国家高技术研究发展计划(2006AA10A108)
- 作品数：12 被引量：97H指数：5
- 相关作者：王玉美华金平王芙蓉张军甄军波更多>>
- 相关机构：中国农业大学湖北省农业科学院山东棉花研究中心更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项山东省农业良种工程项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学自动化与计算机技术更多>>
- 棉花T-DNA标签雄性不育突变体的遗传分析被引量：3
- 2010年
- 利用农杆菌介导T-DNA插入得到棉花雄性不育突变体,与野生型陆地棉(Gossypium hirsutumL.)Coker312杂交得到F1代。F1代植株出现了不育与可育两种性状的分离,分离比是1∶1。对F1代进行形态学观察、卡那霉素和除草剂抗性鉴定、PCR扩增检测以及遗传学分析,证实雄性不育突变性状的表现与T-DNA插入共分离,从而认为突变是由T-DNA插入引起的显性杂合突变,这为利用T-DNA标签法进行雄性不育有关基因的克隆奠定了基础。
- 张玉芹高俊平张晋王芙蓉张军
- 关键词：棉花雄性不育突变体
- 肌动蛋白基因在棉花纤维中的作用研究被引量：8
- 2008年
- 运用农杆菌介导法将肌动蛋白RNAi表达载体PBI121-GhACT1转化棉花,经胚胎发生获得再生植株。非转化组培再生苗作为对照。以NPTII制备探针,Southern杂交结果表明,获得8个独立遗传转化系,其中3个系有2个拷贝插入;其余6个系为多拷贝。显微镜下观察开花后第5天的幼胚珠孔端,对照纤维长度约是RNAi载体转基因的3-5倍。成熟后绒长F测验结果表明,RNAi载体转化株与对照差异显著,RNAi转基因植株的绒长显著短于对照。说明GhACT1基因对纤维有延缓和抑制作用,并且主要作用于纤维发育早期。
- 范小平范博红李学宝杨维才徐子勤
- 关键词：肌动蛋白绒长
- 棉花纤维素合酶基因GhcelA1克隆及其载体构建
- 2009年
- 根据GeneBank中GhcelA1(U58283)序列,利用RT-PCR技术,从棉纤维中克隆到Gh-celA1 cDNA全长。运用基因重组技术,构建pCAM2300-35S-GhcelA1过表达载体;融合基因表达载体pCAM2300-35S-GhcelA1-EGFP,以及pCAM2300-35S-GhcelA1-RNAi载体,这些载体均通过限制性酶切鉴定和测序验证。农杆菌介导法将融合基因转化棉花子叶,通过激光共聚焦荧光显微镜,在蓝色激发光下观察诱导的愈伤,发现在转化的活体细胞核与质膜内侧有绿色荧光,说明融合基因载体EGFP构建正确,可以在棉花中正常表达。所构建的系列载体可用于转化棉花,促进纤维素在棉纤维中合成与积累。
- 范小平范博红徐子勤杨维才
- 关键词：棉花纤维素合酶基因克隆
- 棉花GhBI-1基因全长cDNA的克隆与表达分析被引量：4
- 2011年
- BI-1(Bax inhibitor-1)是广泛存在于生物体中控制细胞凋亡的抑制因子。过表达BI-1基因能够提高植物抵御病原体侵害和抗逆境的能力。本研究利用已知的部分BI基因序列,通过RACE获得2个全长cDNA序列,分别命名为GhBI-1a与GhBI-1b。序列分析表明,2个基因的核酸序列同源性达到86%,氨基酸序列同源性达到87%,GhBI-1a蛋白有6个跨膜区域,GhBI-1b有7个跨膜区域;2个GhBI-1基因在不同组织中均表达,GhBI-1a在接菌诱导后表达量没有变化,而GhBI-1b接菌后表达量上调;通过与棉属其他物种的核酸序列进行比对,推测GhBI-1a基因位于异源四倍体棉的D染色体亚组,而GhBI-1b位于A染色体亚组。
- 郑玲张玉芹张传云刘国栋王芙蓉张军
- 关键词：陆地棉全长CDNARACE
- 陆地棉盐胁迫应答基因GhWRKY41的克隆与分析被引量：5
- 2016年
- 为研究转录因子GhWRKY41在陆地棉盐胁迫应答过程中的作用,基于差减文库分析结果,利用RT-PCR和RACE技术,克隆了GhWRKY41基因(GenBank登录号为HM002635)。该基因cDNA长度为1 630bp,含有ORF(Open reading frame)为1 068bp,编码355个氨基酸的多肽,包含2个内含子。通过瞬时表达分析亚细胞定位,结果表明,转录因子GhWRKY41定位于细胞核,符合转录因子特性。转基因株系发芽试验结果表明,过量表达GhWRKY41基因,可显著提高转基因棉花在干旱、盐和低温胁迫下的发芽率;利用Real-time PCR技术,证明在盐和干旱胁迫条件下,转基因株系中GhWRKY41基因的表达量显著上升。GhWRKY41基因在根、茎和叶片中表达存在差异,根系中胁迫6h上调达到最高,茎中则胁迫48h达到最高,而叶片中仅6和24h上调表达。进一步比较转基因棉花与野生型棉花的纤维品质性状,结果表明GhWRKY41的过表达可以提高转基因棉花的衣分。因此,GhWRKY41参与了棉花响应盐和干旱胁迫应答过程,且过表达可提高转基因棉花耐盐性和耐旱性。
- 苏莹甄军波张曦王玉美李乐华金平
- 关键词：陆地棉盐胁迫发芽率
- 绿色棉遗传规律分析及其对产量和纤维品质的影响被引量：5
- 2009年
- 通过天然红叶绿色棉和绿叶白色棉的杂交,统计分析F1,F2代叶与纤维色泽的遗传分离规律,以及色素对纤维生长的影响。验证了红叶色素和绿色长绒色素性状是由两对位于两条染色体上,由独立遗传的不完全显性基因控制;而绿短绒为完全显性遗传,并且与绿长绒性状位于同一染色体上,由两对非等位基因控制,其遗传距离为1.26 cM。同时,t测验统计分析结果显示,绿纤维棉株的衣分和绒长极显著低于白色棉,说明纤维中绿色色泽有阻碍棉花纤维生长发育作用;红叶对铃重与铃数以及纤维长度和衣分都没有显著影响。因此,在改良彩棉纤维色泽的同时要与提高纤维品质研究相结合,达到共同提高的目的。
- 范小平范博红徐子勤杨维才
- 关键词：棉花染色体基因纤维品质
- 高产、抗病转基因抗虫棉新品种鲁棉研37号被引量：9
- 2009年
- 张军王芙蓉张传云刘国栋陈万杰
- 关键词：转基因抗虫棉非转基因抗黄萎病父本杂交系统选育
- 陆地棉转录因子基因GhC2H2的克隆与功能分析被引量：5
- 2016年
- C2H2型锌指蛋白在植物生长发育、非生物胁迫响应过程中起关键作用。基于实验室前期工作,分析盐胁迫下陆地棉根系抑制性差减杂交文库,筛选得到1个盐胁迫应答基因GhC2H2。结合RACE(Rapid amplification of cDNA ends)和RT-PCR(Reverse transcription-polymerase chain reaction)技术克隆该基因全长,通过瞬时表达分析其细胞定位,采用Real time-PCR分析其在盐胁迫下的陆地棉根、茎、叶中的表达模式,并测定了转入该基因的株系在正常土壤和盐碱地的铃重、衣分和纤维品质指标。该基因GenBank登录号为HM002632,编码区全长819 bp,编码272 aa;其编码蛋白包含2个C2H2锌指结构域,定位于细胞核;该基因在不同组织中均受盐胁迫诱导上调表达,且在胁迫诱导初期上调量最大,推测该基因参与早期盐胁迫应答。对转基因后代株系性状分析表明,该基因的过表达可以提高转基因棉花衣分、改良纤维品质,推测GhC2H2既参与盐胁迫应答过程,也参与纤维发育调控。
- 苏莹甄军波张曦王玉美华金平
- 关键词：陆地棉基因克隆盐胁迫应答基因功能
- 陆地棉两个GhBI-1基因的生物信息学分析被引量：4
- 2011年
- BI-1基因是广泛存在于真核生物、原核生物和病毒中的一个保守性基因,具有抑制细胞凋亡的作用。本研究对克隆到的两个陆地棉BI-1基因——GhBI-1a和GhBI-1b进行生物信息学分析,发现其与拟南芥BI-1有很高的同源性,尤其羧基尾极为相似。GhBI-1a有6个跨膜区域,GhBI-1b有7个跨膜区域,它们的二级结构也与其他物种的BI-1相似,跨膜区域基本都是α螺旋。
- 郑玲霍雪寒王芙蓉张军
- 关键词：陆地棉CDNA生物信息学
- 棉花盐胁迫应答基因GhCPK5的克隆及序列分析被引量：5
- 2011年
- 本研究克隆了1个陆地棉新的钙依赖蛋白激酶基因GhCPK5(Genbank登录号为:HM002634)。GhCPK5基因组DNA序列全长3 031 bp,包含一个1 707 bp的开放阅读框,具有7个外显子和6个内含子。GhCPK5可能定位于细胞核内,有568个氨基酸残基,分子量为63 ku。氨基酸序列分析表明,陆地棉GhCPK5与杨树PtCPK5同源性达到89%,同样包含完整的激酶结构域和4个EF-hand结构域。RT-PCR分析表明,该基因在根、茎、叶等组织中表达;在盐胁迫处理下,GhCPK5在各组织的表达量明显上升。
- 甄军波张曦王玉美翟志席李召虎华金平
- 关键词：棉花盐胁迫应答RACE
