
- 目的 :探讨三氧化二砷(As2O3)对急性淋巴细胞白血病细胞株Molt-4中Notch1基因的作用机制。方法 :采用反转录(RT)-PCR检测正常人外周血淋巴细胞与急性淋巴细胞白血病细胞株A3和Molt-4中Notch1基因m RNA的相对表达量,选取Notch1 m RNA表达量较高的Molt-4细胞,分别经浓度0、2、4μmol/L As2O3处理细胞后,应用细胞计数试剂盒(CCK8)检测细胞活力,显微镜下观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR检测Notch1 m RNA表达率,蛋白质印迹法检测细胞内Notch1、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及胱天蛋白酶3(caspase-3)凋亡蛋白的表达情况。结果:As2O3能下调Molt-4细胞中Notch1基因及蛋白的表达,降低Bcl-2/Bax蛋白比例,并促进凋亡蛋白胱天蛋白酶3的活化,2μmol/L As2O3处理后,随作用时间延长,Molt-4细胞的凋亡率逐渐增高(r=0.989,P<0.05)。Molt-4细胞分别经2μmol/L和4μmol/L As2O3处理72 h后,流式结果显示,随As2O3浓度升高,Molt-4细胞凋亡率升高(r=1.000,P<0.05)。As2O3以时间和浓度依赖的方式诱导Molt-4细胞凋亡。结论:As2O3通过抑制Molt-4细胞株Notch1信号通路的表达,抑制其增殖并诱导凋亡。
- 刘海艳沈莉菁陈芳源万海霞钟济华王婷钟华
- 关键词：NOTCH三氧化二砷MOLT-4细胞
- Notch及Wnt信号通路与急性T淋巴细胞白血病
- 2014年
- 急性T淋巴细胞白血病（T acute lymphoid leukemia,TALL）是一种高度恶性的血液系统恶性肿瘤,在儿童和成人中发病率较高,且患者常伴随表达T细胞免疫表型的不成熟淋巴细胞浸润骨髓。流行病学显示,T-ALL分别占儿童ALL的10%~15%及成人ALL的25%。
- 刘海艳沈莉菁陈芳源
- 关键词：T淋巴细胞白血病NOTCHWNT
- 细胞增殖在Notch1高表达急性T淋巴细胞白血病中的作用研究
- 研究背景:急性T淋巴细胞白血病(Acute T cell leukemia,T-ALL)是一组起源于T系淋巴祖细胞的血液系统恶性肿瘤,多见于儿童及40岁以上成人。T-ALL患者通常白细胞高,易浸润神经系统,并伴有纵隔肿块...
- 李香
- 关键词：NOTCH1急性淋巴细胞白血病T细胞
- 文献传递
